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紫甘薯酰化花色苷與腸道菌群的相互作用研究

發(fā)布時(shí)間:2020-05-14 16:04
【摘要】:紫甘薯花色苷具有;瘶(gòu)造,且具有多種生理功效;本課題研究花色苷與腸道菌群之間的相互作用,有利于了解食物成分對(duì)腸道菌群與人體的共生關(guān)系的影響,為健康食品的開發(fā)提供依據(jù)。主要研究?jī)?nèi)容如下:首先從健康成年女性糞便中,采用傳統(tǒng)培養(yǎng)方式,分離提取鑒定出大腸桿菌、腸球菌、雙歧桿菌、乳桿菌四種菌屬,通過生長(zhǎng)曲線的繪制找出各自達(dá)到對(duì)數(shù)期的最佳時(shí)間,從而利于菌種活化,進(jìn)行花色苷對(duì)菌種作用的影響研究。并測(cè)定其光密度值與菌落形成單位(colony-forming units,CFU)之間的線性關(guān)系。采用濾紙片法對(duì)紫甘薯花色苷提取物的抑菌活性進(jìn)行試驗(yàn),結(jié)果表明,紫甘薯花色苷對(duì)中性菌腸球菌生長(zhǎng)沒有抑制作用;對(duì)中性菌大腸桿菌生長(zhǎng)具有一定的抑制作用,抑菌作用強(qiáng)度隨著紫甘薯花色苷濃度的增加而增加,在花色苷質(zhì)量濃度為12.8mg/mL時(shí)達(dá)到最大抑菌圈直徑為9.20(±0.26)mm。有益菌體外培養(yǎng)結(jié)果表明,紫甘薯花色昔對(duì)乳桿菌和雙歧桿菌的生長(zhǎng)均有一定的促進(jìn)增殖作用,紫甘薯花色苷的促進(jìn)作用隨著培養(yǎng)基中紫甘薯花色苷的濃度的增加而增加:當(dāng)花色苷濃度分別為10.67mg/mL時(shí),乳桿菌和雙歧桿菌的A值達(dá)到最高,花色苷對(duì)菌種的促進(jìn)增殖作用最明顯。孵化時(shí)間在8-16h時(shí),花色苷促進(jìn)乳桿菌和雙歧桿菌增殖的速率更大些;相比而言,紫甘薯花色苷對(duì)乳桿菌具有較大的促進(jìn)增殖作用。實(shí)驗(yàn)采用高速逆流色譜法制備紫甘薯單體花色苷,研究了腸道菌對(duì)這種雙酰基化的芍藥素-3-咖啡酰-阿魏;碧擒-5-葡糖苷的作用。腸道菌群對(duì)單體花色哲含量降低有著不同程度上的促進(jìn)作用,且腸道菌群對(duì)花色苷降解能力大于四種混合菌的能力。研究了單體菌對(duì)該單體花色苷的作用,四種菌對(duì)花色苷的降解能力:大腸桿菌雙歧桿菌乳桿菌腸球菌。通過HPLC(520nm和280nm)法比較分析,初步研究了大腸桿菌對(duì)單體花色苷的降解機(jī)理。推測(cè)在本研究的時(shí)間范圍內(nèi),大腸桿菌的作用沒有使單體花色苷發(fā)生水解或者裂解等反應(yīng),即沒有被降解成更小的分子。分子中呈現(xiàn)紫外吸收的芳香環(huán)結(jié)構(gòu)并沒有被整體破壞,只是花色苷呈色基團(tuán)發(fā)生了改變,形成了沒有顏色的降解產(chǎn)物。這可能是在中性pH條件下,大腸桿菌的作用促進(jìn)了花色苷由藍(lán)色或紫色的醌型堿轉(zhuǎn)變成部分無色的甲醇假堿形式,隨著時(shí)間延長(zhǎng),變成這種甲醇假堿形式的基團(tuán)逐漸增多,而整個(gè)分子量沒有變化。
【圖文】:

鏡檢,大腸桿菌,菌落,腸道菌群


測(cè)得lg健康成年女性糞便中四種菌的平板活菌數(shù),如表3-1所示。每個(gè)所含腸道菌群構(gòu)成種類、數(shù)量是不同的,因其宿主遺傳、年齡、健康狀態(tài)、生活膳食等[55]因素影響。徐潔[77]研究四川不同年齡志愿者的腸道菌群構(gòu)成,表明處生理年齡時(shí)期的健康人其腸道菌群存在差異。逡逑表3-1四種菌的活菌數(shù)逡逑Table邋3-1邋Four邋bacteria邋of邋viable邋count逡逑菌種邐菌種總數(shù)(CFU/g)逡逑大腸桿菌邐1.26xl010逡逑腸球菌邐8.95xl04逡逑雙歧桿菌邐1.22xl0q逡逑乳桿菌邐2.36x10s逡逑3.2菌種分離鏡檢逡逑(1)大腸桿菌:采用伊紅美藍(lán)鑒別性瓊脂培養(yǎng)基(EMB)培養(yǎng)。如圖3-1革蘭染色呈紅色,為革蘭氏陰性無芽孢桿菌,菌落邊緣整齊,,圓形,濕潤,黑有金屬光澤。周身存在鞭毛,可以運(yùn)動(dòng),無芽孢,形狀橢圓,有長(zhǎng)短不一形狀

菌落,鏡檢,腸球菌,雙歧桿菌


(a)邐(b)逡逑圖3-2腸球菌菌落圖(a)與鏡檢圖(b)逡逑Fig.3-2邋Colony(a)邋and邋microscopic(b)邋examination邋of邋Enterococcus逡逑(3)
【學(xué)位授予單位】:天津科技大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2018
【分類號(hào)】:R151

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