本文選題：鎘 + 凋亡��； 參考：《南京醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版)》2015年04期

【摘要】：目的 :探討mi R-143-5p對鎘誘導(dǎo)LLC-PK1細(xì)胞凋亡的調(diào)控作用及其機(jī)制。方法 :通過基因芯片技術(shù)篩選出由鎘引起的差異表達(dá)mi RNAs,并用實時定量PCR方法驗證基因芯片結(jié)果的可靠性;應(yīng)用Lipofectamine 2000瞬時轉(zhuǎn)染mi R-143-5p的模擬物和抑制劑建立mi R-143-5p高表達(dá)和低表達(dá)的模型,并結(jié)合q RT-PCR技術(shù)驗證轉(zhuǎn)染效果;Hoechst 33258染色和Annexin V-PI雙染法檢測細(xì)胞凋亡;生物信息學(xué)分析結(jié)合實時定量PCR和Western blot驗證mi R-143-5p靶基因的表達(dá);Western blot分析mi R-143-5p對細(xì)胞凋亡相關(guān)通路的調(diào)控作用。結(jié)果:鎘可增強LLC-PK1細(xì)胞的mi R-143-5p表達(dá)水平(P0.01);轉(zhuǎn)染mi R-143-5p模擬物或抑制劑后,與對照組(mi R-NC)比較,mi R-143-5p表達(dá)明顯上調(diào)或下調(diào)(P0.01);mi R-143-5p的過表達(dá)可促進(jìn)LLC-PK1細(xì)胞凋亡(P0.01);mi R-143-5p在AKT3的m RNA和蛋白水平上發(fā)揮靶向調(diào)控作用;mi R-143-5p過表達(dá)能抑制pAkt和p-Bad蛋白表達(dá),促進(jìn)caspase-9和caspase-3蛋白上調(diào)。結(jié)論 :mi R-143-5p可能通過作用于靶基因AKT3,并抑制Akt/Bad信號通路,促進(jìn)鎘誘導(dǎo)LLC-PK1細(xì)胞的凋亡。
[Abstract]:Aim: to investigate the regulatory effect of mi R-143-5p on cadmium induced apoptosis in LLC-PK1 cells and its mechanism. Methods: the differentially expressed mi RNAs-induced by cadmium was screened by gene chip technique, and the reliability of the results was verified by real-time quantitative PCR. The model of high expression and low expression of mi R-143-5p was established by transient transfection of Lipofectamine 2000 into the mimic and inhibitor of mi R-143-5p. The effect of transfection was verified by Q RT-PCR technique. Apoptosis was detected by Annexin V-PI double staining and Hoechst 33258 staining. Bioinformatics analysis combined with real-time quantitative PCR and Western blot was used to verify the expression of mi R-143-5p target gene. Western blot was used to analyze the regulatory effect of mi R-143-5p on apoptosis-related pathway. Results: cadmium could enhance the expression level of mi R-143-5p in LLC-PK1 cells. Compared with the control group, the overexpression of R- 143-5p significantly up-regulated or down-regulated the overexpression of P0.01OMR-143-5p in LLC-PK1 cells. The overexpression of R- 143-5p could promote the apoptosis of LLC-PK1 cells. P0.01nmR-143-5p could inhibit the expression of pAkt and p-Bad proteins at the level of m RNA and protein of AKT3, and the overexpression of R- 143-5p could inhibit the expression of pAkt and p-Bad protein, and the overexpression of R- 143-5p could inhibit the expression of pAkt and p-Bad. Promote the upregulation of caspase-9 and caspase-3 protein. Conclusion it is suggested that the apoptosis of LLC-PK1 cells induced by cadmium may be promoted by the action of the target gene AKT3 and the inhibition of Akt/Bad signaling pathway by the action of 1: mi R-143-5p.
【作者單位】： 南京醫(yī)科大學(xué)公共衛(wèi)生學(xué)院營養(yǎng)與食品衛(wèi)生學(xué)系;
【基金】：江蘇高校優(yōu)勢學(xué)科建設(shè)工程資助項目(2011)
【分類號】：R114

【共引文獻(xiàn)】

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本文編號：1785630