【摘要】：目的探討體外染氟軟骨細胞中刺猥蛋白基因(Hh)信號通路中音速刺猬蛋白、跨膜蛋白(Smo)及下游骨形態(tài)發(fā)生蛋白-2(BMP-2)因子表達在氟中毒軟骨細胞損傷中的作用。方法取1周齡健康SD大鼠,用機械、酶消化法分離膝關節(jié)軟骨細胞,免疫細胞化學對原代軟骨細胞進行鑒定。實驗設對照組和染氟組(5、10、20、40 mg/L)。培養(yǎng)48 h后,噻唑藍法檢測各組細胞活力,蛋白印跡及逆轉錄PCR分別檢測各組細胞Smo、Shh、BMP-2蛋白及mRNA表達;流式細胞術檢測各組細胞凋亡情況。結果與對照組比較,5、10 mg/L染氟組細胞活力[分別為(113.33±11.74)%、(127.25±10.24)%]明顯升高,40 mg/L染氟組細胞活力[(73.91±9.94)%]明顯下降(P0.05);染氟組細胞中Shh、Smo、BMP-2蛋白和mRNA的表達量隨染氟濃度增加而升高;40 mg/L染氟組細胞凋亡率為(11.13±1.20)%,明顯高于對照組。結論氟可激活軟骨細胞中Hh信號通路,Hh信號通路與軟骨細胞凋亡可能共同參與氟中毒軟骨損害過程。
[Abstract]:Objective to investigate the role of sonic hedgehog protein, transmembrane protein (Smo) and downstream bone morphogenetic protein (BMP-2) factor expression in the (Hh) signaling pathway of impure protein gene in fluorosis chondrocytes in vitro. Methods the chondrocytes of knee joint were isolated by mechanical and enzymatic digestion from 1 week old healthy SD rats. The primary chondrocytes were identified by immunocytochemistry. The experiment was divided into two groups: control group and fluorine-exposed group (5 ~ 10 ~ 20 ~ 40 mg/L). After cultured for 48 h, the cell viability was detected by thiazolyl blue assay, the expression of Smo,Shh,BMP-2 protein and mRNA were detected by Western blot and reverse transcription PCR, and the apoptosis of each group was detected by flow cytometry. Results compared with the control group, the cell viability [(113.33 鹵11.74), (127.25 鹵10.24)%] of the 10 mg/L fluorine group increased significantly [(73.91 鹵9.94)%] significantly higher than that of the control group (P0.05), and the expression of Shh,Smo,BMP-2 protein and mRNA increased with the increase of fluoride concentration in the fluorine-exposed group. The apoptotic rate was (11.13 鹵1.20) in the control group, which was significantly higher than that in the control group. Conclusion fluoride can activate the Hh signaling pathway in chondrocytes and the apoptosis of chondrocytes may be involved in the process of cartilage damage caused by fluorosis.
【作者單位】： 貴州醫(yī)科大學病理學教研室;
【基金】：國家自然科學基金(81260419) 教育部博士點基金(博導類)(20125215110001)
【分類號】：R114

【參考文獻】

相關期刊論文 前6條

1 李良忠;張宏印;劉開泰;;氟對體外培養(yǎng)軟骨細胞超微結構的影響[J];中國地方病防治雜志;2009年03期

2 崔彩巖;李華兵;劉克儉;何曉宏;李長城;楊繼先;劉曉利;俞斌;張裕曾;;氟接觸人群血清中硬骨素的表達及其與氟性骨損傷的關系[J];環(huán)境與職業(yè)醫(yī)學;2012年02期

3 王琪琳;蘇玲;劉相國;;Hedgehog信號通路與腫瘤[J];生命的化學;2011年01期

4 劉振峰;方銳;孟慶才;;Ⅱ型膠原酶消化法可短時間獲得大量純化大鼠關節(jié)軟骨細胞[J];中國組織工程研究與臨床康復;2011年50期

5 劉連;徐園園;許潔;黃厚今;;氟對大鼠肝功及GSH-Px基因表達影響[J];中國公共衛(wèi)生;2010年05期

6 楊丹;于燕妮;鄧超男;朱海振;;氟對大鼠骨組織Osterix mRNA及其蛋白表達影響[J];中國公共衛(wèi)生;2011年08期

【共引文獻】

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1 顧嫻;寧眺;肖蘅;;洞穴魚類眼部退化機制的研究進展[J];動物學研究;2012年04期

2 鄧鋒;王媛;肖詠麗;張亞東;張亞樓;鐘近潔;;氟中毒小鼠肝纖維化形態(tài)學觀察[J];疾病預防控制通報;2013年01期

3 盧莉;張琪芬;;氟鋁及其交互處理對茶苗生長的影響[J];現(xiàn)代農業(yè)科技;2013年19期

4 梁川;蘇春利;吳亞;李世杰;;大同盆地高氟地下水的分布特征及形成過程分析[J];地質科技情報;2014年02期

5 黨占翠;趙忠智;魏生英;程海萍;;青海省海西州成人氟骨癥流行特征及影響因素分析[J];環(huán)境衛(wèi)生學雜志;2014年04期

6 黃迎娣;崔蕾;黃利鳴;王艷林;;上皮間質轉化與腫瘤耐藥[J];東南國防醫(yī)藥;2014年06期

7 梁禮革;朱明占;朱思萌;張麗萍;謝先軍;;桂東地區(qū)地熱水中氟的分布及其富集過程研究[J];安全與環(huán)境工程;2015年01期

8 張麗;張亞樓;唐莉;劉開泰;白生賓;范淑玲;鐘近潔;;熒光定量PCR檢測TM9SF1在氟中毒暴露者外周血中的表達[J];新疆醫(yī)科大學學報;2011年09期

9 王帥;;Hedgehog信號通路的研究進展[J];中國當代醫(yī)藥;2013年06期

10 陳浩;許浪;;信號通路對胃癌干細胞及胃癌發(fā)生的影響[J];中國組織工程研究;2013年14期

相關博士學位論文 前3條

1 馮瑩柱;高通量藥物篩選病毒芯片的研制[D];重慶大學;2013年

2 吳廣文;獨活寄生湯對骨性關節(jié)炎軟骨細胞增殖與凋亡影響的實驗研究[D];福建中醫(yī)藥大學;2014年

3 王麗霞;茶樹對氟的富集及其生理響應機制研究[D];西北農林科技大學;2014年

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1 李長城;SOST/DKK1調控Wnt通路在氟性骨損傷發(fā)生中作用的實驗研究[D];華中科技大學;2012年

2 張林林;健康女性中血清鐵蛋白與骨密度相關性分析及絕經后髖部脆性骨折中鐵過載與骨代謝關系的研究[D];蘇州大學;2013年

3 覃麗琳;氟的細胞損傷作用及硒和維生素E的干預效果研究[D];廣西醫(yī)科大學;2013年

4 楊歡歡;殼寡糖誘導Hela、A549細胞凋亡和自噬的研究[D];河北大學;2013年

5 侯侃;山西榆次高校新校區(qū)明清墓葬人骨研究[D];吉林大學;2013年

6 張杭;RUNX2及Ⅵ型膠原蛋白在胸椎黃韌帶骨化中表達研究[D];天津醫(yī)科大學;2013年

7 董睿;低強度脈沖超聲優(yōu)化組織工程化軟骨的構建及其修復關節(jié)軟骨缺損的實驗研究[D];南京中醫(yī)藥大學;2013年

8 彭傳q，

本文編號：2230555