丙烯酰胺對大鼠生精細(xì)胞XRCC1蛋白表達(dá)與凋亡的影響
發(fā)布時間:2018-06-07 15:33
本文選題:丙烯酰胺 + 精子密度 ; 參考:《河北醫(yī)科大學(xué)》2013年碩士論文
【摘要】:目的:近年來,男性生殖能力普遍下降,環(huán)境因素直接影響男性生殖健康。丙烯酰胺(acrylamide)是環(huán)境和食品中有毒物質(zhì),對人類生殖健康產(chǎn)生嚴(yán)重影響。丙烯酰胺的生殖毒性可以導(dǎo)致男性不育,機(jī)制尚未完全清楚。 活性氧(reactive oxygen species)越來越受到男性生殖醫(yī)學(xué)工作者的重視,氧化應(yīng)激損傷被認(rèn)為是造成男性不育的重要病因之一。高濃度活性氧被認(rèn)為能夠誘發(fā)生精細(xì)胞DNA損傷和加速生精細(xì)胞的凋亡。XRCC1蛋白(X線修復(fù)交叉互補(bǔ)組1)是通過DNA堿基切除修復(fù),特異性識別并切除5mC的糖苷酶(glycosylase),切除5mC產(chǎn)生AP位點(diǎn)(apurinic/apyrimidinic site),進(jìn)而啟動堿基切除修復(fù)途徑(BER)來實(shí)現(xiàn)DNA修復(fù)的。對于氧化和非氧化的DNA損傷,XRCC1通過BER途徑與多聚ADP核糖聚合酶(PARP)、DNA連接酶Ⅲ及DNA多聚酶β作用來修復(fù)DNA,進(jìn)而維持染色質(zhì)的完整性,從而減少生精細(xì)胞凋亡。 本研究通過對SD大鼠不同劑量的丙烯酰胺染毒,觀察大鼠附睪中精子密度、畸形率和丙二醛(MDA)水平變化,進(jìn)一步研究睪丸組織中XRCC1蛋白表達(dá)和生精細(xì)胞凋亡的變化以及相關(guān)性,探討丙烯酰胺染毒時,對SD大鼠生精功能的影響及其可能的機(jī)制。 方法:選擇符合試驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)的成年健康雄性SD大鼠(體重150±10g)40只。自由飲雙蒸水,適應(yīng)性喂養(yǎng)1周后,隨機(jī)分為四組,空白對照組及染毒低劑量組,中劑量組,高劑量組,每組10只,標(biāo)準(zhǔn)飼料喂養(yǎng),以灌胃方式分別給予空白對照組雙蒸水、低劑量組20mg/kg丙烯酰胺水溶液、中劑量組40mg/kg丙烯酰胺水溶液、高劑量組60mg/kg丙烯酰胺水溶液,灌胃體積10ml/kg,每天上午8時灌胃,每日1次,每周5次,連續(xù)2周后,取右側(cè)附睪并測定附睪中精子密度及畸形率,同時測定精漿中丙二醛水平,取右側(cè)睪丸組織組化法觀察生精細(xì)胞XRCC1的表達(dá),TUNEL法觀察生精細(xì)胞的凋亡。采用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件,單因素方差分析(one-wayANOVA)方法,兩組間比較采用LSD法;以XRCC1蛋白表達(dá)與凋亡之間的關(guān)系做直線相關(guān)性分析,以α=0.05,P0.05表示有顯著性差異,,P0.01表示有極顯著性差異。 結(jié)果:隨著染毒劑量的增加,大鼠體重和睪丸重量呈下降趨勢,(P0.05)各染毒組附睪中精子密度下降、精子畸形率及丙二醛水平(MDA)均明顯升高,與對照組比較均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),隨染毒劑量的增加,精子密度下降顯著,精子畸形率和丙二醛水平升高顯著。各染毒組XRCC1蛋白表達(dá)下降,凋亡生精細(xì)胞增加,與對照組比較均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),隨染毒劑量的增加,睪丸生精細(xì)胞XRCC1蛋白表達(dá)下降顯著,凋亡生精細(xì)胞升高顯著。XRCC1蛋白表達(dá)下降及凋亡生精細(xì)胞升高呈現(xiàn)明顯的劑量-效應(yīng)反應(yīng)關(guān)系。 結(jié)論:隨丙烯酰胺染毒劑量的增加,大鼠附睪精子密度下降,畸形率及丙二醛水平升高,其可能與氧化性損傷有關(guān)。同時睪丸生精細(xì)胞XRCC1蛋白表達(dá)下降,凋亡的生精細(xì)胞增加可能是影響丙烯酰胺染毒大鼠生精功能的一個重要機(jī)制。
[Abstract]:Objective: in recent years, male reproductive ability is generally decreased, environmental factors directly affect male reproductive health. Acrylamide (acrylamide) is a toxic substance in the environment and food, which has a serious impact on human reproductive health. The reproductive toxicity of acrylamide can lead to male infertility, the mechanism is not fully understood. Reactive oxygen specieses (Ros) have been paid more and more attention by male reproductive medicine workers. Oxidative stress injury is regarded as one of the important causes of male infertility. High concentration of reactive oxygen species (Ros) is thought to induce DNA damage in spermatogenic cells and accelerate apoptosis of spermatogenic cells. XRCC1 protein X ray repair cross complementary group 1) is repaired by DNA base excision. The glycosidase glycosylase of 5mC was specifically identified and excised, and the AP site produced by 5mC was removed to produce apurinic / aprimidinic site1, which then initiated the gene base excision repair pathway (ber) to realize DNA repair. For oxidized and non-oxidized DNA damage, XRCC1 restores the DNA through BER pathway with ADP ribosomal polymerase 鈪
本文編號:1991686
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