微囊藻毒素-LR的生物素-親和素-時(shí)間分辨熒光免疫分析法
本文選題:微囊藻毒素-LR + 時(shí)間分辨熒光免疫分析法 ; 參考:《環(huán)境與健康雜志》2015年01期
【摘要】:目的運(yùn)用生物素-親和素信號(hào)放大系統(tǒng),建立高靈敏的微囊藻毒素-LR(MC-LR)時(shí)間分辨熒光免疫分析(TRFIA)檢測(cè)方法。方法采用5μg/ml二抗Ig G包被板,樣品中的MC-LR與生物素-MC-LR半抗原(1∶300)競(jìng)爭(zhēng)限量抗MC-LR抗體(1∶1 000),用銪標(biāo)記的鏈霉親和素示蹤,采用TRFIA法檢測(cè)水樣中的MC-LR含量。結(jié)果在0.1~5 ng/ml的線性范圍內(nèi),得到MC-LR-TRFIA的回歸方程為y=-29 132x+38 057,r=0.991 5。方法的靈敏度為0.02 ng/ml,平均回收率為80.2%~102.0%,批內(nèi)和批間的RSD分別為4.3%~8.1%和9.9%~15.2%。該方法檢測(cè)MC-LR與MC-YR和MC-LF的交叉率均小于10%。結(jié)論基于生物素-親和素信號(hào)放大系統(tǒng)的MC-LR-TRFIA方法靈敏度高、特異性好、操作簡(jiǎn)便,適于水中MC-LR濃度的檢測(cè)。
[Abstract]:Objective to establish a highly sensitive time resolved fluorescence immunoassay (TRFIA) method for the detection of microcystin-LRX MC-LR by using biotin-avidin signal amplification system. Methods A 5 渭 g/ml second antibody IgG coating plate was used. The MC-LR in the sample competed with biotin -MC-LR hapten (1: 300) in a limited amount of anti MC-LR antibody (1: 1 000). The MC-LR content in water samples was determined by TRFIA with europium labeled streptavidin tracer. Results within the linear range of 0.1 ng/ml, the regression equation of MC-LR-TRFIA was yi-29 132x 38.057-0.9915. The sensitivity of the method was 0.02 ng / ml, the average recovery was 80.2% and 102.0, and the RSD in and between batches was 4.3% and 9.9%, respectively. The crossover rate of MC-LR with MC-YR and MC-LF is less than 10%. Conclusion the MC-LR-TRFIA method based on biotin-avidin signal amplification system is sensitive, specific and easy to operate. It is suitable for the detection of MC-LR concentration in water.
【作者單位】: 江蘇省原子醫(yī)學(xué)研究所衛(wèi)生部核醫(yī)學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室江蘇省分子核醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室;江南大學(xué)藥學(xué)院;
【基金】:江蘇省社會(huì)發(fā)展基金(BE2009631)
【分類號(hào)】:R114;O657.3
【參考文獻(xiàn)】
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【共引文獻(xiàn)】
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,本文編號(hào):1990181
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