本文選題：硫酸鈹 + 線粒體通透性轉(zhuǎn)換孔�。� 參考：《寧夏醫(yī)科大學(xué)》2017年碩士論文

【摘要】：目的本研究觀察不同濃度硫酸鈹(BeSO4)對(duì)體外培養(yǎng)人胚肺成纖維細(xì)胞(MRC-5)早期凋亡率、線粒體膜電位的影響,凋亡誘導(dǎo)因子(AIF)、凋亡蛋白酶激活因子(Apaf-1)mRNA以及蛋白表達(dá)的改變,研究線粒體通透性轉(zhuǎn)換孔(mPTP)在BeSO4致體外培養(yǎng)MRC-5細(xì)胞凋亡中的作用,并觀察mPTP開(kāi)放抑制劑環(huán)孢霉素A(CsA)與促開(kāi)放劑蒼術(shù)苷(ATR)對(duì)此作用的干預(yù)。方法體外培養(yǎng)MRC-5細(xì)胞系,采用CCK-8法確定CsA和ATR干預(yù)劑量;試驗(yàn)分空白對(duì)照組、Be SO4染毒組(劑量分別為1、10、100μmol/L)、干預(yù)組(10μmol/L BeSO4+10μmol/L CsA和10μmol/L BeSO4+10μmol/L ATR)、干預(yù)對(duì)照組(10μmol/L CsA和10μmol/L ATR);分別染毒及干預(yù)24h、48h、72h后,收集細(xì)胞進(jìn)行試驗(yàn),流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞早期凋亡率,JC-1熒光探針標(biāo)記檢測(cè)線粒體膜電位的改變,實(shí)時(shí)熒光定量逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(qRT-PCR)檢測(cè)AIF、Apaf-1 mRNA表達(dá),蛋白免疫印記法(Western Blot)檢測(cè)各劑量組AIF、Apaf-1蛋白表達(dá)水平。結(jié)果1.染毒24h、48h、72h,CCK-8法確定CsA和ATR干預(yù)劑量均為10μmol/L。2.BeSO4低、中、高劑量組分別染毒24h、48h、72h,MRC-5細(xì)胞早期凋亡率出現(xiàn)不同程度降低,染毒72h,BeSO4低、中、高劑量染毒組與同時(shí)相空白對(duì)照組相比降低(P0.05),CsA干預(yù)組與同時(shí)相空白對(duì)照組相比降低(P0.05),ATR干預(yù)組與同時(shí)相空白對(duì)照組相比差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),與BeSO4中劑量組相比增高但無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。3.BeSO4低、中、高劑量分別染毒48h、72h,線粒體膜電位出現(xiàn)不同程度的增高,染毒48h,BeSO4高劑量組與同時(shí)相空白對(duì)照組及Be SO4中劑量組相比增高(P0.05),染毒72h,BeSO4中劑量組與同時(shí)相空白對(duì)照組相比增高(P0.05);在72h時(shí)間點(diǎn),CsA、ATR干預(yù)后與同時(shí)相Be SO4中劑量組相比線粒體膜電位降低(P0.05),CsA、ATR對(duì)照組與同時(shí)相Be SO4中劑量組相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。4.BeSO4低、中、高劑量分別染毒24h、48h、72h,三個(gè)劑量組AIF m RNA表達(dá)與同時(shí)相空白對(duì)照組相比降低(P0.05);在24h、48h、72h時(shí)間點(diǎn),CsA干預(yù)組與同時(shí)相空白對(duì)照組相比降低(P0.05),但與同時(shí)相BeSO4中劑量組相比差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);在24h、72h時(shí)間點(diǎn),ATR干預(yù)組與同時(shí)相BeSO4中劑量組相比增高(P0.05)。5.BeSO4低、中、高劑量分別染毒24h、48h、72h,三個(gè)劑量組Apaf-1 m RNA表達(dá)與同時(shí)相空白對(duì)照組相比降低(P0.05);在24h、72h時(shí)間點(diǎn),CsA干預(yù)組與同時(shí)相空白對(duì)照組相比降低(P0.05),CsA干預(yù)組與同時(shí)相BeSO4中劑量組相比降低(P0.05);在24h、48h、72h時(shí)間點(diǎn),ATR干預(yù)組與同時(shí)相空白對(duì)照組相比差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),在24h、48h時(shí)間點(diǎn),與同時(shí)相BeSO4中劑量組相比增高(P0.05)。6.染毒48h、72h,Be SO4中、高劑量組與同時(shí)相空白對(duì)照組相比AIF蛋白表達(dá)降低(P0.05);在72h時(shí)間點(diǎn),CsA干預(yù)組與同時(shí)相空白對(duì)照組相比降低(P0.05),與同時(shí)相BeSO4中劑量組相比降低(P0.05),ATR干預(yù)組與同時(shí)相BeSO4中劑量組相比增高,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。7.染毒24h、48h,BeSO4中、高劑量組與同時(shí)相空白對(duì)照組相比Apaf-1蛋白表達(dá)降低(P0.05);在24h時(shí)間點(diǎn),CsA干預(yù)組與同時(shí)相空白對(duì)照組相比降低(P0.05),ATR干預(yù)組與同時(shí)相Be SO4中劑量組相比增高,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論Be SO4可抑制MRC-5細(xì)胞凋亡;mPTP在BeSO4致MRC-5細(xì)胞早期凋亡中發(fā)揮了一定的作用;經(jīng)CsA與ATR干預(yù)驗(yàn)證了線粒體通透性轉(zhuǎn)換孔的作用。
[Abstract]:Objective To investigate the effect of different concentrations of beryllium sulfate ( BeSO4 ) on the early apoptotic rate , mitochondrial membrane potential , apoptosis - inducing factor ( Apaf - 1 ) mRNA and protein expression in human embryonic lung fibroblasts ( MRC - 5 ) . At 24 h , 48 h and 72 h , the expression of Apaf - 1 mRNA was significantly lower than that in the control group ( P0.05 ) . At 24 h , 48 h , 72 h , the dose of CsA was lower than that in the control group at the same time ( P0.05 ) . Compared with the control group , the expression of Apaf - 1 protein decreased ( P0.05 ) . Compared with the control group , the expression of Apaf - 1 protein decreased ( P0.05 ) at the time of 24h , 48h and BeSO4 . Conclusion Be SO 4 can inhibit the apoptosis of MRC - 5 cells .
【學(xué)位授予單位】：寧夏醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號(hào)】：R135

【參考文獻(xiàn)】

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10 毛偉平;張娜娜;魏傳靜;周雷;馮娟;劉洪云;;鎘對(duì)HEK 293細(xì)胞線粒體損傷作用[J];中國(guó)公共衛(wèi)生;2008年12期

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本文編號(hào)：1973316