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我國食源性蠟樣芽胞桿菌生化型、毒力基因及藥物敏感性研究

發(fā)布時間:2018-04-05 04:18

  本文選題:食源性蠟樣芽胞桿菌 切入點:食物中毒 出處:《中國疾病預防控制中心》2013年碩士論文


【摘要】:蠟樣芽胞桿菌(Bacillus cereus)是一種革蘭陽性芽胞桿菌,廣泛分布于植物和土壤等環(huán)境中,是一種重要的食源性致病菌。蠟樣芽胞桿菌引起的食物中毒臨床上分為嘔吐型和腹瀉型兩類綜合癥。嘔吐型由嘔吐毒素引起,腹瀉型則為多種腸毒素的作用。本研究對2011年我國食源性致病菌監(jiān)測網(wǎng)提交的427株疑似蠟樣芽胞桿菌分離株進行復核鑒定,以確認的238株蠟樣芽胞桿菌分離株為研究對象,對其生化型別、毒力基因、藥敏譜的分布進行較為全面、細致的研究,旨在掌握我國食源性蠟樣芽胞桿菌的生化型別、毒力基因和藥敏譜分布特征,分析其流行病學特征、毒力特征和致病機理,為評估食源性蠟樣芽胞桿菌污染的風險提供技術(shù)支持和數(shù)據(jù),對預防和控制蠟樣芽胞桿菌食物中毒和保障食品安全具有重要意義。1.生化型別特征按照GB/T 4789.14《蠟樣芽胞桿菌檢驗》對來源于我國華北、華東、中南、西南、西北五個不同地區(qū)的區(qū)的238株分離株進行生化分型,能夠進行生化分型的分離株為195株,分別屬于1-13生化型,未發(fā)現(xiàn)14型、15型。其中,以生化1型、2型、3型、8型為主,所占比例分別為28.6%、11.0%、16.4%、10.5%,占檢測菌株的66.5%。其他生化型的菌株數(shù)量較少,均在4.2%以下,占檢測菌株的15.9%。生化型別分布存在明顯的地區(qū)差異,華北地區(qū)主要是1型、2型、3型、8型,華東地區(qū)主要是1型、2型、3型、4型、5型、8型,中南地區(qū)主要是1型、3型,西南地區(qū)主要是1型、2型、8型?梢姼鞯貐^(qū)主要生化型別不一,但均有較集中的4個型別,即生化1,2,3,8型,因此應引起我國重視和密切觀察。2.毒力基因的分布特征本研究采用PCR方法對238株蠟樣芽胞桿菌的嘔吐毒素相關(guān)(NRPS)基因、溶血素BL基因(hblA、hblC和hblD)、非溶血性的腸毒素Nhe基因(nheA、nheB和nheC)、腸毒素FM基因(entFM)、腸毒素T基因(bceT)和細胞毒素K基因(cytK)10種毒力基因進行檢測,結(jié)果發(fā)現(xiàn)毒力基因檢出率由高到低依次為nheC、cytK、hblC、hblA、hblD、bceT、nheB、entFM、nheA、NRPS,檢出率分別為63.9%、50.4%、50.4%、48.7%、41.6%、40.3%、24.8%、23.1%、13.4%、7.1%。nheC、cytK、hblA、hblC、hbl DbceT檢出率均在40.3%以上,是攜帶的主要毒力基因,而nheB、nheA entFM、NRPS基因的檢出率較低。毒力基因型多樣,共有58種毒力基因型,最多攜帶9個毒力基因,未發(fā)現(xiàn)攜帶全部10個毒力基因的菌株,30株(12.6%)未攜帶任何毒力基因;208株(87.4%)至少攜帶1個毒力基因;95株(39.9%)同時檢出溶血素BL的3個基因(hblA、 hblC和hblD),29株(12.2%)同時檢出非溶血性的腸毒素Nhe的3個基因(nheA、nheB和nheC)。我國食源性蠟樣芽胞桿菌毒力基因攜帶率較高,毒力基因型多樣,是造成食源性疾病發(fā)生的重要流行病學因素,對食品安全和公共健康構(gòu)成潛在的威脅。3.主要生化型別的毒力基因分布特征生化1型、2型比3型、8型的菌株hblA、hblC、hblD毒力基因的攜帶率高,而且生化1型、2型同時攜帶溶血素BL 3個基因的比例也較高,達60%以上;生化1型、3型的菌株同時攜帶非溶血性的腸毒素Nhe的3個基因的比例比2型、8型高;entFM、b ceT、cytK毒力基因在生化1型、2型、3型菌株中的檢出率均比在8型中的高;4個主要生化型1型、2型、3型、8型的菌株中至少檢出一個毒力基因的菌株比例均在72.0%以上,說明我國食源性蠟樣芽胞桿菌桿菌的主要生化類型菌株毒力基因攜帶率較高,具有潛在危險性。4.我國食源性蠟樣芽胞桿菌的藥物敏感性采用CLSI推薦的微量肉湯稀釋法對224株食源性蠟樣芽胞桿菌進行藥敏試驗,共選擇氨芐西林、頭孢噻肟、慶大霉素、萬古霉素、紅霉素、四環(huán)素、環(huán)丙沙星、復方新諾明、氯霉素、克林霉素10種抗生素。結(jié)果顯示食源性蠟樣芽胞桿菌對慶大霉素、萬古霉素、環(huán)丙沙星、復方新諾明均100%敏感,對紅霉素、四環(huán)素、氯霉素、克林霉素的敏感率分別為88.8%、90.2%、99.6%、87.1%,對氨芐西林、頭孢噻肟的敏感率僅為0.4%、5.4%。不同地區(qū)的食源性蠟樣芽胞桿菌對抗生素的敏感率沒有明顯差異。不同生化型別的蠟樣芽胞桿菌對紅霉素、克林霉素的敏感性顯示一定的型別差異。
[Abstract]:Bacillus cereus (Bacillus cereus) is a gram positive bacillus, widely distributed in plant and soil environment, is an important foodborne pathogen. Bacillus cereus causes of food poisoning vomiting and diarrhea are divided into two types, type of syndrome type. Vomiting caused by vomiting toxin. For a variety of enterotoxigenic diarrhea type role. This study on the pathogen monitoring network in 2011 submitted 427 suspected strain of Bacillus cereus isolates were identified in our review to confirm the food borne, 238 strains of Bacillus cereus isolates as the research object, the biochemical type, virulence gene distribution, drug sensitivity spectrum of a comprehensive and detailed study, to master our biochemical type of food borne Bacillus cereus, virulence genes and drug sensitive spectrum distribution characteristics, analysis of the epidemiological characteristics, virulence characteristics and pathogenic mechanism, for the assessment of food 铚℃牱鑺借優(yōu)鏉嗚弻姹℃煋鐨勯闄╂彁渚涙妧鏈敮鎸佸拰鏁版嵁,瀵歸闃插拰鎺у埗铚℃牱鑺借優(yōu)鏉嗚弻椋熺墿涓瘨鍜屼繚闅滈鍝佸畨鍏ㄥ叿鏈夐噸瑕佹剰涔,

本文編號:1713169

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