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工頻磁場誘導(dǎo)FL細(xì)胞活性氧產(chǎn)生的機制及其與細(xì)胞膜受體聚簇的相關(guān)性研究

發(fā)布時間:2017-03-26 18:02

  本文關(guān)鍵詞:工頻磁場誘導(dǎo)FL細(xì)胞活性氧產(chǎn)生的機制及其與細(xì)胞膜受體聚簇的相關(guān)性研究,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。


【摘要】:目的:研究工頻磁場誘導(dǎo)FL細(xì)胞活性氧產(chǎn)生的機制及其與表皮生長因子受體(EGFR)聚簇之間的關(guān)系。 方法:以人羊膜FL細(xì)胞為研究對象,將其暴露于0.4mT、50Hz的工頻磁場,采用活性氧試劑盒檢測工頻磁場暴露對細(xì)胞內(nèi)總活性氧水平的影響并確定其閾強度,利用化學(xué)發(fā)光法分析工頻磁場暴露對胞內(nèi)NADPH氧化酶活性的影響,采用線粒體ROS探針和胞漿ROS探針技術(shù)分析工頻磁場暴露對細(xì)胞線粒體和胞漿內(nèi)的ROS水平的影響,利用免疫化學(xué)熒光及激光共聚焦顯微鏡技術(shù)分析NADPH氧化酶在工頻磁場誘導(dǎo)EGFR聚簇中的作用,運用SAS9.1軟件對實驗數(shù)據(jù)進(jìn)行配對t檢驗、方差分析和SNK檢驗并統(tǒng)計分析。 結(jié)果:研究結(jié)果顯示,0.4mT的工頻磁場暴露15min和30min后,FL細(xì)胞內(nèi)的總ROS水平均升高,且差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);而暴露60min后,FL細(xì)胞內(nèi)的總ROS水平與假暴露組無顯著差異(P0.05)。0.2mT的工頻磁場暴露15min也能誘導(dǎo)FL細(xì)胞內(nèi)的總ROS水平明顯升高(P0.05);而0.1mT的工頻磁場暴露15min不能升高細(xì)胞內(nèi)的總ROS水平(P0.05)。0.4mT的工頻磁場暴露15min和30min后,可誘導(dǎo)FL細(xì)胞線粒體內(nèi)ROS顯著升高(15min組1,30min組P0.05),而暴露5min和60min后,線粒體內(nèi)ROS水平與假暴露組均無差異(P0.05);0.4mT的工頻磁場暴露5min、15min和30min后,同樣可誘導(dǎo)FL胞漿內(nèi)的ROS水平升高,且差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05),而暴露60min后,胞漿內(nèi)的ROS水平與假暴露組無差異(P0.05)。0.4mT的工頻磁場暴露5min、15min和30min后,FL細(xì)胞內(nèi)NADPH氧化酶的活性與假暴露組比較均升高(P0.05);而暴露60min后,胞內(nèi)NADPH氧化酶活性與假暴露組無差異(P0.05)。經(jīng)NADPH氧化酶抑制劑DPI (1μM)預(yù)處理15min后,0.4mT工頻磁場暴露組細(xì)胞內(nèi)總活性氧水平和胞漿內(nèi)的活性氧水平均比未經(jīng)DPI處理組低(P0.05),且與假暴露組相比均無差異;而0.4mmT工頻磁場暴露15min和30min誘導(dǎo)的線粒體活性氧產(chǎn)生均不能被DPI (1μM)抑制(P0.05)。0.4mmT工頻磁場暴露15min后,發(fā)生EGFR聚簇細(xì)胞的百分率顯著增加(P0.01);而DPI (1μM)預(yù)處理15min后,可抑制工頻磁場誘導(dǎo)的細(xì)胞膜EGFR聚簇。 結(jié)論: 基于本研究的結(jié)果,可以獲得以下結(jié)論: 1.工頻磁場暴露可誘導(dǎo)FL細(xì)胞產(chǎn)生活性氧,其閾強度在0.1-0.2mT之間; 2.工頻磁場可通過提高NADPH氧化酶的活性增加FL細(xì)胞胞漿內(nèi)活性氧水平,并部分介導(dǎo)FL細(xì)胞膜表面EGF受體聚簇; 3.工頻磁場暴露可誘導(dǎo)FL細(xì)胞線粒體活性氧產(chǎn)生,但與NADPH氧化酶可能不相關(guān)。
【關(guān)鍵詞】:工頻磁場 活性氧(ROS) 線粒體 NADPH氧化酶 EGF受體 聚簇
【學(xué)位授予單位】:浙江大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類號】:R13
【目錄】:
  • 致謝4-6
  • 中文摘要6-8
  • Abstract8-10
  • 縮咯語10-12
  • 目次12-14
  • 1 引言14-17
  • 2 實驗材料17-23
  • 2.1 主要設(shè)備儀器17
  • 2.2 主要耗材17-18
  • 2.3 細(xì)胞及培養(yǎng)液18
  • 2.4 主要試劑18-19
  • 2.5 緩沖液和常用試劑配制19-21
  • 2.6 工頻磁場暴露系統(tǒng)21-22
  • 2.7 分析軟件22-23
  • 3 實驗方法23-34
  • 3.1 工頻磁場暴露對FL細(xì)胞內(nèi)總活性氧產(chǎn)生的影響23-24
  • 3.2 工頻磁場誘導(dǎo)FL細(xì)胞總活性氧產(chǎn)生的強度(劑量)-效應(yīng)關(guān)系24-25
  • 3.3 工頻磁場暴露對FL細(xì)胞線粒體內(nèi)活性氧產(chǎn)生的影響25-26
  • 3.4 工頻磁場暴露對FL細(xì)胞胞漿內(nèi)活性氧產(chǎn)生的影響26-27
  • 3.5 工頻磁場暴露對FL細(xì)胞NADPH氧化酶活性的影響27-28
  • 3.6 NADPH氧化酶與工頻磁場誘導(dǎo)FL細(xì)胞活性氧產(chǎn)生的相關(guān)性研究28-31
  • 3.6.1 NADPH氧化酶對工頻磁場誘導(dǎo)FL細(xì)胞內(nèi)總ROS產(chǎn)生的影響28-29
  • 3.6.2 NADPH氧化酶對工頻磁場誘導(dǎo)FL細(xì)胞線粒體內(nèi)ROS產(chǎn)生的影響29-30
  • 3.6.3 NADPH氧化酶對工頻磁場誘導(dǎo)FL細(xì)胞胞漿內(nèi)ROS產(chǎn)生的影響30-31
  • 3.7 NADPH氧化酶在工頻磁場誘導(dǎo)FL細(xì)胞膜受體聚簇中的作用31-34
  • 4 實驗結(jié)果34-45
  • 4.1 工頻磁場暴露對FL細(xì)胞內(nèi)總活性氧產(chǎn)生的影響34
  • 4.2 工頻磁場誘導(dǎo)FL細(xì)胞總活性氧產(chǎn)生的強度(劑量)-效應(yīng)關(guān)系34-35
  • 4.3 工頻磁場暴露對FL細(xì)胞線粒體內(nèi)活性氧產(chǎn)生的影響35-36
  • 4.4 工頻磁場暴露對FL細(xì)胞胞漿內(nèi)活性氧產(chǎn)生的影響36-37
  • 4.5 工頻磁場暴露對FL細(xì)胞NADPH氧化酶活性的影響37-38
  • 4.6 NADPH氧化酶與工頻磁場誘導(dǎo)FL細(xì)胞活性氧產(chǎn)生的相關(guān)性研究38-41
  • 4.6.1 NADPH氧化酶對工頻磁場誘導(dǎo)FL細(xì)胞內(nèi)總ROS產(chǎn)生的影響39
  • 4.6.2 NADPH氧化酶對工頻磁場誘導(dǎo)FL細(xì)胞線粒體內(nèi)ROS產(chǎn)生的影響39-40
  • 4.6.3 NADPH氧化酶對工頻磁場誘導(dǎo)FL細(xì)胞胞漿內(nèi)ROS產(chǎn)生的影響40-41
  • 4.7 NADPH氧化酶在工頻磁場誘導(dǎo)FL細(xì)胞膜受體聚簇中的作用41-45
  • 5 討論45-48
  • 6 結(jié)論48-49
  • 參考文獻(xiàn)49-54
  • 綜述54-67
  • 參考文獻(xiàn)62-67
  • 作者簡介及科研成果67

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 韓曉燕;高麗萍;劉箐;;NOX家族蛋白的研究進(jìn)展[J];生命科學(xué);2012年06期


  本文關(guān)鍵詞:工頻磁場誘導(dǎo)FL細(xì)胞活性氧產(chǎn)生的機制及其與細(xì)胞膜受體聚簇的相關(guān)性研究,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

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本文編號:269142

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