本文關(guān)鍵詞：黃酒多酚對同型半胱氨酸誘導(dǎo)的血管平滑肌細胞增殖和遷移的影響及其機制研究

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【摘要】：目的驗證黃酒多酚(YWPC)是否具有抑制同型半胱氨酸(Hcy)誘導(dǎo)的大鼠血管平滑肌細胞(VSMCs)增殖和遷移的作用以及其產(chǎn)生作用的信號通路。方法采用組織貼塊法培育SD大鼠胸主動脈VSMCs,取第4~7代細胞用于實驗。細胞分為5組,分別為對照組,Hcy組(500μmol/L Hcy),YWPC 1 mg/L組(500μmol/L Hcy+1 mg/L YWPC),YWPC 10 mg/L組(500μmol/L Hcy+10 mg/L YWPC),YWPC 100 mg/L組(500μmol/L Hcy+100mg/L YWPC)。采用MTT法檢測VSMCs增殖情況;細胞劃痕實驗和Transwell法檢測VSMCs遷移和侵襲情況;Western blotting法檢測p-AKT/AKT表達情況。為驗證YWPC是否經(jīng)Pi3K/AKT通路發(fā)揮抑制VSMCs的增殖和遷移,分別加入LY-294002和胰島素生長因子1(IGF-1)用來抑制和激活Pi3K/AKT通路,細胞被分為Hcy組,YWPC組,LY-294002+Hcy組,LY-294002+YWPC組;Hcy組,YWPC組,IGF-1+Hcy組,IGF-1+YWPC組,再分別采用上述方法檢測VSMCs增殖、遷移和侵襲情況。結(jié)果培養(yǎng)大鼠胸主動脈VSMCs,2周左右細胞融合可以傳代,經(jīng)SM-actin細胞免疫熒光鑒定及DAPI核染,確定細胞純度在99%以上。24、48 h時,5組OD值比較,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(F=52.575,P=0.016;F=83.756,P=0.014);其中Hcy組OD值高于對照組和YWPC組,且與YWPC呈劑量依賴性(P0.05)。24、48、72、96 h時,5組VSMCs遷移面積比較,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);其中Hcy組VSMCs遷移面積多于對照組(P0.05);YWPC組VSMCs遷移面積低于Hcy組,且與YWPC呈劑量依賴性(P0.05)。48 h時,5組遷移細胞數(shù)比較,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(F=79.354,P=0.001);其中Hcy組穿透Transwell膜細胞數(shù)高于對照組(P0.05);YWPC組穿透Transwell膜細胞數(shù)低于Hcy組,且與YWPC呈劑量依賴性(P0.05)。5組p-AKT/AKT比較,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(F=56.723,P=0.002);其中Hcy組p-AKT/AKT高于對照組(P0.05);YWPC組p-AKT/AKT低于Hcy組,且與YWPC呈劑量依賴性(P0.05)。加入LY-294002:24 h時,各組OD值、VSMCs遷移面積比較,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(F=46.875,P=0.004;F=67.723,P=0.002);其中LY-294002+Hcy組OD值、VSMCs遷移面積低于Hcy組(P0.05);LY-294002+Hcy組與LY-294002+YWPC組OD值、VSMCs遷移面積比較,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。48 h時,各組VSMCs穿透Transwell膜細胞數(shù)、p-AKT/AKT比較,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(F=52.904,P=0.003;F=87.904,P=0.001);其中LY-294002+Hcy組VSMCs穿透Transwell膜細胞數(shù)、p-AKT/AKT低于Hcy組(P0.05);LY-294002+Hcy組與LY-294002+YWPC組VSMCs穿透Transwell膜細胞數(shù)、p-AKT/AKT比較,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。加入IGF-1:24 h時,各組OD值、VSMCs遷移面積比較,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(F=48.052,P=0.007;F=63.085,P=0.002);其中IGF-1+YWPC組OD值、VSMCs遷移面積高于YWPC組(P0.05);IGF-1+Hcy組與IGF-1+YWPC組OD值、VSMCs遷移面積比較,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。48 h時,各組VSMCs穿透Transwell膜細胞數(shù)、p-AKT/AKT比較,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(F=55.941,P=0.008;F=65.011,P=0.005);其中IGF-1+YWPC組VSMCs穿透Transwell膜細胞數(shù)、p-AKT/AKT高于YWPC組(P0.05);IGF-1+Hcy組與IGF-1+YWPC組VSMCs穿透Transwell膜細胞數(shù)、p-AKT/AKT比較,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論 YWPC通過抑制Pi3K/AKT信號通路抑制Hcy誘導(dǎo)的VSMCs增殖和遷移。
【作者單位】： 浙江省紹興市人民醫(yī)院心內(nèi)科浙江大學(xué)紹興醫(yī)院;
【基金】：浙江省自然科學(xué)基金資助項目(LY14H020002) 紹興市科技局項目(2013B70072)
【分類號】：R151
【正文快照】： 劉龍斌,孟立平,季政,等.黃酒多酚對同型半胱氨酸誘導(dǎo)的血管平滑肌細胞增殖和遷移的影響及其機制研究[J].中國全科醫(yī)學(xué),2016,19(14):1676-1683.[www.chinagp.net]Liu LB,Meng LP,Ji Z,et al.Influence of yellow wine polyphenol compounds on homocysteine induced VSMCsproli

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中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 王強;彭俊;李法年;;bFGF促進骨膜細胞成骨性生長的研究[J];中國醫(yī)學(xué)創(chuàng)新;2008年32期

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3 張超;梁國穗;張穎愷;胡蘊玉;;動態(tài)力學(xué)應(yīng)變對人骨膜細胞的生物學(xué)作用[J];生物醫(yī)學(xué)工程學(xué)雜志;2006年03期

4 裴許芳;周佳農(nóng);王秀琴;丁志俠;吳e，

本文編號：1287617