【摘要】：研究背景和目的：雙氫魚藤酮（DHR）是天然殺蟲劑魚藤酮的代謝產(chǎn)物，與魚藤酮一樣廣泛應(yīng)用于農(nóng)業(yè)生產(chǎn)，包括漁業(yè)、園藝和有機(jī)農(nóng)產(chǎn)品等。DHR是一個有效的線粒體抑制劑并可能引起帕金森樣綜合癥，然而DHR對其他系統(tǒng)的作用尚不清楚。因?yàn)闈{細(xì)胞在免疫屏障系統(tǒng)中發(fā)揮重要作用，本課題擬研究DHR對人漿細(xì)胞的毒副作用，為DHR的安全性評價(jià)提供新的證據(jù)。 研究方法：用噻唑藍(lán)（MTT）法檢測DHR是否抑制漿細(xì)胞增殖，流式細(xì)胞技術(shù)檢測DHR對漿細(xì)胞周期、凋亡和線粒體膜電位的影響。免疫印跡檢測DHR對漿細(xì)胞的細(xì)胞周期蛋白、凋亡蛋白、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激相關(guān)蛋白和p38有絲分裂原激活蛋白激酶表達(dá)的調(diào)控。 研究結(jié)果： （1）MTT試驗(yàn)表明了DHR能以濃度依耐性的方式抑制人漿細(xì)胞存活率，免疫印跡顯示DHR下調(diào)參與G1期調(diào)控點(diǎn)的周期調(diào)節(jié)劑cyclin D3、CDK4/6、cyclinE和p-Rb的表達(dá)以及上調(diào)抑癌因子p53的表達(dá)，，且使?jié){細(xì)胞細(xì)胞周期滯止在G0/G1期。 （2）流式細(xì)胞技術(shù)表明DHR能引起漿細(xì)胞的凋亡，且免疫印跡證明caspase-3、8、9以及PARP均被剪切，抗凋亡蛋白Bcl-2和Mcl-1表達(dá)被下調(diào)，促凋亡蛋白Bim表達(dá)被上調(diào)。 （3）利用四甲基羅丹明甲酯（TMRM）染色，經(jīng)流式細(xì)胞技術(shù)表明DHR能降低漿細(xì)胞的線粒體膜電位。 （4）用DHR處理漿細(xì)胞不同濃度或不同時(shí)間，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激和未折疊蛋白反應(yīng)的標(biāo)志蛋白GRP78、 ATF4和CHOP均被上調(diào)。 （5）漿細(xì)胞經(jīng)過不同濃度DHR處理后，有絲分裂原激活蛋白激酶p38磷酸化增加，而JNK磷酸化減少。當(dāng)用p38抑制劑SB203580預(yù)處理漿細(xì)胞，由DHR引起的p38磷酸化水平和凋亡蛋白（caspase-3和PARP）的剪切均會被部分下調(diào)。 研究結(jié)論： DHR能抑制人漿細(xì)胞增殖并使細(xì)胞周期阻滯在G0/G1期，且通過激起內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激和激活p38通路引起人漿細(xì)胞的凋亡。
【圖文】：

一部分 雙氫魚藤酮抑制人漿細(xì)胞增殖并使細(xì)胞周滯止在 G0/G1 期1．雙氫魚藤酮對人漿細(xì)胞的增殖抑制作用用不同濃度 DHR(圖 1A)處理惡性人漿細(xì)胞系（LP1、 KMS11、 H9MI-8226、KMS12 和 MM.1S）72 小時(shí)后，通過 MTT 試驗(yàn)檢測 DHR 對漿的影響。圖 1B 顯示，隨著給藥濃度的增加，細(xì)胞存活率下降，由此可見 效抑制漿細(xì)胞的增殖。

2． 雙氫魚藤酮使人漿細(xì)胞細(xì)胞周期阻滯在 G0/G1 期不同濃度 DHR 處理 LP1 和 KMS11 細(xì)胞 24 小時(shí)后，用 PI 染色接著流式細(xì)胞技術(shù)分析。DHR 引起了 G0/G1 期細(xì)胞的增加（圖 2）。在 LP1 細(xì)胞中，G0/G1 期細(xì)胞從DMSO對照組65%增加到82%（15 μM DHR處理），同時(shí)S期細(xì)胞從23.85減少到 9.80%。在 KMS11 細(xì)胞中，G0/G1 期細(xì)胞從 DMSO 對照組 45.91%增加到56.30%（15 μM DHR 處理）。因此，DHR 使?jié){細(xì)胞細(xì)胞周期阻滯在了 G0/G1 期，并阻止細(xì)胞進(jìn)入 S 期。
【學(xué)位授予單位】：蘇州大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號】：R114

【共引文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 朱啟星;葉良平;馬泰;沈彤;;銀杏葉提取物對三氯乙烯誘導(dǎo)人角質(zhì)形成細(xì)胞線粒體損傷的保護(hù)作用[J];癌變.畸變.突變;2008年05期

2 劉竹珍;楊頡;汪洪毅;崔中光;;沙利度胺聯(lián)合VAD方案化療對多發(fā)性骨髓瘤病人細(xì)胞因子影響[J];青島大學(xué)醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2009年03期

3 袁慧;史成河;;缺氧復(fù)氧對腸上皮細(xì)胞凋亡指數(shù)及線粒體膜電位的影響[J];標(biāo)記免疫分析與臨床;2008年05期

4 徐冶;鐘加滕;李曉寧;于慧美;康勁松;蘇靜;孫連坤;;缺糖缺氧對經(jīng)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激途徑誘導(dǎo)Hela細(xì)胞凋亡的影響[J];吉林大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2011年05期

5 李曉東;陸松敏;史成和;徐華彪;劉建倉;龍?jiān)谠?李萍;;Rg1對失血性休克大鼠腸上皮細(xì)胞保護(hù)作用的實(shí)驗(yàn)研究[J];創(chuàng)傷外科雜志;2006年02期

6 魏明琳;劉慶平;閆曉紅;;膽固醇氧化衍生物在動脈粥樣硬化中的研究進(jìn)展[J];大連大學(xué)學(xué)報(bào);2008年03期

7 許川山;Albert Wing Nang Leung;楊青;;MPPa光動力作用對鼻咽癌細(xì)胞生長抑制的初步研究[J];第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào);2006年14期

8 付玉榮;邱宗蔭;顏玉蓉;;羥基喜樹堿通過線粒體途徑誘導(dǎo)肝癌SMMC-7721細(xì)胞凋亡的觀察[J];第四軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào);2006年15期

9 張慧芳;張煦;范臨蘭;;鬼臼毒衍生物誘導(dǎo)人肺腺癌A549細(xì)胞凋亡[J];第四軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào);2006年16期

10 范臨夏;陶曉南;蔡曦光;劉華;;苦參堿誘導(dǎo)A549細(xì)胞凋亡的機(jī)制研究[J];第四軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào);2007年15期

相關(guān)會議論文 前5條

1 陳勤;胡冠宇;曹炎貴;;A β_(1-40)誘導(dǎo)大鼠腦細(xì)胞線粒體結(jié)構(gòu)與功能異常及遠(yuǎn)志皂苷的保護(hù)作用[A];2011年中國藥學(xué)大會暨第11屆中國藥師周論文集[C];2011年

2 陳薛釵;王睿;叢珍珍;林漢斌;鄧玉林;;Salsolinol合成酶的高效液相色譜-電化學(xué)活性檢測方法的建立及初步分離純化[A];全國生物醫(yī)藥色譜學(xué)術(shù)交流會（2010景德鎮(zhèn)）論文集[C];2010年

3 季宇彬;高世勇;鄒翔;汲晨鋒;;龍葵堿誘導(dǎo)HepG_2細(xì)胞凋亡的線粒體通路研究[A];中國藥學(xué)會應(yīng)用藥理專業(yè)委員會第三屆學(xué)術(shù)會議、中國藥理學(xué)會制藥工業(yè)專業(yè)委員會第十三屆學(xué)術(shù)會議暨2008生物醫(yī)藥學(xué)術(shù)論壇論文匯編[C];2008年

4 張?jiān)蕩X;劉雪梅;婁金麗;王新祥;鄭宏;閆妍;黃啟福;;蒺藜皂苷對缺氧/復(fù)氧誘導(dǎo)大鼠皮層神經(jīng)元凋亡的影響[A];國家中醫(yī)藥管理局腦病重點(diǎn)研究室建設(shè)研討會暨中風(fēng)病科研成果推廣交流會論文匯編[C];2010年

5 戴支凱;黃姣娥;江晉渝;趙海潞;羅勇;;安宮牛黃丸通過誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡和降低線粒體膜電位抑制腫瘤細(xì)胞增殖(英文)[A];第十五屆中國神經(jīng)精神藥理學(xué)學(xué)術(shù)會議論文摘要[C];2012年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 張燕;JWA通過線粒體凋亡通路影響腫瘤細(xì)胞耐藥性[D];南京醫(yī)科大學(xué);2009年

2 潘s

本文編號：2557050