本文關(guān)鍵詞： 腸道沙門氏菌 腸炎沙門氏菌 TaqMan探針 雙重熒光PCR 檢測 食品　出處：《現(xiàn)代食品科技》2017年01期 　論文類型：期刊論文

【摘要】：建立基于TaqMan探針雙重重實時熒光PCR檢測腸道沙門氏菌(Salmonella enterica,SP)和腸炎沙門氏菌(Salmonella Enteritidis,SE)的方法。根據(jù)SP的aceA基因(Gen Bank:U43344.1)、腸炎沙門氏菌特異序列SEP(GenBank:AF370707.1),分別設計引物和探針,在ace A探針的5′端標記FAM和SEP探針的5′端標記VIC,建立基于TaqMan探針雙重熒光PCR檢測方法。試驗結(jié)果,58株29種不同血清型腸道沙門氏菌均擴增出ace A基因擴增曲線,SEP特異性地擴增出15株SE,而28種不同血清型沙門氏菌和17株變形桿菌等陰性對照株擴增結(jié)果均為陰性。ace A和SEP的雙重熒光PCR擴增效率分別為100%和104%,R2分別為0.999和0.998,最低檢測濃度分別達到280 cfu/m L和260 cfu/m L。建立的方法特異性好、靈敏度高,整個試驗可在31 h完成,是快速檢測SP和SE的有效方法,可用于食品中SP和SE的特異性檢測。
[Abstract]:A method was established for the detection of Salmonella enterica) and Salmonella enteritidisse based on TaqMan probes. According to the aceA gene of SP, GenBank: U43344.1, and the specific sequence of Salmonella entericum AF370707.1, the primers and probes were designed, respectively, for the detection of Salmonella entericum and Salmonella enterica. A double fluorescent PCR detection method based on the 5 'end labeling of FAM with ace A probe and the 5' end labeling of SEP probe with SEP probe was established. The results showed that the amplification curve of ace A gene was obtained from 58 strains of 58 strains of Salmonella enteri of different serotypes. Fifteen SES strains were specifically amplified, and 28 strains of salmonella serotype and 17 strains of Proteus negative control strains were amplified by double fluorescence PCR amplification efficiency of negative. Aace A and SEP were 100% and 104R ~ 2 were 0.999 and 0.998, respectively. The low detection concentration reached 280 cfu/m / L and 260 cfu/m / L, respectively. The whole test can be completed in 31 hours. It is an effective method for rapid detection of SP and SE, and can be used for the specific detection of SP and SE in food.
【作者單位】： 廣東出入境檢驗檢疫局檢驗檢疫技術(shù)中心;黃埔出入境檢驗檢疫局;遼寧出入境檢驗檢疫局;
【基金】：廣東省科技項目計劃(2013B040402004)
【分類號】：R155.5

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本文編號：1532417