本文關鍵詞：黃酒多酚對同型半胱氨酸誘導的血管平滑肌細胞增殖和遷移的影響及其機制研究

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【摘要】：目的驗證黃酒多酚(YWPC)是否具有抑制同型半胱氨酸(Hcy)誘導的大鼠血管平滑肌細胞(VSMCs)增殖和遷移的作用以及其產生作用的信號通路。方法采用組織貼塊法培育SD大鼠胸主動脈VSMCs,取第4~7代細胞用于實驗。細胞分為5組,分別為對照組,Hcy組(500μmol/L Hcy),YWPC 1 mg/L組(500μmol/L Hcy+1 mg/L YWPC),YWPC 10 mg/L組(500μmol/L Hcy+10 mg/L YWPC),YWPC 100 mg/L組(500μmol/L Hcy+100mg/L YWPC)。采用MTT法檢測VSMCs增殖情況;細胞劃痕實驗和Transwell法檢測VSMCs遷移和侵襲情況;Western blotting法檢測p-AKT/AKT表達情況。為驗證YWPC是否經Pi3K/AKT通路發(fā)揮抑制VSMCs的增殖和遷移,分別加入LY-294002和胰島素生長因子1(IGF-1)用來抑制和激活Pi3K/AKT通路,細胞被分為Hcy組,YWPC組,LY-294002+Hcy組,LY-294002+YWPC組;Hcy組,YWPC組,IGF-1+Hcy組,IGF-1+YWPC組,再分別采用上述方法檢測VSMCs增殖、遷移和侵襲情況。結果培養(yǎng)大鼠胸主動脈VSMCs,2周左右細胞融合可以傳代,經SM-actin細胞免疫熒光鑒定及DAPI核染,確定細胞純度在99%以上。24、48 h時,5組OD值比較,差異有統(tǒng)計學意義(F=52.575,P=0.016;F=83.756,P=0.014);其中Hcy組OD值高于對照組和YWPC組,且與YWPC呈劑量依賴性(P0.05)。24、48、72、96 h時,5組VSMCs遷移面積比較,差異均有統(tǒng)計學意義(P0.05);其中Hcy組VSMCs遷移面積多于對照組(P0.05);YWPC組VSMCs遷移面積低于Hcy組,且與YWPC呈劑量依賴性(P0.05)。48 h時,5組遷移細胞數比較,差異有統(tǒng)計學意義(F=79.354,P=0.001);其中Hcy組穿透Transwell膜細胞數高于對照組(P0.05);YWPC組穿透Transwell膜細胞數低于Hcy組,且與YWPC呈劑量依賴性(P0.05)。5組p-AKT/AKT比較,差異有統(tǒng)計學意義(F=56.723,P=0.002);其中Hcy組p-AKT/AKT高于對照組(P0.05);YWPC組p-AKT/AKT低于Hcy組,且與YWPC呈劑量依賴性(P0.05)。加入LY-294002:24 h時,各組OD值、VSMCs遷移面積比較,差異有統(tǒng)計學意義(F=46.875,P=0.004;F=67.723,P=0.002);其中LY-294002+Hcy組OD值、VSMCs遷移面積低于Hcy組(P0.05);LY-294002+Hcy組與LY-294002+YWPC組OD值、VSMCs遷移面積比較,差異無統(tǒng)計學意義(P0.05)。48 h時,各組VSMCs穿透Transwell膜細胞數、p-AKT/AKT比較,差異有統(tǒng)計學意義(F=52.904,P=0.003;F=87.904,P=0.001);其中LY-294002+Hcy組VSMCs穿透Transwell膜細胞數、p-AKT/AKT低于Hcy組(P0.05);LY-294002+Hcy組與LY-294002+YWPC組VSMCs穿透Transwell膜細胞數、p-AKT/AKT比較,差異無統(tǒng)計學意義(P0.05)。加入IGF-1:24 h時,各組OD值、VSMCs遷移面積比較,差異有統(tǒng)計學意義(F=48.052,P=0.007;F=63.085,P=0.002);其中IGF-1+YWPC組OD值、VSMCs遷移面積高于YWPC組(P0.05);IGF-1+Hcy組與IGF-1+YWPC組OD值、VSMCs遷移面積比較,差異無統(tǒng)計學意義(P0.05)。48 h時,各組VSMCs穿透Transwell膜細胞數、p-AKT/AKT比較,差異有統(tǒng)計學意義(F=55.941,P=0.008;F=65.011,P=0.005);其中IGF-1+YWPC組VSMCs穿透Transwell膜細胞數、p-AKT/AKT高于YWPC組(P0.05);IGF-1+Hcy組與IGF-1+YWPC組VSMCs穿透Transwell膜細胞數、p-AKT/AKT比較,差異無統(tǒng)計學意義(P0.05)。結論 YWPC通過抑制Pi3K/AKT信號通路抑制Hcy誘導的VSMCs增殖和遷移。
【作者單位】： 浙江省紹興市人民醫(yī)院心內科浙江大學紹興醫(yī)院;
【基金】：浙江省自然科學基金資助項目(LY14H020002) 紹興市科技局項目(2013B70072)
【分類號】：R151
【正文快照】： 劉龍斌,孟立平,季政,等.黃酒多酚對同型半胱氨酸誘導的血管平滑肌細胞增殖和遷移的影響及其機制研究[J].中國全科醫(yī)學,2016,19(14):1676-1683.[www.chinagp.net]Liu LB,Meng LP,Ji Z,et al.Influence of yellow wine polyphenol compounds on homocysteine induced VSMCsproli

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1 王強;彭俊;李法年;;bFGF促進骨膜細胞成骨性生長的研究[J];中國醫(yī)學創(chuàng)新;2008年32期

2 王藹明,盧春華,楊大同,李美芝;胰島素對人卵泡內泡膜細胞分泌雄激素的影響[J];生殖醫(yī)學雜志;1998年02期

3 張超;梁國穗;張穎愷;胡蘊玉;;動態(tài)力學應變對人骨膜細胞的生物學作用[J];生物醫(yī)學工程學雜志;2006年03期

4 裴許芳;周佳農;王秀琴;丁志俠;吳e，

本文編號：1287617