發(fā)布時間：2018-01-28 17:01

  本文關(guān)鍵詞： 錳 對氨基水楊酸鈉 大鼠 丘腦 星形膠質(zhì)細胞 氨基酸類神經(jīng)遞質(zhì)　出處：《廣西醫(yī)科大學(xué)》2016年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

【摘要】：目的 研究錳處理對原代培養(yǎng)大鼠丘腦星形膠質(zhì)細胞損傷及谷氨酸(Glu)、谷氨酰胺(Gln)和甘氨酸(Gly)、γ-氨基丁酸(GABA)和谷氨酰胺酶(GS)活力的影響及對氨基水楊酸鈉(PAS-Na)的防護作用。方法 (1)原代培養(yǎng)的丘腦星形膠質(zhì)細胞經(jīng)過純化和鑒定后,①錳毒性試驗,分別經(jīng)0、125、250、500、1000μmol/L MnCl2單獨作用6h、12h、24h和48h。② PAS-一a無毒性篩選試驗,單獨給予0、50、150、450和1350 μmol/L PAS-Na單獨作用6h、12h、24h和48h,AS-Na干預(yù)劑量篩選實驗,丘腦星形膠質(zhì)細胞被隨機分為正常對照組(對照組)、500Mn、500Mn+50 PAS-Na、500Mn+150PAS-Na、500Mn+450PAS-Na和500Mn+1350PAS-Na干預(yù)組。對照組星形膠質(zhì)細胞用普通培養(yǎng)液培養(yǎng)48h；染錳組、500Mn+50PAS-Na、 500Mn+150PAS-Na、500Mn+450PAS-Na和500Mn+1350PAS-Na干預(yù)組星形膠質(zhì)細胞暴露于MnCl2500μmol/L培養(yǎng)液培養(yǎng)48h。隨后,吸出舊培養(yǎng)液,500 Mn+50PAS-Na、500Mn+150PAS-Na、500Mn+450PAS-Na和500Mn+1350PAS-Na干預(yù)組分別用含PAS-Na 50、150、450、1350μol/L的培養(yǎng)液培養(yǎng)6h、12h、24h和48h。用CCK8法和LDH測定試劑盒測定細胞存活率及乳酸脫氫酶(LDH)漏出率。選擇合適的Mn處理及PAS-Na干預(yù)劑量和時間。(2)用高效液相色譜(HPLC)和GS試劑盒測定原代培養(yǎng)的星形膠質(zhì)細胞Glu、Gln、Gly、GABA和GS的活性。原代培養(yǎng)的丘腦星型膠質(zhì)細胞被隨機分為對照組、500Mn組、50PAS對照組、150PAS對照組、450PAS對照組、500Mn+50PAS組、500Mn+150PAS組、500Mn+450PAS組。對照組、50PAS對照組、150PAS對照組、450PAS對照組細胞給予普通培養(yǎng)液培養(yǎng)48小時；500Mn組、500Mn+50PAS組、500Mn+150PAS組、500Mn+450PAS組細胞暴露于MnCl2500μmol/L培養(yǎng)液培養(yǎng)48小時。吸出舊培養(yǎng)液后。50PAS對照組、150PAS對照組、450PAS對照組、500Mn+50PAS組、500Mn+150PAS組、500Mn+450PAS組分別給予含PAS-Na 50、150和450μmol/L的培養(yǎng)液培養(yǎng)24小時。其余各組用普通培養(yǎng)液培養(yǎng)24小時。結(jié)果 (1)細胞存活率檢測結(jié)果顯示：①錳毒性試驗中,與對照組比較,除了125μmol/L MnCl2處理6h組,其他組丘腦星形膠質(zhì)細胞存活率下降,有一定的時間和劑量反應(yīng)趨勢(P0.05)；②在PAS-Na無毒濃度篩選實驗中,與對照組比較,1350μmol/L PAS-Na處理48h組丘腦星形膠質(zhì)細胞存活率降低(P0.05)；其他各劑量處理組在不同時間的細胞存活率無明顯變化(P0.05)。③ PAS-Na干預(yù)劑量篩選實驗中,與對照組比較,500μmol/L MnCl2組星形膠質(zhì)細胞存活率降低(P0.05);50、150、450 μmol/L PAS-Na干預(yù)24h和48h后,星形膠質(zhì)細胞存活率均顯著升高(P0.05),但無時間效應(yīng)關(guān)系。(2)細胞LDH漏出率結(jié)果顯示：①錳毒性試驗中,與對照組比較,250、500和1000μmol/L MnCl224h處理組和125～1000μmol/L MnCl248h處理組星形膠質(zhì)細胞LDH漏出率升高,具有一定的時間/劑量反應(yīng)關(guān)系(P0.05)；②在PAS-Na無毒濃度篩選實驗中,PAS-Na單獨作用于星形膠質(zhì)細胞48小時后,1350μmol/L組星形膠質(zhì)細胞LDH漏出率升高(P0.05)；其他各劑量處理組在不同時間的細胞LDH漏出率無明顯改變(P0.05)。③PAS-Na干預(yù)劑量篩選實驗中,與對照組比較,500 μmol/L MnCl2組LDH漏出率明顯升高(P0.05);150、450、1350μmol/L PAS-Na干預(yù)24h和50、150、450、1350μmol/L PAS-Na干預(yù)48小時使細胞LDH漏出率降低(P0.05)；與對照組比較,50、150、450、1350μmol/L PAS-Na對照組(24和48小時)細胞LDH漏出率未見明顯變化。故在后續(xù)實驗中,我們選擇500μmol/L MnCl2和48h作為錳處理的劑量和時間。同時,我們選擇50、150、450μmol/L PAS-Na干預(yù)24h,作為干預(yù)劑量和時間。(3) HPLC和GS試劑盒結(jié)果顯示：與對照組比較,染錳(500μmol/L) 48小時組丘腦星形膠質(zhì)細胞內(nèi)Gln和GABA含量降低,GS活性降低,Glu和Gly含量升高(P0.05)；500Mn組丘腦星形膠質(zhì)細胞外液Glu和Gly含量比對照組高,Gln含量比對照組高(P0.05),而GABA含量沒有顯著變化(P0.05)；與500Mn組比較,500Mn+450PAS組細胞內(nèi)和500Mn+150PAS、 500Mn+450PAS細胞外Glu含量降低,500Mn+450PAS組細胞內(nèi)和500Mn+50PAS、500Mn+150PAS、500Mn+450PAS組細胞外Gln含量升高,500Mn+150PAS、500Mn+450 PAS組細胞內(nèi)Gly降低,500Mn+150PAS、 500Mn+450 PAS組細胞內(nèi)GABA含量升高(P0.05)。500Mn組GS活性比對照組低；與500Mn組比較,500Mn+450 PAS組GS活性升高。結(jié)論體外實驗中,錳處理會對原代培養(yǎng)的大鼠丘腦星形膠質(zhì)細胞造成損傷,導(dǎo)致Glu、Gln、Gly、GABA及GS活性異常改變。PAS-Na對錳導(dǎo)致丘腦星形膠質(zhì)細胞毒性、Glu、Gln、Gly、GABA含量及GS活性改變具有干預(yù)作用。
[Abstract]:Objective To investigate the effects of manganese treatment on astrocytes and glutamate ( Glu ) , glutamine ( Gln ) and glycine ( Gly ) , 緯 - aminobutyric acid ( GABA ) and glutamine ( GS ) activity in primary cultured rat astrocytes . The results showed that the cultured astrocytes were randomly divided into normal control group ( control group ) , 500Mn + 50PAS - Na , 500Mn + 150PAS - Na , 500Mn + 450PAS - Na and 500Mn + 1350PAS - Na intervention group . The cells were randomly divided into normal control group ( control group ) , 500Mn + 50PAS - Na , 500Mn + 150PAS - Na , 500Mn + 450PAS - Na and 500Mn + 1350PAS - Na intervention group . Results ( 1 ) The survival rate of astrocytes in 50PAS control group , 500Mn + 50PAS group , 500Mn + 150PAS group , 500Mn + 450PAS group , 500Mn + 150PAS group , 500Mn + 450PAS group , 500Mn + 150PAS group , 500Mn + 450PAS group were decreased ( P0.05 ) . ( 2 ) The results showed that the LDH leakage rate of astrocytes in the treated group was higher than that in the control group ( P0.05 ) . Compared with control group , the content of Glu and Gly decreased , Glu and Gly contents of 500Mn + 150PAS , 500Mn + 450 PAS group were higher than those in control group ( P0.05 ) .

【學(xué)位授予單位】：廣西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R114

【相似文獻】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 項紅兵,田玉科;星形膠質(zhì)細胞與疼痛敏化調(diào)控[J];臨床麻醉學(xué)雜志;2003年09期

2 劉慧,王小軍,胡榮,楊忠,蔡文琴;星形膠質(zhì)細胞[J];生理科學(xué)進展;2004年01期

3 張敬軍;;星形膠質(zhì)細胞的研究[J];中國藥理學(xué)通報;2006年07期

4 陳彬;劉寬;王偉;;成年大鼠神經(jīng)元和星形膠質(zhì)細胞細胞周期蛋白依賴性激酶抑制因子表達的差異研究[J];卒中與神經(jīng)疾病;2007年05期

5 沈維高;何欣;王振江;;星形膠質(zhì)細胞的生物學(xué)功能及其與疾病的關(guān)系研究進展[J];北華大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版);2008年06期

6 ;英國科學(xué)家確定星形膠質(zhì)細胞新功能[J];中國當代醫(yī)藥;2010年27期

7 靳哲;趙忠新;;星形膠質(zhì)細胞在癲癇發(fā)病中的作用研究[J];世界臨床藥物;2012年01期

8 李軍杰,張致身;短暫性腦缺血發(fā)作后海馬區(qū)星形膠質(zhì)細胞形態(tài)學(xué)研究[J];首都醫(yī)科大學(xué)學(xué)報;1998年04期

9 解旭東,田國紅;星形膠質(zhì)細胞與癲癇[J];中風與神經(jīng)疾病雜志;1999年01期

10 莫永炎,姜勇,陳瑗;腦星形膠質(zhì)細胞生物學(xué)功能研究進展[J];生理科學(xué)進展;2002年01期

相關(guān)會議論文 前10條

1 劉慶瑩;趙珠峰;朱長庚;;星形膠質(zhì)細胞在癲癇復(fù)發(fā)中的作用[A];解剖學(xué)雜志——中國解剖學(xué)會2002年年會文摘匯編[C];2002年

2 唐愛輝;王同飛;王世強;;星形膠質(zhì)細胞鈣活動:腦細胞網(wǎng)絡(luò)中的第二興奮系統(tǒng)?[A];中國神經(jīng)科學(xué)學(xué)會第六屆學(xué)術(shù)會議暨學(xué)會成立十周年慶祝大會論文摘要匯編[C];2005年

3 池美珠;陳超;錢燕;李劍敏;吳步猛;;產(chǎn)前重復(fù)激素治療對星形膠質(zhì)細胞發(fā)育的影響[A];浙江省圍產(chǎn)醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2005年

4 魏爾清;;半胱氨酰白三烯受體對星形膠質(zhì)細胞功能的調(diào)節(jié)作用[A];中國藥理學(xué)會第九次全國會員代表大會暨全國藥理學(xué)術(shù)會議論文集[C];2007年

5 吳建云;王鮮忠;王劍;諶劍波;范光麗;張家驊;;大腦皮質(zhì)星形膠質(zhì)細胞培養(yǎng)及鑒定[A];中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會動物解剖學(xué)及組織胚胎學(xué)分會第十五次學(xué)術(shù)研討會論文集[C];2008年

6 趙玉武;程曉娟;;星形膠質(zhì)細胞與腦水腫的形成[A];山東省2013年神經(jīng)內(nèi)科學(xué)學(xué)術(shù)會議暨中國神經(jīng)免疫大會2013論文匯編[C];2013年

7 董其平;柴真;;谷氨酸對培養(yǎng)的星形膠質(zhì)細胞的鈣活動的影響[A];“基因、進化與生理功能多樣性”海內(nèi)外學(xué)術(shù)研討會暨中國生理學(xué)會第七屆比較生理學(xué)學(xué)術(shù)會議論文摘要[C];2009年

8 曾俊;李康生;;柯薩奇病毒感染星形膠質(zhì)細胞及細胞因子變化研究[A];新發(fā)和再發(fā)傳染病防治熱點研討會論文集[C];2010年

9 鮑歡;徐曉云;顧曉波;徐霞紅;胡暉;;缺氧后水通道蛋白4在體外培養(yǎng)星形膠質(zhì)細胞表達變化的實驗研究[A];中華醫(yī)學(xué)會第十三次全國神經(jīng)病學(xué)學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2010年

10 熊加祥;白云;宋敏;王艷艷;楊曉亞;;星形膠質(zhì)細胞表達免疫分子維持大腦免疫穩(wěn)態(tài)[A];中國神經(jīng)科學(xué)學(xué)會第六屆學(xué)術(shù)會議暨學(xué)會成立十周年慶祝大會論文摘要匯編[C];2005年

相關(guān)重要報紙文章 前7條

1 記者 胡德榮;星形膠質(zhì)細胞由“天使”變“魔鬼”原因找到[N];健康報;2012年

2 記者 劉海英;星形膠質(zhì)細胞可調(diào)節(jié)呼吸強度[N];科技日報;2010年

3 劉霞;腦內(nèi)星形膠質(zhì)細胞在實驗室培育成功[N];科技日報;2011年

4 汪敏華;大腦星形膠質(zhì)細胞有兩種新功能[N];解放日報;2003年

5 吳一福;黃芪可調(diào)節(jié)星形膠質(zhì)細胞“時間模式”[N];中國醫(yī)藥報;2005年

6 南方日報記者 曹斯　實習(xí)生 趙莞 張寧 通訊員 鄒瑩 張淼;用ATP對抗不快樂[N];南方日報;2013年

7 記者 班瑋;德國腦細胞再生研究取得新進展[N];人民日報;2010年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前10條

1 曾招;離子通道TRPM7調(diào)節(jié)細胞生理的分子機制研究[D];蘇州大學(xué);2014年

2 黃維一;骨髓間充質(zhì)干細胞旁分泌因子對缺血性腦卒中后星形膠質(zhì)細胞活性及功能的影響[D];南方醫(yī)科大學(xué);2015年

3 楊俊華;星形膠質(zhì)細胞來源的ATP促進丘腦中的突觸刪除[D];浙江大學(xué);2015年

4 鄧雅婷;龍膽苦苷鎮(zhèn)痛與抗抑郁的中樞作用及機制研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2015年

5 李新;星形膠質(zhì)細胞NDRG2在七氟烷預(yù)處理神經(jīng)保護作用中的機制研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2015年

6 鐘志宏;亞鐵離子對星形膠質(zhì)細胞的損傷作用及香芹酚在實驗性腦出血中的神經(jīng)保護作用[D];上海交通大學(xué);2014年

7 張建成;星形膠質(zhì)細胞來源的IL-17A對缺血性腦卒中神經(jīng)再生和功能恢復(fù)的影響及機制研究[D];華中科技大學(xué);2015年

8 洪洋;孕酮對Aβ所致星形膠質(zhì)細胞炎癥反應(yīng)的調(diào)節(jié)作用及機制研究[D];河北醫(yī)科大學(xué);2016年

9 凌云志;帕瑞昔布減輕過氧化氫誘導(dǎo)的大鼠星形膠質(zhì)細胞氧化應(yīng)激損傷的作用及機制研究[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2015年

10 徐進;腦出血后星形膠質(zhì)細胞AQP4內(nèi)化及其機制的研究[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2015年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 張麗麗;脂肪基質(zhì)細胞誘導(dǎo)分化為星形膠質(zhì)細胞過程中線粒體凋亡與自噬的關(guān)系[D];河北聯(lián)合大學(xué);2014年

2 劉峻崎;三種中藥有效成分調(diào)控中風后星形膠質(zhì)細胞的作用及其機制[D];北京中醫(yī)藥大學(xué);2016年

3 黃夢之;星形膠質(zhì)細胞對內(nèi)側(cè)膝狀體神經(jīng)元聽反應(yīng)電活動的影響[D];杭州師范大學(xué);2016年

4 楊茜;TRIF信號在原代星形膠質(zhì)細胞炎癥因子釋放中的作用及機制[D];成都醫(yī)學(xué)院;2016年

5 吳思思;全麻藥物對大鼠外側(cè)前額葉皮層星形膠質(zhì)細胞突觸調(diào)控的影響[D];遵義醫(yī)學(xué)院;2016年

6 謝禮瑋;全麻藥物對培養(yǎng)大鼠皮層星形膠質(zhì)細胞興奮性和遞質(zhì)釋放的影響[D];遵義醫(yī)學(xué)院;2016年

7 何雯;小花棘豆中苦馬豆素對羊的毒性作用及大鼠星形膠質(zhì)細胞影響的研究[D];塔里木大學(xué);2016年

8 裴海霞;TREK-1過表達與脈絡(luò)寧注射液對氧糖剝奪星形膠質(zhì)細胞及其谷氨酸代謝的作用[D];蘭州大學(xué);2016年

9 古玉梅;淫羊藿苷對實驗性自身免疫性腦脊髓炎（EAE）小鼠星形膠質(zhì)細胞及軸突的影響[D];廣東藥科大學(xué);2016年

10 李良娟;MAPK-COX路徑在GnRH調(diào)節(jié)星形膠質(zhì)細胞PGE2表達中的作用[D];西南大學(xué);2016年

，

本文編號：1471063