【摘要】：研究不同濃度Mg-6Zn合金浸提液對(duì)大鼠腸上皮細(xì)胞IEC-6的凋亡及凋亡相關(guān)基因Caspase-3表達(dá)的影響。將Mg-6Zn合金制成不同濃度(20%和40%)的浸提液體外培養(yǎng)大鼠腸上皮細(xì)胞IEC-6,并以含10%胎牛血清的高糖DMEM(Dulbecco′s modified Eagle′s medium)培養(yǎng)基作為陰性對(duì)照。采用噻唑藍(lán)(MTT)法通過(guò)計(jì)算細(xì)胞相對(duì)增殖率檢測(cè)不同濃度合金浸提液對(duì)IEC-6細(xì)胞的毒性作用;采用流式細(xì)胞儀檢測(cè)不同濃度合金浸提液對(duì)IEC-6細(xì)胞凋亡的影響;采用逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)法檢測(cè)不同濃度合金浸提液對(duì)IEC-6細(xì)胞凋亡相關(guān)基因Caspase-3mRNA表達(dá)的影響。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,20%和40%兩種濃度的鎂合金浸提液在體外培養(yǎng)IEC-6細(xì)胞第七天時(shí)細(xì)胞毒性分級(jí)分別為0級(jí)和1級(jí),屬于無(wú)毒性,符合醫(yī)用材料細(xì)胞毒性分級(jí)的合格標(biāo)準(zhǔn)。40%和20%濃度鎂合金浸提液中,IEC-6細(xì)胞的凋亡比例及Caspase-3活化度相對(duì)于對(duì)照組都增高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),40%濃度組中,IEC-6細(xì)胞的凋亡比例及Caspase-3活化度相對(duì)于20%濃度組增高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),說(shuō)明Mg-6Zn合金浸提液在一定范圍內(nèi)處于較高濃度時(shí)易誘導(dǎo)IEC-6細(xì)胞的凋亡及Caspase-3的表達(dá),且隨濃度升高影響越大。
[Abstract]:The effects of different concentrations of Mg-6Zn alloy extract on the apoptosis of IEC-6 and the expression of apoptosis-related gene Caspase-3 in rat intestinal epithelial cells were studied. Rat intestinal epithelial cells (IEC-6,) were cultured in different concentrations (20% and 40%) of Mg-6Zn alloy, and high glucose DMEM (Dulbecco's modified Eagle's medium) medium containing 10% fetal bovine serum was used as negative control. The cytotoxicity of different concentrations of alloy extract to IEC-6 cells was detected by (MTT) assay, and the apoptosis of IEC-6 cells was detected by flow cytometry. Reverse transcriptase polymerase chain reaction (RT-PCR) was used to detect the effect of different concentrations of alloy extract on the expression of apoptosis-related gene Caspase-3mRNA in IEC-6 cells. The results showed that 20% and 40% magnesium alloy extractions were classified as 0 and 1 respectively on the 7th day after cultured in vitro for IEC-6 cells, which were nontoxic. The ratio of apoptosis and Caspase-3 activation of IEC-6 cells in 40% and 20% magnesium alloy extracts were higher than those in control group. There was significant difference (P0.05). In 40% concentration group, the percentage of apoptosis of IEC-6 cells and the degree of Caspase-3 activation were higher than those of 20% group. The difference was statistically significant (P0.05), which indicated that Mg-6Zn alloy extract at a higher concentration could induce apoptosis and Caspase-3 expression of IEC-6 cells, and the higher the concentration was, the greater the effect was.
【作者單位】： 上海交通大學(xué)附屬第六人民醫(yī)院普外科;南京醫(yī)科大學(xué)附屬無(wú)錫市第二人民醫(yī)院普外科;上海交通大學(xué)材料科學(xué)與工程學(xué)院;蘇州奧芮濟(jì)醫(yī)療科技有限公司;
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金(30901422;51271117)
【分類號(hào)】：R114

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2271457