本文關鍵詞：飲水攝入三氯乙烯致小鼠肝臟損傷中PPARs表達的研究

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【摘要】：研究背景三氯乙烯（trichloroethylene，TCE）是一種工業(yè)上常用的有機溶劑，廣泛用作金屬表面去污劑。由于被大量應用但處置能力有限，TCE已大量進入大氣、土壤以及地下水系統(tǒng)成為一種重要的環(huán)境污染物。長期低劑量暴露于TCE可致肝毒性，同時可引起機體免疫系統(tǒng)的失衡。研究表明TCE經肝臟代謝后生成具有過氧化物酶體增殖物（peroxisome proliferator，，PP）特性的代謝物，繼而激活PP的受體過氧化物酶體增殖物活化受體（peroxisome proliferator activated receptors，PPARs），PPARs與許多環(huán)境毒物所致的肝臟毒性及機體的免疫應答存在密切聯(lián)系，但在飲水攝入TCE所致肝毒性中PPARs的表達及其作用仍不清楚。 目的本研究通過檢測經飲水攝入TCE后小鼠肝臟損傷情況及肝臟中PPARs表達，探討TCE暴露引起小鼠肝臟損傷中PPARs的表達情況以及時間和劑量效應關系，為闡明環(huán)境TCE暴露危害及其分子機制，并制定防制對策提供理論依據。 方法選取健康狀況良好，體重16~20g的雌性BALB/c小鼠飼養(yǎng)于清潔級動物房，適應性飼養(yǎng)1周后隨機分為空白對照組、溶劑對照組、2.5g/LTCE組和5.0g/LTCE組，TCE用終濃度不超過1%的DMSO溶解后經飲水給予。分別在第2、4、8、12周摘眼球采集外周血，經靜置分離上層血清凍存?zhèn)溆�，處死動物后取肝臟組織凍存?zhèn)溆�。用全自動生化分析儀檢測肝臟生化指標谷丙轉氨酶（alanineamiotransferase，ALT），取肝臟組織制作蘇木精—伊紅（(hematoxylin-eosin staining，HE）染色切片，顯微鏡下觀察評價肝臟病理改變，用酶聯(lián)免疫吸附試驗（enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA）試劑盒檢測肝臟促炎細胞因子白介素（interleukin，IL）-1、IL-6和腫瘤壞死因子（tumor necrosis factor，TNF）-α含量；用熒光定量實時聚合酶鏈式反應（real time-polymerase chain reactions，RT-PCR）法檢測肝臟PPARα、PPARβ和PPARγ mRNA表達情況，用免疫組織化學法對肝臟PPARα和PPARγ蛋白進行定位。數據用Spss17.0統(tǒng)計軟件進行錄入和分析。 結果 1一般情況：實驗期間各時間段各組小鼠一般情況良好，未出現個體因TCE攝入而死亡的現象，各組小鼠平均飲水量和體重增長差異無統(tǒng)計學意義，各時間點小鼠肝臟系數組間差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。 2飲水攝入TCE致小鼠肝損傷情況：在2、4周，2.5g/L和5.0g/L TCE組ALT水平較對照組有所升高（P 0.05，P 0.01），在8、12周，2.5g/L、5.0g/LTCE組ALT水平有所下降，但仍高于對照組，只有5.0g/l TCE組ALT水平在8周時顯著高于對照組（P 0.05，P 0.01）；組織病理學檢查進一步顯示TCE染毒小鼠出現肝臟細胞水腫變性、炎細胞浸潤等不同程度的肝損傷改變，尤其是給予5.0g/L劑量在4周時損傷情況最為明顯；對肝臟促炎因子水平檢測結果顯示，與對照組相比，2.5g/L和5.0g/LTCE組肝臟IL-1、IL-6、TNF-α水平均在4周時達到最高，且差異具有統(tǒng)計學意義（P 0.05，P 0.01），在2、8周，5.0g/LTCE組小鼠肝臟IL-6、TNF-α水平與對照組比較也明顯升高（P 0.05，P 0.01），在12周時三種促炎細胞因子水平均有所下降，但仍高于對照組；相關性分析顯示血清ALT水平與肝臟促炎細胞因子水平IL-1，IL-6，TNF-α水平存在顯著的正相關（r=0.615，0.522，0.649，p 0.01）。 3肝臟PPARs表達情況：在4、8、12周，TCE暴露組PPARα mRNA水平顯著升高，且5.0g/LTCE組上升趨勢高于2.5g/LTCE組（P 0.05，P 0.01）；TCE暴露對PPARβ mRNA表達無顯著影響（P＞0.05）；在4周時，TCE暴露組PPARγmRNA水平也顯著上調（P 0.05），在8、12周，5.0g/L TCE組PPARγ mRNA水平高于對照組（P 0.05，P 0.01）。進一步進行免疫組化檢測顯示，PPARα和PPARγ在TCE染毒組小鼠肝臟組織細胞核中都有表達，且陽性細胞率均顯著高于對照組（P 0.05）。 結論 1經飲水攝入TCE可致小鼠肝損傷，肝功能指標ALT及肝臟中促炎細胞因子IL-1，IL-6，TNF-α含量升高，并見明顯炎細胞浸潤，部分肝細胞輕度水腫，少許細胞變性或壞死。 2經飲水攝入TCE對小鼠肝臟PPARα和PPARγ表達有顯著影響，可顯著上調其mRNA表達水平，同時激活其蛋白表達。 3TCE飲水攝入導致的PPARα和PPARγ表達上調可能與小鼠肝臟損傷有關。
【關鍵詞】：三氯乙烯 肝臟損傷 PPARα PPARγ
【學位授予單位】：安徽醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2014
【分類號】：R114
【目錄】：

• 英文縮略詞表5-7
• 中文摘要7-10
• Abstract10-13
• 1 引言13-15
• 2 材料與方法15-23
• 3 結果23-38
• 4 討論38-42
• 5 結論42
• 6 參考文獻42-48
• 附錄48-49
• 致謝49-50
• 綜述50-60
• 參考文獻56-60

【參考文獻】

中國期刊全文數據庫 前9條

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本文編號：1131365