本文關(guān)鍵詞：1,3-甘油二酯安全性評(píng)價(jià)及在大鼠小腸上皮再酯化途徑的研究

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【摘要】：目的對(duì)1,3-甘油二酯(diacylglycerol, DG)的食品安全性進(jìn)行毒理學(xué)評(píng)價(jià),為1,3-DG的開發(fā)和利用提供試驗(yàn)依據(jù)；通過分析1,3-DG和甘油三酯(triacylglycerol, TG)在小腸腔和小腸上皮內(nèi)含量的變化,研究1,3-DG在大鼠小腸上皮內(nèi)代謝和再酯化的途徑,探討1,3-DG有利于機(jī)體健康的機(jī)理。方法按照食品安全性毒理學(xué)評(píng)價(jià)程序和方法,分別進(jìn)行如下一系列試驗(yàn)：急性毒性試驗(yàn),用于觀察1,3-DG對(duì)動(dòng)物一般情況的影響；遺傳毒性試驗(yàn),包括Ames試驗(yàn)、骨髓細(xì)胞微核試驗(yàn)、精子畸形試驗(yàn),用于觀察1,3-DG是否對(duì)試驗(yàn)動(dòng)物遺傳有不良影響；30天喂養(yǎng)試驗(yàn),觀察試驗(yàn)期間試驗(yàn)動(dòng)物的一般狀況、體重增加、血液學(xué)和血液生化學(xué)指標(biāo)以及病理組織改變等,分析在長(zhǎng)期喂養(yǎng)中1,3-DG對(duì)大鼠的影響。1,3-DG在大鼠小腸上皮內(nèi)代謝和再酯化的途徑研究中,將試驗(yàn)動(dòng)物分為健康對(duì)照組和高甘油三脂血癥模型組。造模成功后,分別用含1,3-DG和TG的飼料進(jìn)行一段時(shí)間的喂養(yǎng),取材前用1,3-DG或TG乳化液進(jìn)行灌胃,在設(shè)定的時(shí)間點(diǎn)取材,分析大鼠小腸腔內(nèi)和小腸上皮細(xì)胞內(nèi)脂類含量的變化,研究1,3-DG在大鼠小腸上皮內(nèi)再酯化的途徑。結(jié)果1.急性毒性試驗(yàn)結(jié)果表明,1,3-DG對(duì)雌雄小鼠經(jīng)口LD50均大于15000mg/kg·bw,按急性毒性劑量分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)判斷,屬無毒級(jí)物質(zhì)。2. Ames試驗(yàn)結(jié)果可以看出,在加S9與不加S9時(shí),1,3-DG對(duì)鼠傷寒沙門菌TA97、TA98、TA100、TA102四種試驗(yàn)菌株,在0.2,0.5,1.0,2.5,5.0mg/皿,5個(gè)劑量組中的回變菌落數(shù)均未超過自發(fā)回變組菌落數(shù)的兩倍以上,且無劑量反應(yīng)關(guān)系,證明在本試驗(yàn)條件下Ames試驗(yàn)結(jié)果為陰性。3.小鼠骨髓細(xì)胞微核試驗(yàn)結(jié)果顯示,各劑量組的微核率與陰性對(duì)照組比較,結(jié)果無顯著差異(P0.05),且微核率在正常值范圍內(nèi)。陽性對(duì)照組的微核率與各劑量組及陰性對(duì)照組比較,結(jié)果具有顯著的差異性(P0.01). PCE/NCE均大于0.1,屬于正常范圍之內(nèi)。說明在本試驗(yàn)條件下,1,3-DG未使小鼠嗜多染紅細(xì)胞的微核率發(fā)生改變。4.精子畸形試驗(yàn)結(jié)果顯示,1,3-DG各劑量組的精子畸形率與陰性對(duì)照組相比,結(jié)果均無顯著差異(P0.05),陽性對(duì)照組精子畸形率與各劑量組及陰性對(duì)照組相比較,結(jié)果具有顯著差異(P0.01)。說明在本試驗(yàn)條件下,1,3-DG在該劑量范圍內(nèi)不引起小鼠精子畸形率增高。5.30天喂養(yǎng)試驗(yàn)的結(jié)果也未發(fā)現(xiàn)對(duì)試驗(yàn)大鼠的生長(zhǎng)發(fā)育、血液學(xué)、生化學(xué)、臟體比及組織病理學(xué)有明顯不良影響。6.小腸腔內(nèi)DG組的1(3)-甘油一酯(monoglycerides,MG)的含量高于TG組,而2-MG的含量卻低于TG組,兩組間1,2(2,3)-DG的含量無明顯差異。說明在小腸腔內(nèi)1,3-DG先酶解為1(3)-MG和自由脂肪酸(free fatty acids, FFA),而TG在小腸腔內(nèi)酶解為2-MG和FFA。7.在小腸上皮內(nèi),DG組的卜MG含量隨時(shí)間先升高再降低,1,3-DG的含量也隨之先升高再降低,而TG組中1,3-DG和1-MG含量無明顯變化,說明1-MG進(jìn)入上皮后,在相關(guān)酶的作用下重新合成1,3-DG。TG組較1,3-DG組2-MG和1,2-DG的含量隨時(shí)間變化更加明顯,說明在小腸上皮內(nèi),一部分2-MG可通過合成1,2-DG,進(jìn)一步合成TG,而1(3)-MG卻很少通過此途徑合成TG。結(jié)論在本試驗(yàn)條件下,急性毒性試驗(yàn)、Ames試驗(yàn)、小鼠骨髓細(xì)胞微核試驗(yàn)、精子畸形試驗(yàn)、30天喂養(yǎng)試驗(yàn)均未對(duì)試驗(yàn)動(dòng)物產(chǎn)生損害,說明1,3-DG可作為毒理學(xué)安全的功能食品。1,3-DG在小腸腔及小腸上皮細(xì)胞代謝途徑研究表明,TG在小腸腔首先分解為2-MG和FFA,隨后2-MG和FFA被吸收進(jìn)入小腸上皮細(xì)胞,在小腸上皮細(xì)胞內(nèi)2-MG和一分子FFA在相關(guān)合成酶的作用下先合成1,2(2,3)-DG,再進(jìn)一步合成TG。1,3-DG在小腸腔首先被酶解為1(3)-MG和FFA,1(3)-MG和FFA被吸收進(jìn)入在小腸上皮細(xì)胞后,在小腸上皮內(nèi)1(3)-MG直接合成1,3-DG,然后再結(jié)合一分子FFA,合成為TG,而不是先合成1,2(2,3)-DG,再合成TG。說明1,3-DG與TG在小腸中的代謝途徑不同,可能是其發(fā)揮健康有益效應(yīng)的機(jī)理之一。
【學(xué)位授予單位】：山東大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R151.2

【共引文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：1157726