本文關(guān)鍵詞： 腸道沙門氏菌 腸炎沙門氏菌 TaqMan探針 雙重?zé)晒釶CR 檢測(cè) 食品　出處：《現(xiàn)代食品科技》2017年01期 　論文類型：期刊論文

【摘要】：建立基于TaqMan探針雙重重實(shí)時(shí)熒光PCR檢測(cè)腸道沙門氏菌(Salmonella enterica,SP)和腸炎沙門氏菌(Salmonella Enteritidis,SE)的方法。根據(jù)SP的aceA基因(Gen Bank:U43344.1)、腸炎沙門氏菌特異序列SEP(GenBank:AF370707.1),分別設(shè)計(jì)引物和探針,在ace A探針的5′端標(biāo)記FAM和SEP探針的5′端標(biāo)記VIC,建立基于TaqMan探針雙重?zé)晒釶CR檢測(cè)方法。試驗(yàn)結(jié)果,58株29種不同血清型腸道沙門氏菌均擴(kuò)增出ace A基因擴(kuò)增曲線,SEP特異性地?cái)U(kuò)增出15株SE,而28種不同血清型沙門氏菌和17株變形桿菌等陰性對(duì)照株擴(kuò)增結(jié)果均為陰性。ace A和SEP的雙重?zé)晒釶CR擴(kuò)增效率分別為100%和104%,R2分別為0.999和0.998,最低檢測(cè)濃度分別達(dá)到280 cfu/m L和260 cfu/m L。建立的方法特異性好、靈敏度高,整個(gè)試驗(yàn)可在31 h完成,是快速檢測(cè)SP和SE的有效方法,可用于食品中SP和SE的特異性檢測(cè)。
[Abstract]:A method was established for the detection of Salmonella enterica) and Salmonella enteritidisse based on TaqMan probes. According to the aceA gene of SP, GenBank: U43344.1, and the specific sequence of Salmonella entericum AF370707.1, the primers and probes were designed, respectively, for the detection of Salmonella entericum and Salmonella enterica. A double fluorescent PCR detection method based on the 5 'end labeling of FAM with ace A probe and the 5' end labeling of SEP probe with SEP probe was established. The results showed that the amplification curve of ace A gene was obtained from 58 strains of 58 strains of Salmonella enteri of different serotypes. Fifteen SES strains were specifically amplified, and 28 strains of salmonella serotype and 17 strains of Proteus negative control strains were amplified by double fluorescence PCR amplification efficiency of negative. Aace A and SEP were 100% and 104R ~ 2 were 0.999 and 0.998, respectively. The low detection concentration reached 280 cfu/m / L and 260 cfu/m / L, respectively. The whole test can be completed in 31 hours. It is an effective method for rapid detection of SP and SE, and can be used for the specific detection of SP and SE in food.
【作者單位】： 廣東出入境檢驗(yàn)檢疫局檢驗(yàn)檢疫技術(shù)中心;黃埔出入境檢驗(yàn)檢疫局;遼寧出入境檢驗(yàn)檢疫局;
【基金】：廣東省科技項(xiàng)目計(jì)劃(2013B040402004)
【分類號(hào)】：R155.5

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前5條

1 周慧;梁宇斌;吳蘇喜;李曉明;裴偉;楊濤;;TaqMan探針熒光定量PCR檢測(cè)花生油中摻入棕櫚油的研究[J];中國(guó)油脂;2011年08期

2 邵美麗;許巖;劉思國(guó);趙燕麗;孔保華;;TaqMan探針實(shí)時(shí)定量PCR檢測(cè)肉中金黃色葡萄球菌的研究[J];食品工業(yè);2013年03期

3 蔡慧農(nóng),劉光明,蘇文金,王璋;TaqMan探針用于轉(zhuǎn)基因食品的熒光定量PCR檢測(cè)[J];食品與發(fā)酵工業(yè);2003年12期

4 何瑋玲;胡序建;程欣;黃明;周光宏;;含有擴(kuò)增內(nèi)標(biāo)的食品中豬肉和雞肉成分Taqman探針實(shí)時(shí)熒光PCR檢測(cè)方法的建立[J];中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué);2013年21期

5 ;[J];;年期

相關(guān)會(huì)議論文 前6條

1 邵秀玲;甘琴華;厲艷;吳興海;趙文軍;胡白石;;利用TaqMan探針實(shí)時(shí)熒光PCR方法檢測(cè)郁金香黃色皰斑病菌[A];中國(guó)植物病理學(xué)會(huì)2012年學(xué)術(shù)年會(huì)論文集[C];2012年

2 宋修慶;高宏雷;王曉燕;林歡;宇文延青;王永強(qiáng);王笑梅;;雞貧血病毒TaqMan探針熒光定量PCR檢測(cè)方法的建立[A];中國(guó)畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì)畜牧獸醫(yī)生物技術(shù)學(xué)分會(huì)暨中國(guó)免疫學(xué)會(huì)獸醫(yī)免疫分會(huì)第七次研討會(huì)論文集[C];2008年

3 張?zhí)?凌宗帥;趙立娜;孫濤;徐彪;梁成珠;劉文鵬;孫軍;張藝兵;;基于TaqMan探針的牛布氏桿菌實(shí)時(shí)熒光定量PCR的特異性鑒定[A];第3屆全國(guó)人畜共患病學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2011年

4 趙文軍;廖曉蘭;夏明星;朱水芳;;TaqMan探針在水稻白葉枯病菌檢測(cè)中的應(yīng)用[A];中國(guó)植物病理學(xué)會(huì)2004年學(xué)術(shù)年會(huì)論文集[C];2004年

5 張?zhí)?凌宗帥;趙立娜;孫濤;徐彪;梁成珠;劉文鵬;孫軍;張藝兵;;基于TaqMan探針的牛布氏桿菌實(shí)時(shí)熒光定量PCR的特異性鑒定[A];2012年中國(guó)畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì)獸醫(yī)病理學(xué)分會(huì)暨中國(guó)病理生理學(xué)會(huì)動(dòng)物病理生理專業(yè)委員會(huì)學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2012年

6 任偉成;王崇明;;TaqMan探針熒光定量PCR檢測(cè)櫛孔扇貝急性病毒性壞死病毒方法的建立和應(yīng)用[A];2008年中國(guó)水產(chǎn)學(xué)會(huì)學(xué)術(shù)年會(huì)論文摘要集[C];2008年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前2條

1 李紅霞;Taqman探針的合成及黃瓜綠斑駁花葉病毒RTF-PCR檢測(cè)方法的建立[D];北京化工大學(xué);2007年

2 羅欣;法洛氏四聯(lián)癥患者心臟miRNA表達(dá)分析及通用TaqMan探針檢測(cè)miRNA方法的建立和應(yīng)用[D];復(fù)旦大學(xué);2011年

，

本文編號(hào)：1532417