本文關(guān)鍵詞：苯并芘對小鼠T淋巴細胞的抑制作用及相關(guān)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的調(diào)控

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【摘要】：苯并芘是一種廣泛存在于煙熏和燒烤食品中的多環(huán)芳烴類污染物，具有致癌、致突變等多種毒性，對人危害極大，同時苯并芘對人體的毒作用具有有潛伏性、蓄積性。本研究旨在非細胞毒性劑量作用下，研究苯并芘對BALB/c小鼠T淋巴細胞的免疫抑制作用及對相關(guān)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的調(diào)控，為闡明苯并芘的免疫毒性機制，尋找更敏感有效、易檢測的毒性生物學(xué)標(biāo)志物提供實驗依據(jù)。 本論文從體外研究苯并芘對BALB/c小鼠T淋巴細胞的免疫抑制作用：分離培養(yǎng)小鼠脾臟T淋巴細胞懸液，，采用MTT法篩選苯并芘對T細胞的無細胞毒性的劑量范圍，考察刀豆蛋白（ConA）誘導(dǎo)T細胞的增殖情況，篩選出適合劑量作為研究的低中高劑量組（0.1μg/mL、0.2μg/mL、0.4μg/mL）；ELISA法檢測苯并芘對ConA誘導(dǎo)的T細胞分泌的細胞因子（IL-2、IFN-γ、IL-4）的影響；通過檢測細胞內(nèi)[Ca2+]i濃度和CaM蛋白表達，考察苯并芘對細胞內(nèi)Ca2+通路的影響；WesternBlotting法檢測苯并芘對ConA誘導(dǎo)的T細胞的NFAT、NF-κB通路的影響。 體外實驗結(jié)果表明：苯并芘對小鼠T淋巴細胞非細胞毒劑量范圍為0-0.4μg/mL，選取0.1μg/mL、0.2μg/mL、0.4μg/mL為低中高劑量組；苯并芘能夠抑制ConA誘導(dǎo)的T淋巴細胞的增殖；在細胞水平檢測到苯并芘對細胞因子IL-2、IFN-γ、IL-4有抑制作用；苯并芘能夠抑制T淋巴細胞內(nèi)[Ca2+]i濃度、抑制CaM蛋白的表達；苯并芘對T細胞的NFAT、NF-κB通路具有抑制作用，上述所有抑制作用均呈劑量相關(guān)性。綜上，苯并芘對小鼠T淋巴細胞有抑制作用，并參與對NFAT、NF-κB信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的調(diào)控。 綜上所述，苯并芘對BALB/c小鼠T淋巴細胞在非細胞毒性下、較低劑量范圍具有免疫抑制作用，且抑制作用呈劑量依賴性；苯并芘的免疫抑制作用可能是通過NFAT、NF-κB通路實現(xiàn)的。本研究有助于尋找到苯并芘攝入后對人體早期產(chǎn)生損害的并易于檢測的毒性生物學(xué)標(biāo)志物，為修訂苯并芘的安全限量，更好地保障食品安全提供實驗依據(jù)。
【學(xué)位授予單位】：吉林大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R114

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本文編號：1186667