本文關鍵詞：多不飽和脂肪酸提高發(fā)育期大鼠空間學習記憶的機制

  更多相關文章： 多不飽和脂肪酸 空間學習記憶 NMDA受體亞基 c AMP反應原件結合蛋白 即刻早期基因

【摘要】：為了探討飲食中添加DHA、紅花籽油、核桃油、紫蘇油、α-亞油酸對發(fā)育期大鼠空間學習記憶能力的影響,以及其分子機制。我們將56只初斷乳的SPF級雄性SD大鼠隨機分成7組:陰性對照組、必需脂肪酸缺乏對照組、DHA組(300mg/kg·d)、α-亞油酸組(1.32g/kg·d)、紫蘇油組(2.45m L/kg·d)、核桃油組(2.45m L/kg·d)和紅花籽油組(1.65g/kg·d)。每日灌胃給油,連續(xù)飼養(yǎng)八周后,首先進行Morris水迷宮行為學實驗,觀察大鼠空間學習記憶的變化;然后提取大鼠大腦細胞膜,使用氣相色譜-質譜聯(lián)用技術檢測大鼠大腦組織細胞膜中脂肪酸的種類與含量;其次,采用Realtime-PCR技術檢測大鼠海馬組織中即刻早期基因(c-fos)、c AMP反應原件結合蛋白(CREB)和NMDA受體亞基(NR1)m RNA表達量,同時使用western-bolt技術檢測大鼠海馬組織中CREB與c-Fos蛋白的表達。最后,通過體外培養(yǎng)海馬神經(jīng)元細胞,構建細胞模型,并將其分為陰性對照組、DHA組、α-亞油酸組、紫蘇油組、核桃油組、紅花籽油組。培養(yǎng)24h后,觀察海馬神經(jīng)元細胞的變化,并使用Realtime-PCR技術檢測海馬神經(jīng)元細胞中c-fos、CREB和NR1的m RNA表達。結果顯示:(1)與陰性對照組相比,DHA組、紫蘇油組、α-亞油酸組、核桃油組、紅花籽油組的大鼠逃避潛伏期明顯縮短(P0.05和P0.01),穿越目標象限的時間比明顯增加(P0.05和P0.01)。DHA組、紫蘇油組、核桃油組、紅花籽油組的大鼠穿越目標象限內平臺的次數(shù)較陰性對照組顯著增加(P0.05),α-亞油酸組無明顯差異。在Morris水迷宮的結果比較中,必需脂肪酸缺乏對照組與陰性對照組相比,無顯著性差異。(2)與陰性對照組相比,每組大鼠大腦細胞膜脂肪酸的種類相同;DHA組、紫蘇油組、α-亞油酸組、核桃油組、紅花籽油組的大鼠大腦組織細胞膜中n-3系列多不飽和脂肪酸含量和n-3PUFA/n-6PUFA的比值顯著增加(P0.05和P0.01);DHA組、核桃油組與紅花籽油組的大鼠大腦細胞膜中DHA/AA的比值顯著升高(P0.05和P0.01)。必需脂肪酸缺乏對照組的大鼠大腦細胞膜脂肪酸含量與陰性對照組相比,無顯著性差異。(3)與陰性對照組相比,DHA組、紫蘇油組、α-亞油酸組、核桃油組、紅花籽油組的大鼠海馬組織中NR1、CREB和c-fos的m RNA表達量明顯上調(P0.05和P0.01)。DHA組、紫蘇油組、α-亞油酸組、核桃油組、紅花籽油組的大鼠海馬組織中CREB和c-Fos蛋白表達量顯著上浮(P0.05)。必需脂肪酸缺乏對照組大鼠海馬組織基因與蛋白的表達量與陰性對照組相比,無顯著性差異。(4)與陰性對照組相比,DHA組、紫蘇油組、α-亞油酸組、核桃油組、紅花籽油組海馬神經(jīng)元細胞中NR1、CREB和c-fos的m RNA表達量顯著上調(P0.05)。得出結論:(1)飲食添加適當劑量n-3PUFA的DHA、紫蘇油,n-6PUFA的α-亞油酸、核桃油和紅花籽油均能夠提高發(fā)育期大鼠的空間學習記憶能力,但不同油脂效果不同。短期缺乏必需脂肪酸對發(fā)育期大鼠的空間學習記憶功能無影響。(2)DHA、紫蘇油、紅花籽油、核桃油和α-亞油酸可能是通過增加大鼠大腦細胞膜中n-3PUFA的含量與n-3PUFA/n-6PUFA的比值來提高大鼠學習記憶功能的。(3)DHA、紫蘇油、紅花籽油、核桃油和α-亞油酸提升發(fā)育期大鼠的空間學習記憶能力,可能是通過調控大鼠海馬組織中cfos、CREB、NR1的m RNA表達與CREB、c-Fos蛋白的合成,促進長時程增強的產(chǎn)生來實現(xiàn)的。
【關鍵詞】：多不飽和脂肪酸 空間學習記憶 NMDA受體亞基 c AMP反應原件結合蛋白 即刻早期基因
【學位授予單位】：武漢輕工大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R151
【目錄】：

• 摘要4-6
• ABSTRACT6-11
• 縮寫詞中英文對照表11-12
• 第1章 緒論12-26
• 1.1 研究背景12-13
• 1.2 PUFA的研究概況13-20
• 1.2.1 PUFA的簡介13
• 1.2.2 PUFA的主要來源與代表油脂13-15
• 1.2.3 PUFA在生物體內的代謝15-16
• 1.2.4 PUFA的生理營養(yǎng)功能16-18
• 1.2.5 PUFA與學習記憶的關系18-19
• 1.2.6 PUFA增強學習記憶的可能機理19-20
• 1.3 學習記憶以及其機制的的研究概述20-21
• 1.4 與學習記憶相關的NR1、CREB、c-fos的研究進展21-24
• 1.4.1 NR1與學習記憶的研究進展21-22
• 1.4.2 CREB與學習記憶的研究進展22-23
• 1.4.3 c-fos與學習記憶的研究進展23-24
• 1.5 研究的目的與意義24
• 1.6 研究的思路和主要內容24-26
• 第2章 整體水平動物實驗26-35
• 2.1 實驗材料26-27
• 2.1.1 實驗動物26
• 2.1.2 實驗試劑26
• 2.1.3 實驗儀器26-27
• 2.2 實驗方法27-29
• 2.2.1 動物的分組與喂養(yǎng)27
• 2.2.2 Morris水迷宮實驗27-29
• 2.2.3 統(tǒng)計學分析29
• 2.3 實驗結果29-33
• 2.3.1 Bartlett的球形度檢驗結果29
• 2.3.2 定向航行實驗結果29-31
• 2.3.3 空間探索實驗結果31-33
• 2.4 討論33-35
• 第3章 分子水平實驗35-56
• 3.1 實驗材料35-37
• 3.1.1 實驗動物35
• 3.1.2 實驗試劑35-36
• 3.1.3 實驗儀器36
• 3.1.4 主要試劑的配置36-37
• 3.2 實驗方法37-44
• 3.2.1 氣相色譜 -質譜聯(lián)用技術檢測腦組織細胞膜脂肪酸的變化37-38
• 3.2.2 Real-time PCR技術檢測海馬組織中NR1、CREB、c-fos的表達38-41
• 3.2.3 Western-bolt技術檢測海馬組織中CREB、c-Fos蛋白的表達41-44
• 3.2.4 統(tǒng)計學分析44
• 3.3 實驗結果44-52
• 3.3.1 大鼠大腦組織細胞膜脂肪酸的變化44-48
• 3.3.2 大鼠海馬組織中NR1、CREB、c-fos m RNA的表達48-50
• 3.3.3 大鼠海馬組織中CREB、c-Fos蛋白的表達50-52
• 3.4 討論52-56
• 3.4.1 氣相色譜 -質譜結果討論52-53
• 3.4.2 Real-time PCR結果討論53-54
• 3.4.3 Western-bolt結果討論54-56
• 第4章 細胞水平實驗56-64
• 4.1 實驗材料56-57
• 4.1.1 實驗動物56
• 4.1.2 主要試劑56
• 4.1.3 主要儀器56-57
• 4.1.4 主要試劑的配制57
• 4.2 實驗方法57-59
• 4.2.1 海馬神經(jīng)元細胞的原代培養(yǎng)57-58
• 4.2.2 海馬神經(jīng)元細胞的分組58
• 4.2.3 海馬神經(jīng)元細胞中RNA的提取和目的基因的表達58-59
• 4.3 實驗結果59-62
• 4.3.1 海馬神經(jīng)元細胞的培養(yǎng)59-60
• 4.3.2 海馬神經(jīng)元細胞中NR1、CREB、c-fos的表達60-62
• 4.4 討論62-64
• 第5章 小結64-66
• 參考文獻66-78
• 致謝78-79
• 攻讀學位期間的研究成果79

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前4條

1 王彪;畢強;孟曉娜;崔鑫;宗志紅;邢偉;;慢性鋁暴露對大鼠海馬細胞外調節(jié)蛋白激酶2及cAMP反應元件結合蛋白mRNA和蛋白表達的影響[J];環(huán)境與健康雜志;2012年12期

2 成祥林;向明清;汪華;;天麻對阿爾茨海默病模型大鼠學習記憶和海馬突觸傳遞蛋白表達的影響[J];中華行為醫(yī)學與腦科學雜志;2012年03期

3 郭艷芬;王麗梅;肖娜;劉志國;李金華;劉烈炬;;發(fā)育期補充DHA對大鼠空間學習記憶能力的影響[J];中國油脂;2011年09期

4 陳超剛,蘇宜香,譚炳炎,馮翔,聞劍;多烯脂肪酸對海馬神經(jīng)元細胞脂肪酸構成和生長的作用[J];營養(yǎng)學報;2002年03期

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本文編號：1109753