發(fā)布時(shí)間：2018-05-06 13:43

  本文選題：納米二氧化硅 + 支氣管上皮細(xì)胞��； 參考：《毒理學(xué)雜志》2015年03期

【摘要】：目的 評價(jià)納米二氧化硅顆粒物對人正常支氣管上皮細(xì)胞(BEAS-2B)的毒性作用及可能機(jī)制。方法(1)掃描電子顯微鏡(Scanning Electron Microscope,SEM)觀察經(jīng)100μg/ml的20 nm二氧化硅和結(jié)晶型二氧化硅(MinU-Sil 5)暴露24~72 h后的BEAS-2B細(xì)胞形態(tài)變化;(2)應(yīng)用3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide(MTT)比色法檢測實(shí)驗(yàn)組(納米二氧化硅處理組)、陽性對照組(Min-U-Sil 5處理組)的細(xì)胞活力變化,分別測定不同實(shí)驗(yàn)條件下的還原型谷胱甘肽(GSH)、細(xì)胞內(nèi)活性氧(ROS)和乳酸脫氫酶(LDH)水平;(3)流式細(xì)胞儀分析經(jīng)暴露不同濃度20 nm二氧化硅后的細(xì)胞周期變化。結(jié)果 (1)經(jīng)20 nm二氧化硅刺激24 h后BEAS-2B細(xì)胞體積增大,胞漿疏松,細(xì)胞數(shù)量減少,并隨刺激時(shí)間延長而加重,陽性對照組上述變化不明顯;(2)BEAS-2B細(xì)胞活力隨暴露濃度和暴露時(shí)間的增加而下降,暴露濃度50μg/ml時(shí)20 nm二氧化硅組的細(xì)胞活力下降與陽性對照組間比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),暴露濃度為100和200μg/ml時(shí)20 nm組與50 nm組間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。100μg/ml濃度暴露24 h后,20 nm二氧化硅組細(xì)胞活力下降情況與陽性對照組間比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),暴露72 h后各組間細(xì)胞活力下降差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。BEAS-2B細(xì)胞培養(yǎng)基中的細(xì)胞內(nèi)活性氧(ROS)升高、還原型谷胱甘肽(GSH)下降和乳酸脫氫酶(LDH)升高,并隨暴露時(shí)間延長和二氧化硅粒徑減小而變化;(3)納米二氧化硅可使G2/M期停滯和G1期細(xì)胞增多,并呈現(xiàn)濃度效應(yīng)。結(jié)論 納米二氧化硅造成BEAS-2B細(xì)胞的細(xì)胞毒性作用強(qiáng)于結(jié)晶型二氧化硅(Min-U-Sil 5),納米二氧化硅對BEAS-2B細(xì)胞的細(xì)胞毒性作用,具有濃度-效應(yīng)、時(shí)間-效應(yīng)和粒徑-效應(yīng)現(xiàn)象,細(xì)胞毒性作用并最終引起細(xì)胞氧化損傷。
[Abstract]:Objective to evaluate the toxic effect of nano-silica particles on human normal bronchial epithelial cells (BEAS-2B) and its possible mechanism. Methods 1) scanning electron microscope (SEM) scanning electron microscopy (SEM) was used to observe the morphological changes of BEAS-2B cells after exposure to 100 渭 g/ml 20 nm silica and crystalline silica (MinU-Sil 5) for 2472 h). The 3-tir 45-dimethylthiazol-2-ylthiazol-2-yl-25-diphenyltetrazolium bromidedet assay was used to detect the morphological changes of BEAS-2B cells in the experimental group (nano-silica treated group). The change of cell activity in the positive control group (Min-U-Sil 5 treatment group), The levels of reduced glutathione (GSH), intracellular reactive oxygen species (Ros) and lactate dehydrogenase (LDH) were measured by flow cytometry (FCM) to analyze the cell cycle changes after exposure to 20 nm silica at different concentrations. Results 1) after being stimulated with 20 nm silica for 24 h, the volume of BEAS-2B cells increased, the cytoplasm became loose and the number of cells decreased, and the number of cells increased with the prolongation of stimulation time. The above changes were not obvious in the positive control group. The activity of BEAS-2B cells decreased with the increase of the exposure concentration and exposure time. The cell viability of the 20nm silica group at the exposure concentration of 50 渭 g/ml was lower than that of the positive control group. There was significant difference between the 20 nm group and the 50 nm group when the exposure concentration was 100 渭 g/ml and 200 渭 g/ml. The cell viability of the 20 nm silica group was decreased after 24 h exposure to P0.05 + 100 渭 g/ml concentration, compared with that of the positive control group. The difference was statistically significant (P 0.05). After 72 h exposure, there were significant differences in the decrease of cell viability and the increase of intracellular reactive oxygen species (Ros), reduced glutathione (GSH) and lactate dehydrogenase (LDH) in BEAS-2B cell culture medium. With the prolongation of the exposure time and the decrease of the particle size of silica, the nano silica can make the G 2 / M phase arrest and G1 phase cells increase, and present a concentration effect. Conclusion the cytotoxicity of BEAS-2B cells induced by nano-silica is stronger than that of crystallized silica Min-U-Sil 5G. The effects of nano-silica on BEAS-2B cells are concentration-effect, time-effect and particle size effect. Cytotoxicity and ultimately cell oxidative damage.
【作者單位】： 昆明醫(yī)科大學(xué)第三附屬醫(yī)院/云南省腫瘤醫(yī)院胸外一科;昆明醫(yī)科大學(xué)第三附屬醫(yī)院/云南省腫瘤醫(yī)院腫瘤研究所;
【分類號】：R994.1

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本文編號：1852542