本文關(guān)鍵詞：氟對小鼠海馬神經(jīng)毒性作用及相關(guān)基因的影響，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：[目的]研究氟對小鼠海馬組織中CREB、BDNF、NCAM、SCF 和 VEGF在基因和蛋白水平的表達,以期探索氟對海馬神經(jīng)發(fā)生的影響,探索氟的神經(jīng)毒性作用,為臨床氟中毒癥狀和進一步采取干預(yù)措施提供動物性實驗依據(jù)。[方法]選用昆明雄性小鼠48只,適應(yīng)環(huán)境一周后,按體重隨機分成對照組、低氟組、中氟組和高氟組,每組12只。對照組供給蒸餾水,處理組依次供給含有25、50、100mg/L NaF的蒸餾水并在同一條件下飼養(yǎng)。攻毒8周后處死,采用HE染色、透射電子顯微鏡、QRT-PCR以及western blotting等技術(shù)手段對小鼠海馬形態(tài)學(xué)、海馬突觸超微結(jié)構(gòu)以及神經(jīng)發(fā)生相關(guān)因子cAMP應(yīng)原件結(jié)合蛋白(CREB)、腦源性生長因子(BDNF)、神經(jīng)細胞粘附因子(NCAM)、干細胞因子(SCF)、血管內(nèi)皮生長因子(VEGF) mRNA基因和蛋白表達水平進行了檢測。[結(jié)果]1.HE染色結(jié)果顯示：對照組細胞排列有序,細胞核大而圓,位于細胞中央,核仁清晰可見。處理組神經(jīng)細胞發(fā)生了明顯的變化,神經(jīng)細胞排列無規(guī)則,神經(jīng)細胞數(shù)目少,細胞膜與周圍組織分界模糊,神經(jīng)元皺縮。2.應(yīng)用QRT-PCR檢測與小鼠海馬神經(jīng)發(fā)生相關(guān)因子的mRNA表達水平,結(jié)果顯示：與對照組相比,高氟組CREB、BDNF、NCAM和SCF mRNA表達水平顯著降低,VEGF無差異顯著性。western blotting檢測結(jié)果表明：所有處理組CREB蛋白表達的水平與對照組相比均有差異顯著性；BDNF蛋白在所有處理組與對照組相比表達降低,高氟組與對照組比較差異顯著(P0.01)。NCAM蛋白表達水平的多少,隨著氟濃度的增加而降低,且其蛋白表達水平在中和高氟組與對照組相比有差異顯著性。中、高氟組SCF蛋白表達水平雖然低于對照組,但并無統(tǒng)計學(xué)意義。3.透射電子顯微鏡下觀察,與對照組相比,處理組海馬神經(jīng)細胞的細胞核的形狀變得不規(guī)則,核膜的輪廓模糊,雙層結(jié)構(gòu)破壞,核漿中的電子密度增加,染色質(zhì)聚集。海馬突觸間隙變寬,突觸后膜致密物密度變薄,突觸活性區(qū)變短,突觸前后膜結(jié)構(gòu)模糊,突觸小泡明顯減少,突觸內(nèi)線粒體腫脹,線粒體內(nèi)嵴斷裂消失。[結(jié)論]攻毒60日齡后,氟影響了小鼠海馬的組織形態(tài)和超微結(jié)構(gòu),對海馬神經(jīng)產(chǎn)生了毒性作用。這一過程可能是氟通過改變CREB、BDNF和NCAM在基因和蛋白水平的下調(diào),影響突觸的可塑性,從而影響了海馬的神經(jīng)發(fā)生,產(chǎn)生的神經(jīng)毒性作用。
【關(guān)鍵詞】：氟中毒 海馬 小鼠 突觸可塑性
【學(xué)位授予單位】：山西農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R114;S859.82
【目錄】：

• 摘要6-7
• 前言7-9
• 第一章 動物模型的建立及氟對小鼠海馬形態(tài)結(jié)構(gòu)及超微結(jié)構(gòu)的觀察9-15
• 1 材料與方法9-11
• 1.1 試驗材料9-10
• 1.2 試驗方法10-11
• 2 試驗結(jié)果11-13
• 2.1 小鼠海馬組織形態(tài)學(xué)變化11-12
• 2.2 氟暴露對海馬組織超微結(jié)構(gòu)的影響12-13
• 3 分析討論13-14
• 3.1 氟影響了小鼠海馬組織形態(tài)學(xué)結(jié)構(gòu)13-14
• 3.2 氟對小鼠海馬超微結(jié)構(gòu)的影響14
• 4 本章結(jié)論14-15
• 第二章 氟對小鼠海馬神經(jīng)發(fā)生相關(guān)基因表達的影響15-25
• 1 材料與方法15-20
• 1.1 試驗材料15-16
• 1.2 試驗方法16-20
• 2 試驗結(jié)果20-21
• 2.1 海馬組織中總RNA的提取及質(zhì)量鑒定20
• 2.2 60天氟暴露影響了小鼠海馬組織CREB、BDNF、SCF、NCAM、VEGF基因 mRNA的表達量20-21
• 3 分析與討論21-24
• 3.1 氟對環(huán)磷酸腺苷反應(yīng)原件結(jié)合蛋白(CREB)和BDNF的影響21-22
• 3.2 氟對神經(jīng)細胞粘附因子(NCAM)的影響22-23
• 3.3 氟對神經(jīng)干細胞因子(SCF)的影響23-24
• 3.4 氟對血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)的影響24
• 4 小結(jié)24-25
• 第三章 氟對小鼠海馬神經(jīng)發(fā)生相關(guān)蛋白表達的影響25-34
• 1 材料與方法25-29
• 1.1 試驗材料25-26
• 1.2 試驗方法26-29
• 2 試驗結(jié)果29-31
• 2.1 蛋白標(biāo)曲的制備29-30
• 2.2 不同劑量氟對小鼠海馬CREB和BDNF的影響30
• 2.3 不同劑量氟對小鼠海馬NCAM的影響30
• 2.4 不同劑量氟對小鼠海馬SCF的影響30-31
• 3 分析與討論31-33
• 3.1 氟對小鼠海馬組織CREB和BDNF的影響31-32
• 3.2 氟對NCAM和SCF的蛋白表達水平的影響32-33
• 4 結(jié)論33-34
• 全文結(jié)論34-35
• 英文縮略詞表35-36
• 參考文獻36-40
• Abstract40-42
• 致謝42

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前4條

1 劉曉莉;李紅;喬德才;;適量運動對大鼠海馬神經(jīng)元腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子表達的影響[J];沈陽體育學(xué)院學(xué)報;2008年03期

2 章子貴,許曉璐,申秀英,徐曉虹;氟中毒對小鼠學(xué)習(xí)記憶相關(guān)腦區(qū)突觸結(jié)構(gòu)的影響[J];衛(wèi)生研究;1999年04期

3 孫增榮,劉風(fēng)貞,吳麗娜,呂嚴,于德奎;高氟飲水對小鼠腦功能的影響[J];中國地方病學(xué)雜志;2000年04期

4 張t

本文編號：269319