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乙;疎GCG的酶法制備及其在油脂中抗氧化應(yīng)用研究

發(fā)布時(shí)間:2018-06-14 20:10

  本文選題:表沒(méi)食子兒茶素沒(méi)食子酸酯 + 乙;。 參考:《江南大學(xué)》2013年碩士論文


【摘要】:表沒(méi)食子兒茶素沒(méi)食子酸酯(EGCG)是茶葉茶多酚中質(zhì)量分?jǐn)?shù)最大的一種成分,約占茶多酚總量的30%~40%。EGCG具有抗氧化、抗突變、防輻射、抗腫瘤、調(diào)節(jié)免疫和延緩衰老等生理活性作用。然而由于EGCG較高的水溶性和較低的脂溶性,大大限制了它作為天然抗氧化劑和醫(yī)藥、保健原料的潛在應(yīng)用,,尤其是在精煉食用油脂中的應(yīng)用。本文利用酶法制備乙;疎GCG以期增加其脂溶性,并對(duì)乙酰化EGCG的反應(yīng)條件、分離條件及乙;疎GCG在食用油中的溶解性和抗氧化活性等進(jìn)行了研究。主要研究?jī)?nèi)容包括: 確定了酶法制備乙酰化EGCG的最優(yōu)反應(yīng)條件:酶的種類為脂肪酶TLIM,反應(yīng)溶劑體系為乙腈:異丙醇=5:5,反應(yīng)溫度為45℃,反應(yīng)時(shí)間為11h,底物摩爾比(乙酸乙烯酯與EGCG物質(zhì)的量之比)為0.4:1,脂肪酶添加量為5%(w/w,酶:底物)。在此條件下,EGCG的乙酰化轉(zhuǎn)化率為96.73%。采用液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜(LC-MS/MS)和紅外光譜對(duì)EGCG乙酰化產(chǎn)物進(jìn)行了確證。通過(guò)對(duì)EGCG反應(yīng)前后紅外圖譜進(jìn)行對(duì)照分析,發(fā)現(xiàn)反應(yīng)后產(chǎn)物具有明顯的羰基(C=O)吸收峰,說(shuō)明乙;磻(yīng)是成功的。LC-MS/MS進(jìn)一步確認(rèn)該產(chǎn)物是一種混合物,根據(jù)乙酰基取代數(shù)目的不同,分為一取代、二取代和三取代三類產(chǎn)物,每類取代產(chǎn)物由于取代位置的不同,又分為不同的單體。 利用高速逆流色譜法(HSCCC)分離乙酰化EGCG粗產(chǎn)品,并確定了分離條件:溶劑系統(tǒng)為正己烷:乙酸乙酯:甲醇:水=1.5:5:1.5:5(v/v),上相為固定相,下相為流動(dòng)相,正向旋轉(zhuǎn),轉(zhuǎn)速為700r/min。將HSCCC分離得到的4個(gè)峰進(jìn)行HPLC檢測(cè),可知峰2為純度達(dá)到93.52%的EGCG乙;蝗〈a(chǎn)物,經(jīng)過(guò)質(zhì)譜和核磁共振分析,確定該產(chǎn)物為5'-O-乙酰基EGCG。 通過(guò)溶解度和透光率實(shí)驗(yàn)表明,乙;疎GCG在食用油中溶解性較好,透明度較高,在30℃時(shí)溶解度為0.50g/kg。色差實(shí)驗(yàn)表明在添加量為200mg/kg時(shí),乙酰化EGCG對(duì)于大豆油色澤、亮度沒(méi)有顯著影響。 采用過(guò)氧化值(POV)法考察并比較了不同抗氧化劑在食用油中的抗氧化性能。結(jié)果表明,在添加量同為200mg/kg時(shí),乙;疎GCG在油脂中的抗氧化活性要高于未改性EGCG和BHT,略低于TBHQ。而對(duì)于不同取代度的乙;疎GCG產(chǎn)物,其抗氧化活性順序?yàn)椋阂阴;蝗〈a(chǎn)物一取代和二取代的混合產(chǎn)物乙酰化EGCG混合物未改性EGCG。清除DPPH自由基能力比較結(jié)果為VCEGCG乙;疎GCGTBHQ。
[Abstract]:Epigallocatechin gallate (EGCGG) is the largest component in tea polyphenols, accounting for 30% of the total tea polyphenols. EGCG has antioxidant, mutagenic, radiation-resistant, anti-tumor, Regulating immune and delaying senescence and other physiological activities. However, the potential applications of EGCG as natural antioxidants, medicine and health care raw materials, especially in refined edible oils, are greatly limited due to its high water solubility and low fat-solubility. In this paper, acetylated EGCG was prepared by enzymatic method in order to increase its liposolubility. The reaction conditions, separation conditions, solubility and antioxidant activity of acetylated EGCG in edible oil were studied. The main contents are as follows: the optimal reaction conditions for the preparation of acetylated EGCG by enzymatic method were determined: the enzyme was lipase TLIMA, the reaction solvent system was acetonitrile: isopropanol 5: 5, the reaction temperature was 45 鈩

本文編號(hào):2018812

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