本文關(guān)鍵詞： 氯乙烯(VC) RASSFA DNA甲基化 mRNA表達　出處：《毒理學雜志》2017年01期 　論文類型：期刊論文

【摘要】：目的通過檢測氯乙烯(VC)染毒大鼠肝細胞RASSF1A基因啟動子區(qū)甲基化的水平及mRNA的表達量,探討RASSF1A基因在氯乙烯致癌過程中的表觀遺傳機制。方法選取96只健康雄性SD大鼠,隨機分為4組:陰性對照組(0mg/kg)和低劑量(5 mg/kg)、中劑量(25 mg/kg)、高劑量(125 mg/kg)3個氯乙烯染毒組。腹腔注射,隔日染毒,每周3次。每組分別于6、8和12周隨機處死8只,取其肝臟。采用甲基化特異性實時熒光定量(QMSP)檢測大鼠肝細胞RASSF1A基因啟動子區(qū)甲基化的水平,采取實時熒光定量(QPCR)測定RASSF1A mRNA表達量的改變。結(jié)果染毒6周時,RASSF1A基因啟動子區(qū)甲基化水平各組間無明顯變化,差異無統(tǒng)計學意義(P0.05);但RASSF1A mRNA的表達量隨著劑量的增加而升高,且高劑量組、中劑量組與對照組相比,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)。染毒8周時,RASSF1A基因啟動子區(qū)甲基化水平和mRNA的表達量在各組間差異無統(tǒng)計學意義(P0.05)。染毒12周時,RASSF1A基因啟動子區(qū)甲基化水平隨著染毒劑量的增加而明顯升高,高劑量組與其他各組相比,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05);mRNA的表達量隨著染毒劑量的增加而出現(xiàn)下降,且對照組和低劑量組與高劑量組相比,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)。此外,在高劑量組中,8周時RASSF1A啟動子區(qū)甲基化水平較6周時低,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05),而12周時啟動子區(qū)甲基化水平較6周時高,且差異有統(tǒng)計學意義(P0.05);mRNA表達量隨著染毒時間的延長而下降,且8和12周mRNA表達量與6周時相比,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05),在其余各組中,不同染毒時間下RASSF1A甲基化水平及mRNA表達量均未出現(xiàn)統(tǒng)計學差異(P0.05)。結(jié)論氯乙烯長期染毒可致大鼠肝細胞RASSF1A基因啟動子區(qū)甲基化水平的升高,并引起其mRNA的表達量下降,可能參與氯乙烯致癌的表觀遺傳機制。
[Abstract]:Objective to detect the methylation level of RASSF1A gene promoter and the expression of mRNA in rat hepatocytes exposed to vinyl chloride (VC). To explore the epigenetic mechanism of RASSF1A gene in carcinogenesis of vinyl chloride. Methods 96 healthy male SD rats were selected. They were randomly divided into 4 groups: negative control group (0 mg / kg), low dose (5 mg / kg) and middle dose (25 mg / kg). High dose of 125mg / kg vinyl chloride was injected intraperitoneally three times a week. Eight rats were randomly killed in each group at 6 weeks and 12 weeks respectively. The methylation of the promoter region of RASSF1A gene in rat hepatocytes was detected by methylation specific real-time fluorescence quantitative quantitation (QMSPs). The expression of RASSF1A mRNA was measured by real-time fluorescence quantitative PCR. Results there was no significant change in methylation level of promoter region of RASSF1A gene at 6 weeks after exposure. The difference was not statistically significant (P 0.05). However, the expression of RASSF1A mRNA increased with the increase of dose, and the difference between the high dose group and the control group was statistically significant at 8 weeks after exposure. There was no significant difference in the methylation level of RASSF1A promoter region and the expression of mRNA among the groups. The methylation level of the promoter region of RASSF1A gene increased with the increase of exposure dose, and the difference between the high dose group and other groups was statistically significant (P 0.05). The expression of mRNA decreased with the increase of the exposure dose, and the difference between the control group and the low dose group was statistically significant compared with the high dose group (P 0.05). In addition, in the high dose group, there was a significant difference between the two groups. The methylation level of RASSF1A promoter at week 8 was lower than that at week 6, the difference was statistically significant (P 0.05), but the level of methylation in promoter region at week 12 was higher than that at week 6. The difference was statistically significant (P 0.05). The expression of mRNA decreased with the prolongation of exposure time, and the expression of mRNA at 8 and 12 weeks was significantly higher than that at 6 weeks (P 0.05). There was no significant difference in RASSF1A methylation level and mRNA expression under different exposure time (P0.05). Conclusion chronic exposure to vinyl chloride can increase the methylation level of RASSF1A gene promoter in rat hepatocytes. It may be involved in the epigenetic mechanism of carcinogenesis of vinyl chloride.
【作者單位】： 山西醫(yī)科大學公共衛(wèi)生學院衛(wèi)生毒理教研室;
【基金】：山西省基礎研究計劃項目(2013011059-1) 山西省回國留學人員科研資助項目(2016-056)
【分類號】：R114
【正文快照】： 氯乙烯(Vinyl chloride,VC)是工業(yè)生產(chǎn)聚氯乙烯(江蘇溥博生物科技有限公司)。(PVC)的單體原料,2013年我國聚氯乙烯年產(chǎn)量達1動物天平(意歐儀器儀表有限公司),Line Gene529.54萬噸,年均增長率達6.4%,成為世界第一大生9660熒光定量儀(杭州博日科技有限公司),Little產(chǎn)國和第一大

【參考文獻】

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【共引文獻】

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本文編號：1451441