【摘要】：一氧化氮自由基（NO）和超氧陰離子（O_2~-）快速結(jié)合會(huì)生成一種具有強(qiáng)氧化、硝化能力的細(xì)胞毒性物質(zhì)——過(guò)氧亞硝酸根（ONOO~-），ONOO-能引起多種生物大分子損傷，可硝化蛋白質(zhì)酪氨酸殘基、誘導(dǎo)DNA鏈斷裂以及促進(jìn)脂質(zhì)過(guò)氧化反應(yīng)，導(dǎo)致細(xì)胞凋亡等，，進(jìn)而引發(fā)一系列重大疾病的產(chǎn)生。然而體內(nèi)環(huán)境中含有大量的重碳酸鹽（25mM左右），與二氧化碳處于動(dòng)態(tài)平衡，二氧化碳與過(guò)氧亞硝酸根反應(yīng)從而影響過(guò)氧亞硝酸根的毒理學(xué)性質(zhì)。本文應(yīng)用紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)、流動(dòng)注射分析儀和高效液相色譜等分析儀器，結(jié)合體內(nèi)微環(huán)境，研究了過(guò)氧亞硝酸根在二氧化碳仿生環(huán)境中的自分解、損傷生物分子及其清除等毒理性質(zhì)，主要內(nèi)容包括以下3個(gè)方面： 1、過(guò)氧亞硝酸根的自分解以及二氧化碳對(duì)其分解的動(dòng)力學(xué)分析 過(guò)氧亞硝酸根的自分解屬于一級(jí)反應(yīng)。當(dāng)溫度為37℃、鹽離子濃度為0.1M時(shí)，過(guò)氧亞硝酸根在pH為7.4時(shí)的降解速率k=1.0s~(-1)。采用擬一級(jí)反應(yīng)動(dòng)力學(xué)方法，研究了過(guò)氧亞硝酸根與二氧化碳反應(yīng)的動(dòng)力學(xué)。在中性條件、鹽離子濃度為0.1M、溫度37℃下，過(guò)氧亞硝酸根與二氧化碳反應(yīng)的速率常數(shù)k=2.3×10~3M~(-1)s~(-1)。 2、二氧化碳對(duì)過(guò)氧亞硝酸損傷酪氨酸和色氨酸影響的研究 反應(yīng)體系中二氧化碳的存在可抑制過(guò)氧亞硝酸根對(duì)色氨酸和酪氨酸的損傷。通過(guò)高效液相色譜分析，當(dāng)反應(yīng)體系中含有碳酸氫鹽時(shí)，過(guò)氧亞硝酸根損傷氨基酸的產(chǎn)物濃度低于反應(yīng)體系中無(wú)二氧化碳存在時(shí)的產(chǎn)物濃度，說(shuō)明二氧化碳能夠減少過(guò)氧亞硝酸根的生物毒性。推測(cè)認(rèn)為當(dāng)體系中含有碳酸氫鹽時(shí)，過(guò)氧亞硝酸根首先與碳酸氫鹽釋放的二氧化碳發(fā)生反應(yīng)，生成加合物ONO_2CO_2~-，該物質(zhì)會(huì)進(jìn)一步裂解產(chǎn)生硝基自由基和碳酸氫根自由基，對(duì)氨基酸產(chǎn)生硝化和氧化作用。 3、二氧化碳對(duì)卟啉催化過(guò)氧亞硝酸根的動(dòng)力學(xué)分析 利用流動(dòng)注射分析儀研究了二氧化碳對(duì)鐵卟啉催化過(guò)氧亞硝酸根分解的動(dòng)力學(xué)影響，結(jié)果證明，體系中的二氧化碳可加快鐵卟啉催化過(guò)氧亞硝酸根分解的速率，在生理?xiàng)l件下，體系中有無(wú)二氧化碳時(shí)，卟啉催化過(guò)氧亞硝酸根分解的催化速率常數(shù)分別為1.26×10~6M~(-1)s~(-1)和1.17×10~6M~(-1)s~(-1)。 該研究考慮了重碳酸鹽在人體內(nèi)環(huán)境中大量存在這一事實(shí)，模擬體內(nèi)微環(huán)境，能夠更準(zhǔn)確的反應(yīng)過(guò)氧亞硝酸根在人體中的毒理性質(zhì)，對(duì)過(guò)氧亞硝酸根引起的相關(guān)疾病具有預(yù)防和治療的作用，對(duì)保護(hù)人體健康具有積極意義。
[Abstract]:The rapid combination of nitric oxide free radical (NO) and superoxide anion produces a cytotoxic substance with strong oxidation and nitrification, peroxynitrite (ONOO~-). ONOO- can cause damage to many biological macromolecules. Nitrifying protein tyrosine residues induce DNA strand breakage and promote lipid peroxidation, leading to apoptosis and leading to a series of major diseases. However, there is a large amount of bicarbonates (about 25mM) in the body, which is in dynamic equilibrium with carbon dioxide. The reaction of carbon dioxide with peroxynitrite affects the toxicological properties of peroxynitrite. In this paper, the self-decomposition of peroxynitrite in the bionic environment of carbon dioxide was studied by means of UV-Vis spectrophotometer, flow injection analyzer and high performance liquid chromatography. The toxicological properties of damaged biomolecules and their clearance include the following three aspects: 1. Self-decomposition of peroxynitrite and kinetic analysis of its decomposition by carbon dioxide the self-decomposition of peroxynitrite is a first-order reaction. When the temperature is 37 鈩

本文編號(hào)：2377555