【摘要】：鉛（Pb）自然界中廣泛存在，鉛及其多數(shù)化合物是一種不可降解的環(huán)境污染物。鉛對(duì)生物體具有多方面的毒性，可以對(duì)人體多個(gè)器官，系統(tǒng)造成損害。心血管疾病是目前嚴(yán)重危害我國(guó)人民健康和生命的一大疾病，大量研究證明，高血壓是這種疾病最重要的危險(xiǎn)因素之一。近年來(lái)，研究發(fā)現(xiàn)鉛可以顯著升高動(dòng)物血壓，流行病學(xué)調(diào)查也證明鉛與高血壓和動(dòng)脈硬化具有顯著的相關(guān)性。鉛對(duì)高血壓和動(dòng)脈硬化中作用性機(jī)制研究甚少。 增殖細(xì)胞核抗原（Proliferating Cell NuclearAntigen簡(jiǎn)稱PCNA）是一種與細(xì)胞DNA合成關(guān)系密切蛋白質(zhì)，可以作為評(píng)價(jià)細(xì)胞增殖狀態(tài)的一個(gè)良好指標(biāo)。B細(xì)胞淋巴瘤/白血病-2（B cell lymphoma/lewkmia-2簡(jiǎn)稱Bcl-2）是一種原癌基因，它具有抑制細(xì)胞凋亡的作用。Bax可以促進(jìn)細(xì)胞凋亡，一般而言，Bcl-2和Bax是一對(duì)正負(fù)凋亡調(diào)節(jié)蛋白。Bcl-2/Bax比值越低，細(xì)胞越容易發(fā)生凋亡，否則反之。 目的：本實(shí)驗(yàn)是以SD大鼠低水平鉛暴露為模型，觀察暴露于鉛40天后，SD大鼠血管組織增殖、凋亡的情況，觀察鉛暴露對(duì)血管危害，探討鉛對(duì)血管損傷分子生物學(xué)機(jī)制。 方法： 1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 選取健康，3-4周齡，體重在99-114g的SD大鼠24只。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物由河北醫(yī)科大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心提供。 2實(shí)驗(yàn)試劑 乙酸鉛終濃度為1％。 3實(shí)驗(yàn)分組 將SD大鼠按隨機(jī)數(shù)字法分為正常組和實(shí)驗(yàn)組，對(duì)照組12只，實(shí)驗(yàn)組12只。實(shí)驗(yàn)組飲用含1％乙酸鉛水，對(duì)照組只飲用自來(lái)水，40天后處死。 4用HE染色法觀察SD大鼠血管組織學(xué)變化。 5用Western blot印記法檢測(cè)SD大鼠血管中增殖蛋白PCNA、凋亡蛋白Bcl-2和Bax，結(jié)果使用計(jì)算機(jī)半定量技術(shù)進(jìn)行分析。 6用免疫組織化學(xué)法檢測(cè)SD大鼠血管中增殖蛋白PCNA、凋亡蛋白Bcl-2和Bax，結(jié)果使用計(jì)算機(jī)免疫組化圖像分析技術(shù)進(jìn)行分析。 結(jié)果： 1大鼠血管組織學(xué)變化 實(shí)驗(yàn)組大鼠血管管腔擴(kuò)張，管壁皺褶減少，胞核皺縮，彈性膜皺褶較對(duì)照組拉直。 2大鼠血管中增殖蛋白PCNA表達(dá)的影響 Western blot結(jié)果顯示，1%乙酸鉛喂養(yǎng)40天后SD大鼠血管中的PCNA蛋白表達(dá)量與正常對(duì)照組比較有顯著差異，其表達(dá)量明顯減少。計(jì)算機(jī)Western blot圖像半定量分析，結(jié)果可見(jiàn)：染鉛組大鼠PCNA蛋白的平均灰度值顯著低于正常對(duì)照組（P0.05）。說(shuō)明染鉛可以降低大鼠血管組織中PCNA蛋白的表達(dá)量。免疫組化結(jié)果顯示，PCNA蛋白免疫組化反應(yīng)物呈棕黃色，主要表達(dá)于SD大鼠血管平滑肌細(xì)胞的胞核中，實(shí)驗(yàn)組的棕黃色顆粒明顯多于相應(yīng)的正常對(duì)照組。 計(jì)算機(jī)免疫組化圖像分析表明，平均光密度（mean density）的比較中，染鉛組樣本的平均光密度值均低于對(duì)照組，其差別有顯著性差異（P0.05）。說(shuō)明染鉛可以降低PCNA在大鼠血管組織中表達(dá)強(qiáng)度。 3鉛對(duì)SD大鼠血管中凋亡蛋白Bcl-2表達(dá)的影響 Western blot結(jié)果顯示，1%乙酸鉛喂養(yǎng)40天后SD大鼠血管中的Bcl-2蛋白表達(dá)量與正常對(duì)照組比較有顯著差異，其表達(dá)量明顯減少。計(jì)算機(jī)Western blot圖像半定量分析，結(jié)果可見(jiàn)：實(shí)驗(yàn)組大鼠Bcl-2蛋白的平均灰度值顯著低于正常對(duì)照組（P0.05）。說(shuō)明染鉛可以降低大鼠血管組織中Bcl-2蛋白的表達(dá)量。 免疫組化結(jié)果顯示，，Bcl-2凋亡蛋白免疫組化反應(yīng)物呈棕黃色，主要表達(dá)于SD大鼠血管平滑肌細(xì)胞的胞漿中，實(shí)驗(yàn)組的棕黃色顆粒明顯多于相應(yīng)的正常對(duì)照組。 計(jì)算機(jī)免疫組化圖像分析表明，平均光密度值（Mean density）的比較中，實(shí)驗(yàn)組樣本的平均光密度值均低于對(duì)照組，其差別有顯著性差異（P0.05）。說(shuō)明染鉛可以降低Bcl-2在大鼠血管組織中表達(dá)強(qiáng)度。 4鉛對(duì)SD大鼠血管中凋亡蛋白Bax表達(dá)的影響 Western blot結(jié)果顯示，1%乙酸鉛喂養(yǎng)40天后SD大鼠血管中的Bax蛋白表達(dá)量與正常對(duì)照組比較有顯著差異，其表達(dá)量明顯增加。 計(jì)算機(jī)Western blot圖像半定量分析，結(jié)果可見(jiàn)：實(shí)驗(yàn)組大鼠Bax蛋白的平均灰度值顯著高于正常對(duì)照組（P0.05）。說(shuō)明染鉛可以促進(jìn)大鼠血管組織中Bax蛋白的表達(dá)。 免疫組化結(jié)果顯示，Bax凋亡蛋白免疫組化反應(yīng)物呈棕黃色，主要表達(dá)于SD大鼠血管平滑肌細(xì)胞的胞漿中，實(shí)驗(yàn)組的棕黃色顆粒明顯多于相應(yīng)的正常對(duì)照組。 計(jì)算機(jī)免疫組化圖像分析表明，平均光密度值（Mean density）的比較中，實(shí)驗(yàn)組樣本的平均光密度值均高于對(duì)照組，其差別有顯著性差異（P0.05）。說(shuō)明鉛可以促進(jìn)Bax在大鼠血管組織中表達(dá)強(qiáng)度。 結(jié)論： 1短期鉛暴露可使大鼠血管管腔擴(kuò)張，管壁皺褶減少，胞核皺縮，彈性膜皺褶較對(duì)照組拉直。 2短期鉛暴露可以是PCNA蛋白表達(dá)減少，Bcl-2蛋白表達(dá)減低，Bax蛋白表達(dá)增高，Bcl-2/Bax比值降低，促進(jìn)血管細(xì)胞凋亡。 3實(shí)驗(yàn)組大鼠鉛暴露后，大鼠血管管腔擴(kuò)張，彈性減弱，血管細(xì)胞異常凋亡可能是其中原因之一。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：河北醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2012
【分類號(hào)】：R114

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 華燁;丁海霞;肖杭;沈麗華;董海蓉;王軍;盧海燕;丁新生;葉民;;粒細(xì)胞-巨噬細(xì)胞集落刺激因子對(duì)體外培養(yǎng)的大鼠海馬神經(jīng)元氧糖剝奪后凋亡的影響[J];臨床神經(jīng)病學(xué)雜志;2010年03期

2 張宏考;方明;馬英;;黃連素預(yù)處理對(duì)大鼠心肌細(xì)胞凋亡蛋白表達(dá)的影響[J];中國(guó)中醫(yī)急癥;2009年09期

3 孫忠東,池一凡,夏家紅,楊鐵南,侯文明,楊辰垣;金屬硫蛋白對(duì)供心細(xì)胞凋亡的影響[J];中國(guó)胸心血管外科臨床雜志;2004年04期

4 陳浩,鄧丹琪,周曉鴻,樊應(yīng)俊;慢性光化性皮炎凋亡蛋白表達(dá)的檢測(cè)[J];臨床皮膚科雜志;2005年08期

5 張喜英;姚三巧;;凋亡蛋白及其配體系統(tǒng)介導(dǎo)的細(xì)胞凋亡與塵肺的關(guān)系[J];中國(guó)職業(yè)醫(yī)學(xué);2007年03期

6 彭也;張曉紅;;NF-кB信號(hào)調(diào)節(jié)與多發(fā)性骨髓瘤治療新藥作用機(jī)制的關(guān)系[J];國(guó)際輸血及血液學(xué)雜志;2006年03期

7 雷俊華;洪濤;;凋亡蛋白Livin與胃癌[J];中國(guó)熱帶醫(yī)學(xué);2011年04期

8 黃望香,高清平,李秀珍,陳倫華,陳友華,敖緒斌,仲照東;特發(fā)性血小板減少性紫癜患者淋巴細(xì)胞和血小板凋亡蛋白表達(dá)的意義[J];中華微生物學(xué)和免疫學(xué)雜志;2000年06期

9 孫忠東,宋玉娥,池一凡,楊鐵南;腎缺血預(yù)處理對(duì)未成熟心肌凋亡蛋白表達(dá)的影響[J];心臟雜志;2004年06期

10 張可杰,張明智,王慶端;夏枯草注射液誘導(dǎo)K562細(xì)胞凋亡的實(shí)驗(yàn)研究[J];中草藥;2005年07期

相關(guān)會(huì)議論文 前10條

1 吳艷;陳淼;王洪敏;吳雙;錢明江;王宇輝;傅小云;;HO-1對(duì)原代培養(yǎng)大鼠AEC-Ⅱ細(xì)胞凋亡及Bcl-2、p53的影響[A];《中華急診醫(yī)學(xué)雜志》更名十周年、World Journal of Emergency Medicine創(chuàng)刊一周年慶典《中華急診醫(yī)學(xué)雜志》第十屆組稿會(huì)、第三屆急診醫(yī)學(xué)青年論壇論文匯編[C];2011年

2 程井軍;吳其愷;彭銳;孫國(guó)杰;;電針對(duì)非酒精性脂肪性肝炎大鼠肝組織氧化及抗氧化狀態(tài)的影響[A];中華中醫(yī)藥學(xué)會(huì)第十三屆內(nèi)科肝膽病學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2008年

3 楊s

本文編號(hào)：2460593