【摘要】：本文通過(guò)建立高脂膳食誘導(dǎo)氧化應(yīng)激的小鼠模型，并向膳食中分別添加1%、2%的豬骨膠原肽和0.1%已知抗氧化劑硫辛酸作為對(duì)照，研究豬骨膠原肽對(duì)小鼠機(jī)體抗氧化能力、骨骼強(qiáng)度及皮膚和骨骼中膠原代謝相關(guān)指標(biāo)的影響。 材料與方法：75只雄性昆明種小鼠隨機(jī)分為5組（n=15），分別飼喂正常飼料、高脂飼料、高脂飼料+0.1%硫辛酸、1%和2%骨膠原肽，飼喂16周后眼球取血并處死。分別取皮膚、肝臟、十二指腸制成勻漿液，用于測(cè)定機(jī)體的抗氧化指標(biāo)；取右側(cè)股骨和第五腰椎，通過(guò)質(zhì)構(gòu)儀進(jìn)行生物力學(xué)特性分析，并測(cè)定骨鈣含量；取部分皮膚和胸椎軟骨，用于測(cè)定羥脯氨酸含量；再取部分皮膚和左側(cè)股骨頭，置于Trizol中保存，用于RNA的提取和膠原代謝相關(guān)基因的擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)。 結(jié)果：1.高、低劑量的骨膠原肽均能顯著改善高脂膳食引起的小鼠氧化還原狀態(tài)失衡，顯著降低高脂引起體重、自由基水平和脂質(zhì)過(guò)氧化物含量的升高，提高抗氧化酶活力，增強(qiáng)機(jī)體的總抗氧化能力。其中，，高劑量的骨膠原肽和0.1%硫辛酸的抗氧化效果相當(dāng)。 2.骨膠原肽對(duì)高脂膳食所引起的骨骼尺寸增大及股骨和腰椎最大荷載能力的減弱有明顯的改善作用，對(duì)骨鈣含量的下降也有一定程度的恢復(fù)作用。 3.高脂膳食會(huì)顯著減少皮膚和軟骨中的羥脯氨酸含量，而骨膠原肽能使之明顯恢復(fù)，甚至高于正常水平，效果也好于硫辛酸。半定量PCR的結(jié)果表明了骨膠原肽影響膠原代謝的主要途徑：既能通過(guò)上調(diào)脯氨酸羥化酶的表達(dá)影響膠原的合成，又能通過(guò)下調(diào)基質(zhì)金屬蛋白酶的表達(dá)，提高基質(zhì)金屬蛋白酶與其抑制劑相對(duì)表達(dá)量的比值，影響膠原的降解。 結(jié)論：骨膠原肽能顯著改善高脂膳食誘導(dǎo)的氧化應(yīng)激，提高機(jī)體抗氧化能力，調(diào)節(jié)膠原合成和降解途徑中相關(guān)基因的表達(dá)，在一定程度上維持皮膚與骨骼中膠原蛋白水平，增強(qiáng)骨骼強(qiáng)度和礦物質(zhì)的沉積。
[Abstract]:The model of oxidative stress induced by high fat diet in mice was established, and 1% pig bone collagen peptide and 0.1% known antioxidant lipoic acid were added to diet as control. Objective: to study the effects of porcine bone collagen peptide on antioxidation, bone strength and collagen metabolism in skin and bone of mice. Materials and methods: 75 male Kunming mice were randomly divided into 5 groups: normal diet, high fat diet, 0.1% lipoic acid, 1% and 2% collagen peptide. The skin, liver and duodenum were taken into homogenate to determine the antioxidant index of the body, the right femur and the fifth lumbar vertebra were taken to analyze the biomechanical properties and the bone calcium content was measured. Part of the skin and thoracic cartilage were taken to determine the content of hydroxyproline, and part of the skin and left femoral head were preserved in Trizol for the extraction of RNA and amplification of genes related to collagen metabolism. Results: 1. High and low doses of collagen peptide could significantly improve the redox state imbalance induced by high fat diet in mice, decrease the increase of body weight, free radical level and lipid peroxide content, and increase the activity of antioxidant enzymes. Enhance the total antioxidant capacity of the body. The antioxidant effects of high dose collagen peptide and 0.1% lipoic acid were similar. 2. Collagen peptides could significantly improve the bone size and the maximal load capacity of femur and lumbar vertebrae induced by high fat diet, and also could recover the decrease of bone calcium content to some extent. 3. High fat diet can significantly reduce the content of hydroxyproline in skin and cartilage, while collagen peptide can significantly restore it, even higher than the normal level, the effect is better than lipoic acid. The results of semi-quantitative PCR showed that collagen peptide affected collagen metabolism mainly by up-regulating the expression of proline hydroxylase and down-regulating the expression of matrix metalloproteinases. The ratio of matrix metalloproteinase to its inhibitor was increased and the degradation of collagen was affected. Conclusion: collagen peptide can significantly improve oxidative stress induced by high fat diet, increase antioxidant capacity, regulate the expression of related genes in collagen synthesis and degradation pathway, and maintain collagen level in skin and bone to a certain extent. Enhance bone strength and mineral deposition.
【學(xué)位授予單位】：江南大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2012
【分類(lèi)號(hào)】：R151

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本文編號(hào)：2390064