發(fā)布時(shí)間：2019-09-27 17:26

【摘要】：酪氨酸殘基極易被氧化修飾,其氧化產(chǎn)物雙酪氨酸(DT)、3-硝基酪氨酸(3-NT)是體內(nèi)組織氧化損傷的標(biāo)識(shí)。食入酪氨酸氧化產(chǎn)物是否影響體內(nèi)DT、3-NT的積累尚不清楚。本課題用酪氨酸氧化的產(chǎn)物對(duì)大鼠進(jìn)行急性毒性實(shí)驗(yàn)、28天蓄積實(shí)驗(yàn)和長(zhǎng)期飼喂實(shí)驗(yàn),探討酪氨酸氧化產(chǎn)物對(duì)大鼠心肌氧化還原狀態(tài)、血壓變化與心肌膠原代謝的影響,并研究心肌能量代謝、膠原代謝相關(guān)通路。參照Kurahashi的方法制備酪氨酸氧化產(chǎn)物(Tyrosine oxidized products,TOP)。主要研究?jī)?nèi)容如下:1.小鼠急性毒性試驗(yàn):雌雄大鼠各10只,體重110 g-120 g,每只大鼠一次灌胃5000 mg/kg·bw的酪氨酸氧化產(chǎn)物,觀察大鼠的中毒癥狀并記錄死亡數(shù)量。2.28天蓄積性毒性實(shí)驗(yàn):雌雄大鼠各40只,每組8只,分別灌胃(生理鹽水、酪氨酸50 mg/kg·bw、氧化酪氨酸50 mg/kg·bw、250 mg/kg·bw、1250 mg/kg·bw)連續(xù)灌胃28天,每周測(cè)定大鼠體重及采食量的變化,28天后測(cè)定血液生化指標(biāo)以及心肌氧化還原指標(biāo)。3.大鼠飼喂實(shí)驗(yàn):分為正常飼料日糧組(Control)、0.44%酪氨酸組(Tyr)、0.22%氧化酪氨酸組(TOP1)、0.44%氧化酪氨酸組(TOP2)。實(shí)驗(yàn)23周末測(cè)定大鼠尾動(dòng)脈壓;在實(shí)驗(yàn)第6、12、24周末分批測(cè)定心肌氧化還原指標(biāo);24周時(shí)測(cè)定心肌特異酶活、血管活性物質(zhì)、心肌膠原代謝相關(guān)指標(biāo)、游離脂肪酸(FFA)和總?cè)姿嵯佘彰?T-ATPase)的變化情況;并觀察心肌纖維及線粒體超微結(jié)構(gòu);采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)心肌氧化還原相關(guān)基因、p38MAPK通路對(duì)膠原降解、脂代謝的相關(guān)基因表達(dá)。論文主要結(jié)果如下:1.實(shí)驗(yàn)期間大鼠未出現(xiàn)中毒癥狀及死亡情況,受試樣品對(duì)雄性及雌性大鼠的最大有作用劑量均高于5000 mg/kg·bw。依據(jù)急性毒性分級(jí)標(biāo)準(zhǔn),樣品的急性毒性級(jí)別為實(shí)際無毒。2.28天蓄積毒性實(shí)驗(yàn):從每周體重變化可得,雄性大鼠在250 mg/kg與生理鹽水組和酪氨酸組差異顯著(P0.05),雌鼠在1250 mg/kg·bw與生理鹽水組和酪氨酸組相比差異顯著(P0.05);采食量方面,雌鼠第二周時(shí)在250 mg/kg·bw組與生理鹽水組和酪氨酸組相比出現(xiàn)差異(P0.05),而雄鼠第一周在1250 mg/kg·bw出現(xiàn)差異(P0.05);血液生化指標(biāo)中雄鼠谷草轉(zhuǎn)氨酶和谷丙轉(zhuǎn)氨酶均在250 mg/kg·bw組差異顯著(P0.05),尿素氮、肌酸激酶及其同工酶均是在1250 mg/kg·bw組出現(xiàn)差異(P0.05);而雌鼠的血液各項(xiàng)生化指標(biāo)均是在TOP3-1250 mg/kg·bw組出現(xiàn)差異。灌胃酪氨酸1250 mg/kg·bw的大鼠血液及心肌自由基(ROS)、丙二醛(MDA)、雙酪氨酸(DT)、終末蛋白氧化產(chǎn)物(AOPP)含量與生理鹽水組及酪氨酸組相比均顯著升高(P0.05);心肌過氧化氫酶(CAT)、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)顯著降低(P0.05)�？傻霉辔�28天酪氨酸氧化產(chǎn)物導(dǎo)致大鼠出現(xiàn)明顯的臨床毒性癥狀的劑量小于1250 mg/kg·bw,主要靶器官為肝、腎、心。3.飼喂氧化酪氨酸6周起,TOP2組大鼠心肌總抗氧化能力(T-AOC)、CAT、超氧化物歧化酶(SOD)、GSH-Px顯著降低(P0.05);到24周末時(shí),TOP2組大鼠心肌T-AOC、CAT、SOD、GSH-Px、GSH/GSSG均顯著降低(P0.05);呈現(xiàn)周期效應(yīng);6周起,TOP2組大鼠心肌ROS、DT、MDA、PC(羰基)、AOPP顯著升高(P0.05);持續(xù)到24周末并呈現(xiàn)周期效應(yīng);Real-time PCR結(jié)果顯示,飼喂酪氨酸氧化產(chǎn)物24周末的大鼠心肌Nrf2、Trx-1、NF-κB、AP-1表達(dá)均顯著上調(diào)(P0.05)。4.TOP2組大鼠23周末時(shí)舒張壓、收縮壓及平均壓顯著高于正常組和酪氨酸組(P0.05);血流量、血流速顯著降低(P0.05);酪氨酸氧化產(chǎn)物TOP組大鼠與正常組和酪氨酸組相比,血管緊張素II(Ang II)顯著升高(P0.05),一氧化氮(NO)顯著降低(P0.05)。5.飼喂酪氨酸氧化產(chǎn)物24周后,TOP組大鼠血漿肌酸激酶(CK)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)活性及心�、裥湍z原羧基端肽(ⅠCTP)、Ⅲ型前膠原氨基端肽(PⅢNP)含量顯著升高(P0.05),均呈劑量效應(yīng);膠原降解相關(guān)基因及炎性因子TIMP-1、TIMP-2、PDGFB、IL-1、IL-6、TNF-α表達(dá)顯著上調(diào)(P0.05),MMP-2,MMP-9表達(dá)顯著下調(diào)(P0.05);心肌電鏡結(jié)果觀察到,大鼠的心肌纖維斷裂溶解,線粒體腫大,空泡形成等異常出現(xiàn);此外,大鼠心肌總ATP酶活下降,心肌游離脂肪酸FFA生成增多;Real-time PCR結(jié)果顯示,TOP2組大鼠心肌SITR1、PGC1-α、PPAR-α、ERRα表達(dá)顯著下調(diào)(P0.01);同時(shí),TOP組大鼠心肌FFA含量提高,T-ATPase活性降低(P0.05),均呈劑量效應(yīng)。6.心肌組織中Trx-1、TNF-α、PDGFB表達(dá)量分別與心肌組織ROS、DT、MDA、AOPP水平顯著正相關(guān);SIRT1、PPAR-α表達(dá)量分別與心肌組織ROS、DT、MDA以及AOPP水平均呈顯著負(fù)相關(guān)(P0.05)。短期及長(zhǎng)期攝入氧化酪氨酸均會(huì)造成大鼠心肌氧化還原狀態(tài)失衡,心肌氧化產(chǎn)物積累,導(dǎo)致心肌組織的氧化損傷。且隨著時(shí)間和劑量的增加,損傷愈加嚴(yán)重。長(zhǎng)期飼喂氧化酪氨酸日糧會(huì)導(dǎo)致血壓升高、膠原合成及降解異常、心肌能量代謝異常等心衰的趨勢(shì)。
【圖文】：

圖 1-1 體內(nèi)體外產(chǎn)生·OH 的過程Fig.1-1 The process of·OH produced in vivo and in vitro） 是脂質(zhì)過氧化作用的次級(jí)產(chǎn)物，其含量常被用來的程度。而脂質(zhì)過氧化產(chǎn)物如 MDA，可與游離氨生交聯(lián)，導(dǎo)致蛋白質(zhì)的氧化，同時(shí)能夠激發(fā)自由基

圖 1-2 MDA 介導(dǎo)蛋白質(zhì)生成羰基-2 Formation of protein carbonyls by reaction with MDA酸及蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)的影響酸殘基，引起蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)的改變，，造成肽鍵斷飾
【學(xué)位授予單位】：江南大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R151

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 李敬來;大鼠異位心臟移植模型的建立及其現(xiàn)狀[J];上海實(shí)驗(yàn)動(dòng)物科學(xué);2001年03期

2 任志強(qiáng),劉運(yùn)良,劉麗君,王訓(xùn)凡,郭正科;三黃腎康丸治療大鼠慢性腎衰的實(shí)驗(yàn)研究[J];中國(guó)藥房;2001年01期

3 陳杰,王進(jìn)海,龔均,汪濤,程鵬;藥物干預(yù)治療大鼠混合反流性食管炎的實(shí)驗(yàn)研究[J];基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與臨床;2003年S1期

4 田新紅,李偉,李成文,李增富;長(zhǎng)期應(yīng)用卡馬西平對(duì)大鼠小腦結(jié)構(gòu)與功能影響的實(shí)驗(yàn)研究[J];陜西醫(yī)學(xué)雜志;2004年08期

5 馬駿,朱書秀,王彥春,甘水詠;電針對(duì)帕金森病模型大鼠黑質(zhì)多巴胺能神經(jīng)元凋亡的影響[J];上海針灸雜志;2005年10期

6 王冰;王宗仁;江山;潘惠娟;;活血化瘀類中藥制劑對(duì)海馬缺血損傷大鼠學(xué)習(xí)記憶的影響[J];中國(guó)臨床康復(fù);2005年48期

7 徐勤;沈逸萍;許安麗;羅振亮;;SD大鼠及beagle犬腎上腺組織形態(tài)計(jì)量分析[J];中國(guó)比較醫(yī)學(xué)雜志;2006年07期

8 栗志遠(yuǎn);陸國(guó)才;袁伯俊;姜華;戴益民;佘佳紅;黃矛;;西那沙星對(duì)幼齡大鼠的軟骨毒性[J];中國(guó)新藥雜志;2006年04期

9 商常發(fā);趙芝剛;顧有方;陳會(huì)良;李衛(wèi)民;董策龍;;大棗多糖對(duì)大鼠血清鈣和葡萄糖水平的影響[J];中國(guó)中醫(yī)藥科技;2007年02期

10 王毅;林偉;施舉紅;;野百合堿處理大鼠的血清對(duì)大鼠肺動(dòng)脈壓的影響[J];中國(guó)臨床醫(yī)學(xué);2008年02期

相關(guān)會(huì)議論文 前10條

1 陳柏年;高梅;時(shí)麗麗;張恒艾;杜冠華;;匹諾塞林對(duì)大鼠全腦缺血再灌注損傷的保護(hù)作用[A];中國(guó)藥理學(xué)會(huì)第十次全國(guó)學(xué)術(shù)會(huì)議�？痆C];2009年

2 朱萱萱;王廣基;劉建平;王淑云;徐軒;;口腔膜治療實(shí)驗(yàn)性大鼠口腔膜潰瘍的研究[A];中國(guó)制藥工業(yè)藥理學(xué)會(huì)20周年學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2002年

3 戴文鑫;吳智勇;;慢性阻塞性肺疾病大鼠模型血清胰島素樣生長(zhǎng)因子-Ⅰ的變化[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第八次全國(guó)老年醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2007年

4 鄺素娟;鄧春玉;張光燕;饒芳;單志新;林秋雄;楊敏;余細(xì)勇;錢衛(wèi)民;吳書林;;大蒜素對(duì)大鼠微血管張力的影響[A];第十三次全國(guó)心血管病學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2011年

5 王勁;柳啟沛;黃宗枝;;幾種不同鈣化合物對(duì)大鼠鋁、鉛代謝的影響(摘錄)[A];營(yíng)養(yǎng)健康新觀察（第三十八期）：營(yíng)養(yǎng)因素與骨髓健康[C];2009年

6 胡翔;王靜;;雌性大鼠去勢(shì)造模中設(shè)立假手術(shù)對(duì)照的必要性探討[A];全國(guó)第八次中醫(yī)婦科學(xué)術(shù)研討會(huì)論文匯編[C];2008年

7 齊偉;曾薇;龐琦;郭艷紅;牟嬌;馮兵;劉理;葉自林;袁發(fā)煥;;蛋白酶體抑制劑對(duì)大鼠糖尿病腎病的治療作用[A];第十一屆全國(guó)中西醫(yī)結(jié)合腎臟病學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2010年

8 梁銳;王軍波;;核苷酸喂養(yǎng)大鼠的安全性評(píng)價(jià)[A];北京市營(yíng)養(yǎng)學(xué)會(huì)第四屆會(huì)員代表大會(huì)暨膳食與健康研討會(huì)論文集[C];2010年

9 林小琪;;SD大鼠灌胃百可利30天反復(fù)給藥毒性試驗(yàn)[A];中國(guó)毒理學(xué)會(huì)第三屆中青年學(xué)者科技論壇暨2011年全國(guó)前列腺藥理毒理學(xué)研討會(huì)論文集[C];2011年

10 王曦;牛欣;羅致誠(chéng);;增齡與雄性大鼠氮氧化物及血清性激素水平變化的關(guān)系[A];全國(guó)中醫(yī)藥科研與教學(xué)改革研討會(huì)論文集[C];2002年

相關(guān)重要報(bào)紙文章 前10條

1 記者 馮衛(wèi)東;大鼠研究顯示孕期壓力或可代代相傳[N];科技日?qǐng)?bào);2014年

2 奇 云;解讀大鼠基因有助人類攻克疑難病癥[N];大眾科技報(bào);2004年

3 張?zhí)煨?克隆大鼠意義重大[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2003年

4 本報(bào)特約撰稿人 陸志城;用大鼠還是用小鼠？[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報(bào);2004年

5 記者 藍(lán)建中;日本研究:骨髓移植使大鼠血管“返老還童”[N];新華每日電訊;2010年

6 記者 姜澎;聰明大鼠 解密大腦記憶功能[N];文匯報(bào);2009年

7 萬姍姍　記者 王春;轉(zhuǎn)基因“聰明大鼠”學(xué)得快記得牢[N];科技日?qǐng)?bào);2009年

8 記者 曹繼軍 顏維琦 通訊員 孫國(guó)根;大鼠基因功能圖譜被成功繪制[N];光明日?qǐng)?bào);2014年

9 記者 白毅 通訊員 孫國(guó)根;大鼠基因功能圖譜繪制成功[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2014年

10 記者 孫國(guó)根;將大鼠基因的功能“對(duì)號(hào)入座”[N];健康報(bào);2014年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前10條

1 付德明;氯沙坦對(duì)慢性心力衰竭大鼠β_1腎上腺素能受體信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路與心功能的調(diào)節(jié)及其機(jī)制研究[D];山西醫(yī)科大學(xué);2009年

2 楊少兵;N-甲基-D-天冬氨酸受體2B亞基鎮(zhèn)痛疫苗應(yīng)用于大鼠的安全性評(píng)價(jià)[D];華中科技大學(xué);2009年

3 蓋建芳;低出生體重對(duì)大鼠腎臟和血壓的影響及機(jī)制研究[D];中南大學(xué);2009年

4 史敏;慢性間歇性低壓低氧抗大鼠膠原誘導(dǎo)性關(guān)節(jié)炎作用及其免疫學(xué)機(jī)制[D];河北醫(yī)科大學(xué);2011年

5 安平;柴夏煎對(duì)甲亢大鼠的影響及作用機(jī)理研究[D];黑龍江中醫(yī)藥大學(xué);2005年

6 周宜;從大鼠性周期的分子變化探討柴胡止血液的作用[D];成都中醫(yī)藥大學(xué);2005年

7 張慶紅;白細(xì)胞介素2和雌激素受體在大鼠垂體前葉的相互關(guān)系研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2000年

8 張海峰;骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞移植對(duì)大鼠急性肝功能衰竭治療作用的實(shí)驗(yàn)研究[D];山東大學(xué);2007年

9 常薪霞;鹽酸小檗堿對(duì)高脂飲食誘導(dǎo)的SD大鼠非酒精性脂肪肝的療效及機(jī)制研究[D];復(fù)旦大學(xué);2010年

10 頊紅雨;早期應(yīng)激對(duì)海馬學(xué)習(xí)、記憶功能的作用和機(jī)制研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2012年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 李寧;鉛、鎘、鉻、汞對(duì)大鼠聽力的損傷及銅、錳、鋅、硒的保護(hù)作用研究[D];山東大學(xué);2008年

2 王瑩;慢性腎衰竭大鼠全段甲狀旁腺激素與心肌肌鈣蛋白的相關(guān)性分析[D];山西醫(yī)科大學(xué);2008年

3 鄧旭輝;養(yǎng)精種子湯對(duì)缺氧雄性大鼠生殖機(jī)能的影響[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2008年

4 夏長(zhǎng)青;活血降脂靈對(duì)早期動(dòng)脈粥樣硬化大鼠的抗氧化應(yīng)激作用研究[D];河北醫(yī)科大學(xué);2009年

5 王海燕;運(yùn)動(dòng)對(duì)SD大鼠與GK大鼠骨骼肌中COUP-TF Ⅰ與COUP-TFⅡ基因表達(dá)的影響[D];華東師范大學(xué);2010年

6 吉星;知母提取物的成分分析及對(duì)T2DM大鼠干預(yù)代謝組學(xué)初探[D];廣東藥學(xué)院;2010年

7 曾志;促紅細(xì)胞生成素對(duì)新生大鼠缺氧缺血性腦損傷神經(jīng)保護(hù)作用的研究[D];暨南大學(xué);2011年

8 汪春彥;金蕎麥對(duì)克雷伯桿菌肺炎大鼠的保護(hù)作用及其機(jī)制[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2011年

9 王媛媛;胡蘆巴總皂苷對(duì)大鼠脂肪肝的預(yù)防作用[D];新疆醫(yī)科大學(xué);2005年

10 徐莉;康復(fù)訓(xùn)練對(duì)腦梗死大鼠大腦可塑性機(jī)制的研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2002年

本文編號(hào)：2542828