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DNMTs在長(zhǎng)期氡暴露致BEAS-2B細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)化過(guò)程中的作用

發(fā)布時(shí)間:2018-04-23 15:11

  本文選題: + 肺癌。 參考:《毒理學(xué)雜志》2015年02期


【摘要】:目的檢測(cè)經(jīng)長(zhǎng)期氡暴露而發(fā)生惡性轉(zhuǎn)化的人永生化支氣管上皮細(xì)胞(BEAS-2B)中甲基化轉(zhuǎn)移酶(DNMT)基因的動(dòng)態(tài)變化,從表觀遺傳學(xué)層面探索氡致肺癌的作用機(jī)制。方法應(yīng)用流式細(xì)胞儀分析法,軟瓊脂集落形成及裸鼠成瘤實(shí)驗(yàn)鑒定長(zhǎng)期氡暴露過(guò)程中BEAS-2B細(xì)胞的惡性轉(zhuǎn)化程度,以QPCR方法檢測(cè)DNMT1、DNMT3A的mRNA表達(dá)量。結(jié)果與對(duì)照組細(xì)胞相比,染氡30代傳代至40代的細(xì)胞軟瓊脂克隆形成率已升高至27.27%±1.10%(P0.05),轉(zhuǎn)化細(xì)胞在裸鼠體內(nèi)成瘤率達(dá)到30%(P0.05),呈低分化癌;QPCR結(jié)果顯示各染氡組傳至40代細(xì)胞DNMT1 mRNA表達(dá)量均低于對(duì)照組,DNMT3A mRNA表達(dá)量均高于對(duì)照組。結(jié)論建立并確認(rèn)了體外染氡誘發(fā)BEAS-2B細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)化模型,且細(xì)胞惡性程度隨染氡代數(shù)和傳代代數(shù)的增加呈現(xiàn)劑量-效應(yīng)關(guān)系,細(xì)胞出現(xiàn)移植成瘤。本試驗(yàn)條件下,DNMTs表達(dá)的改變導(dǎo)致細(xì)胞增殖失控,打破內(nèi)環(huán)境平衡,這可能是在表觀遺傳學(xué)中,長(zhǎng)期氡暴露致BEAS-2B細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)化的機(jī)制之一。
[Abstract]:Objective to detect the dynamic changes of methyltransferase (DNMTA) gene in human immortalized bronchial epithelial cells (BEAS-2B) after long term radon exposure, and to explore the mechanism of radon induced lung cancer from epigenetics. Methods the malignant transformation of BEAS-2B cells during long-term radon exposure was evaluated by flow cytometry, soft Agar colony formation and tumorigenesis in nude mice. The mRNA expression of DNMT1 and DNMT3A was detected by QPCR method. Results compared with control cells, The colony formation rate of soft Agar from 30 to 40 passages of radon was increased to 27.27% 鹵1.10%, and the tumorigenic rate of transformed cells in nude mice was 30%. The results of QPCR showed that the expression of DNMT1 mRNA was lower than that of the control group. The expression of DNMT3A mRNA in the control group was higher than that in the control group. Conclusion the model of malignant transformation of BEAS-2B cells induced by radon exposure in vitro was established and confirmed. The malignant degree of BEAS-2B cells showed a dose-effect relationship with the increase of radon generation and passage algebra. In this study, the change of DNMTs expression caused the cell proliferation to lose control and upset the balance of the internal environment. This may be one of the mechanisms of malignant transformation of BEAS-2B cells induced by long-term radon exposure in epigenetics.
【作者單位】: 蘇州大學(xué)公共衛(wèi)生學(xué)院衛(wèi)生毒理系;
【基金】:國(guó)家自然科學(xué)基金(81172707) 江蘇省自然科學(xué)基金(BK2012618)
【分類(lèi)號(hào)】:R114

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