多重?zé)晒舛縋CR法檢測(cè)海產(chǎn)品中副溶血性弧菌、沙門菌和單增李斯特菌
本文選題:海產(chǎn)品 切入點(diǎn):副溶血性弧菌 出處:《中國(guó)食品衛(wèi)生雜志》2016年04期 論文類型:期刊論文
【摘要】:目的建立檢測(cè)海產(chǎn)品中副溶血性弧菌、沙門菌和單增李斯特菌的多重?zé)晒舛縋CR體系。方法針對(duì)副溶血性弧菌tlh基因,沙門菌Ompc基因和單增李斯特菌hly基因設(shè)計(jì)引物和Taq Man探針,建立多重?zé)晒舛縋CR體系,進(jìn)行特異性與敏感性研究;利用該體系檢測(cè)海產(chǎn)品中的副溶血性弧菌、沙門菌和單增李斯特菌。結(jié)果副溶血性弧菌、沙門菌和單增李斯特菌可得到特異性擴(kuò)增,而共存于海產(chǎn)品中的其他細(xì)菌均未見擴(kuò)增曲線。敏感性試驗(yàn)顯示,該體系對(duì)副溶血性弧菌、沙門菌和單增李斯特菌的最低檢測(cè)限分別為72、40、80 cfu/ml。對(duì)舟山采集的150份樣品進(jìn)行檢測(cè),檢出32份副溶血性弧菌、11份沙門菌、5份單增李斯特菌,與國(guó)標(biāo)法檢測(cè)結(jié)果一致。結(jié)論本研究建立的基于Taq Man探針的多重?zé)晒舛縋CR檢測(cè)方法可以特異、靈敏、簡(jiǎn)單快速地實(shí)現(xiàn)對(duì)海產(chǎn)品中副溶血性弧菌、沙門菌和單增李斯特菌的檢測(cè)。
[Abstract]:Objective to establish a multiplex fluorescence quantitative PCR system for the detection of Vibrio parahaemolyticus Salmonella and Listeria monocytogenes in marine products. Ompc gene of Salmonella monocytogenes and hly gene of Listeria monocytogenes were designed with primers and Taq Man probes to establish a multiplex fluorescent quantitative PCR system to study the specificity and sensitivity of Vibrio parahaemolyticus in seafood. Results specific amplification of Vibrio parahaemolyticus, Salmonella and Listeria monocytogenes was obtained, but no expansion curve was found in other bacteria coexisting in seafood. The minimum detection limit for Vibrio parahaemolyticus, Salmonella and Listeria monocytogenes was 724080cfur / ml, respectively. 150 samples collected from Zhoushan were detected, and 32 strains of Vibrio parahaemolyticus (Vibrio parahaemolyticus), 11 samples of Salmonella, 5 strains of Listeria monocytogenes were detected. Conclusion the multiplex fluorescence quantitative PCR method based on Taq Man probe can be used to detect Vibrio parahaemolyticus in marine products. Detection of Salmonella and Listeria monocytogenes.
【作者單位】: 舟山出入境檢驗(yàn)檢疫局;浙江海洋學(xué)院;
【基金】:浙江省分析測(cè)試科技計(jì)劃項(xiàng)目(2014C38108)
【分類號(hào)】:R155.5
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,本文編號(hào):1646103
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