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二硫化碳對(duì)雄性大鼠睪丸生殖細(xì)胞線粒體相關(guān)途徑細(xì)胞凋亡的影響

發(fā)布時(shí)間:2019-10-02 09:40
【摘要】:目的:探討不同濃度CS_2亞慢性染毒對(duì)大鼠睪丸生殖細(xì)胞線粒體途徑細(xì)胞凋亡的影響。 方法:清潔級(jí)健康SD雄性大鼠24只,隨機(jī)分為4組,CS_2染毒濃度分別為0、50、250、1250mg/m~3,靜式吸入染毒,每周5天,每天2小時(shí),共10周。染毒結(jié)束后,斷頭處死動(dòng)物,提取睪丸生殖細(xì)胞中胞漿蛋白,WB法檢測(cè)AIF、Cyto C、Bcl-2、Bax、Procaspase-9/3含量;提取總蛋白,分光光度法檢測(cè)Caspase-9/3酶活性;提取線粒體蛋白, ELISA法檢測(cè)MPTP及線粒體中呼吸酶復(fù)合物I-V的表達(dá)水平;提取總RNA,應(yīng)用qPCR法檢測(cè)AIF、Cyto C、Bcl-2、Bax、Procaspase-9/3等各基因相對(duì)表達(dá)水平。 結(jié)果:與對(duì)照組相比,各染毒組大鼠睪丸生殖細(xì)胞胞漿中Cyto C含量上升(P 0.05);在中濃度組中,Bax/Bcl-2比值、Caspase-9/3酶活性上升,Procaspase-9/3蛋白的表達(dá)水平下降(P 0.05);在高濃度CS_2作用下, Bax和AIF蛋白的相對(duì)表達(dá)水平上升,而B(niǎo)cl-2蛋白表達(dá)水平則下降(P 0.05)。 與對(duì)照組相比,各染毒組大鼠睪丸生殖細(xì)胞中MPTP水平有明顯的下降(P 0.05),線粒體內(nèi)呼吸酶復(fù)合物I-V表達(dá)水平上升(P 0.05)。 與對(duì)照組相比,,各染毒組動(dòng)物睪丸生殖細(xì)胞中Caspase-9及Bax mRNA表達(dá)水平上升(P 0.05),Bax與Bcl-2mRNA表達(dá)水平之比亦升高(P 0.05);在高濃度CS_2作用下,睪丸生殖細(xì)胞中Cyto C、Caspase-3和AIF mRNA相對(duì)表達(dá)水平上升,而B(niǎo)cl-2mRNA表達(dá)水平則有明顯下降(P 0.05)。 結(jié)論:CS_2染毒可影響雄性大鼠睪丸生殖細(xì)胞線粒體途徑的細(xì)胞凋亡過(guò)程。
【圖文】:

生殖細(xì)胞,胞漿,表達(dá)水平,統(tǒng)計(jì)學(xué)意義


華 中 科 技 大 學(xué) 碩 士 學(xué) 位 論 CS2染毒大鼠睪丸生殖細(xì)胞胞漿中Cyto C 相對(duì)表達(dá)水平相比,各染毒組大鼠睪丸生殖細(xì)胞胞漿中 Cyto C 蛋白的相上升,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P < 0.05),見(jiàn)圖 1。且胞漿平隨 CS2染毒濃度的增加有上升的趨勢(shì)(r=0.942,P < 0.

表達(dá)水平,生殖細(xì)胞,蛋白


圖 2 CS2染毒對(duì)大鼠睪丸生殖細(xì)胞中Procaspase-9 和 Procaspase-3 蛋白相對(duì)表達(dá)水平的影響t 檢驗(yàn),與對(duì)照組比較,*P < 0.05。 CS2染毒大鼠睪丸生殖細(xì)胞中 Bcl-2、Bax相對(duì)表達(dá)水平組大鼠睪丸生殖細(xì)胞中 Bcl-2 相對(duì)表達(dá)水平與對(duì)照組相達(dá)水平則有明顯上升,這兩種蛋白相對(duì)表達(dá)水平的變化見(jiàn)圖 3。Bax蛋白相對(duì)表達(dá)水平隨 CS2染毒濃度的增加而cl-2 蛋白相對(duì)表達(dá)水平則隨 CS2染毒濃度的增加而下降度組和高濃度組中, Bax 與 Bcl-2 表達(dá)水平的相對(duì)比值異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P < 0.05)。該比值亦隨 CS2染毒濃< 0.01)。
【學(xué)位授予單位】:華中科技大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2013
【分類號(hào)】:R114

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào):2544865

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