【摘要】：目的探討體外染氟軟骨細(xì)胞中刺猥蛋白基因(Hh)信號(hào)通路中音速刺猬蛋白、跨膜蛋白(Smo)及下游骨形態(tài)發(fā)生蛋白-2(BMP-2)因子表達(dá)在氟中毒軟骨細(xì)胞損傷中的作用。方法取1周齡健康SD大鼠,用機(jī)械、酶消化法分離膝關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞,免疫細(xì)胞化學(xué)對(duì)原代軟骨細(xì)胞進(jìn)行鑒定。實(shí)驗(yàn)設(shè)對(duì)照組和染氟組(5、10、20、40 mg/L)。培養(yǎng)48 h后,噻唑藍(lán)法檢測(cè)各組細(xì)胞活力,蛋白印跡及逆轉(zhuǎn)錄PCR分別檢測(cè)各組細(xì)胞Smo、Shh、BMP-2蛋白及mRNA表達(dá);流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)各組細(xì)胞凋亡情況。結(jié)果與對(duì)照組比較,5、10 mg/L染氟組細(xì)胞活力[分別為(113.33±11.74)%、(127.25±10.24)%]明顯升高,40 mg/L染氟組細(xì)胞活力[(73.91±9.94)%]明顯下降(P0.05);染氟組細(xì)胞中Shh、Smo、BMP-2蛋白和mRNA的表達(dá)量隨染氟濃度增加而升高;40 mg/L染氟組細(xì)胞凋亡率為(11.13±1.20)%,明顯高于對(duì)照組。結(jié)論氟可激活軟骨細(xì)胞中Hh信號(hào)通路,Hh信號(hào)通路與軟骨細(xì)胞凋亡可能共同參與氟中毒軟骨損害過(guò)程。
[Abstract]:Objective to investigate the role of sonic hedgehog protein, transmembrane protein (Smo) and downstream bone morphogenetic protein (BMP-2) factor expression in the (Hh) signaling pathway of impure protein gene in fluorosis chondrocytes in vitro. Methods the chondrocytes of knee joint were isolated by mechanical and enzymatic digestion from 1 week old healthy SD rats. The primary chondrocytes were identified by immunocytochemistry. The experiment was divided into two groups: control group and fluorine-exposed group (5 ~ 10 ~ 20 ~ 40 mg/L). After cultured for 48 h, the cell viability was detected by thiazolyl blue assay, the expression of Smo,Shh,BMP-2 protein and mRNA were detected by Western blot and reverse transcription PCR, and the apoptosis of each group was detected by flow cytometry. Results compared with the control group, the cell viability [(113.33 鹵11.74), (127.25 鹵10.24)%] of the 10 mg/L fluorine group increased significantly [(73.91 鹵9.94)%] significantly higher than that of the control group (P0.05), and the expression of Shh,Smo,BMP-2 protein and mRNA increased with the increase of fluoride concentration in the fluorine-exposed group. The apoptotic rate was (11.13 鹵1.20) in the control group, which was significantly higher than that in the control group. Conclusion fluoride can activate the Hh signaling pathway in chondrocytes and the apoptosis of chondrocytes may be involved in the process of cartilage damage caused by fluorosis.
【作者單位】： 貴州醫(yī)科大學(xué)病理學(xué)教研室;
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金(81260419) 教育部博士點(diǎn)基金(博導(dǎo)類)(20125215110001)
【分類號(hào)】：R114

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8 彭傳q，

本文編號(hào)：2230555