本文關(guān)鍵詞：食品源性雙酚A暴露對(duì)腦發(fā)育和功能的影響及機(jī)理研究

  更多相關(guān)文章： 雙酚A Wnt信號(hào)通路 表觀遺傳 多巴胺 樹突棘密度

【摘要】：雙酚A (Bisphenol-A, BPA)是一種廣泛存在的環(huán)境雌激素干擾劑,并兼有擬雌激素、抗雌激素和抗雄激素活性。它既可以與雌激素受體結(jié)合,也可以與膜表面的非雌激素受體結(jié)合,從而干擾正常的生理活動(dòng)。由于內(nèi)源性激素對(duì)腦發(fā)育及功能都十分重要,因此雙酚A被認(rèn)為可影響腦發(fā)育及腦功能,進(jìn)而影響人及動(dòng)物的相關(guān)行為。但雙酚A影響中樞神經(jīng)系統(tǒng)的具體分子機(jī)制目前尚不是很清楚,甚至存在一些爭(zhēng)議。目的探究發(fā)育期雙酚A暴露對(duì)SD鼠海馬CAl及DG區(qū)樹突棘形態(tài)的影響,并從Wnt信號(hào)通路的角度闡述可能的分子機(jī)制；探究慢性雙酚A暴露對(duì)成年鼠自主行為及空間記憶的影響,并研究了這種影響是否與多巴胺系統(tǒng)及組蛋白的表觀遺傳修飾有關(guān)。方法1.從整體動(dòng)物及培養(yǎng)的離體海馬神經(jīng)元兩方面研究了發(fā)育期雙酚A暴露對(duì)海馬樹突棘的影響。整體動(dòng)物雙酚A暴露劑量為50μg/kg/d、250μg/kg/d、 500μg/kg/d,暴露時(shí)間為SD鼠出生7-14天,暴露方式為腹腔注射。離體海馬神經(jīng)元雙酚A暴露劑量10nM、100nM、1μm、10μm,暴露時(shí)間是細(xì)胞培養(yǎng)至第14天雙酚A暴露2小時(shí)。Golgi-cox染色觀察在體海馬神經(jīng)細(xì)胞的樹突棘形態(tài),慢病毒轉(zhuǎn)染EGFP.激光共聚焦顯微鏡拍攝觀察離體海馬神經(jīng)元的樹突棘形態(tài)。Western blot檢測(cè)Wnt蛋白的表達(dá)量。2.雙酚A慢性暴露實(shí)驗(yàn)：子鼠自母鼠懷孕開始接受BPA暴露一直到成年,在其第8周進(jìn)行曠場(chǎng)試驗(yàn),12周時(shí)進(jìn)行水迷宮實(shí)驗(yàn),Golgi-cox染色觀察雙酚A暴露后海馬神經(jīng)細(xì)胞的樹突棘形態(tài),Western blot檢測(cè)多巴胺系統(tǒng)相關(guān)蛋白及組蛋白、乙酰化的組蛋白的表達(dá)量,PCR檢測(cè)相關(guān)蛋白基因的表達(dá)。結(jié)果1.整體動(dòng)物及離體海馬神經(jīng)元發(fā)育期BPA暴露會(huì)顯著降低海馬CA1及DG區(qū)樹突棘密度,Wnt7a表達(dá)下降,Wnt5a表達(dá)上升,β-catenin磷酸化程度升高。外源性Wnt7a細(xì)胞因子可修復(fù)雙酚A造成的樹突棘損傷,并降低β-catenin磷酸化程度。2.雙酚A慢性暴露導(dǎo)致SD雄鼠出現(xiàn)多動(dòng)行為,損傷SD雄鼠及雌鼠的空間記憶,降低海馬CA1區(qū)的樹突棘密度。雙酚A暴露使多巴胺轉(zhuǎn)運(yùn)體DAT1及多巴胺受體DRD4蛋白及mRNA水平都顯著下降,高劑量組(50mg/L)組蛋白H3的乙�；潭让黠@升高,進(jìn)一步的研究表明,高劑量組去乙酰化酶HDAC1明顯降低從而使組蛋白乙�；潭忍岣摺＝Y(jié)論1.發(fā)育期雙酚A暴露可損傷海馬CA1及DG區(qū)樹突棘形成,導(dǎo)致樹突棘密度降低。Wnt信號(hào)通路可能參與了BPA致樹突棘損傷這一過程。其中,BPA可能通過靶點(diǎn)Wnt7a損傷樹突棘生長(zhǎng)并能降低β-catenin的穩(wěn)定性。2.慢性雙酚A暴露損傷SD鼠的空間記憶,并伴有樹突棘密度的下降。BPA引起多動(dòng)與劑量有關(guān)：低劑量雙酚A暴露可致雄鼠出現(xiàn)多動(dòng)現(xiàn)象,但高劑量BPA暴露雄鼠并不出現(xiàn)多動(dòng)。原因可能是高劑量BPA引起大鼠組蛋白乙酰化水平升高。進(jìn)一步的研究發(fā)現(xiàn),雙酚A暴露使多巴胺受體DRD4及多巴胺轉(zhuǎn)運(yùn)體DAT1受到抑制,多巴胺系統(tǒng)與多動(dòng)的關(guān)系尚需進(jìn)一步的研究證明。
【關(guān)鍵詞】：雙酚A Wnt信號(hào)通路 表觀遺傳 多巴胺 樹突棘密度
【學(xué)位授予單位】：合肥工業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R114
【目錄】：

• 致謝7-8
• 摘要8-10
• ABSTRACT10-17
• 第一章 緒論17-26
• 1.1 BPA暴露來源17-19
• 1.1.1 食物17-18
• 1.1.2 水體18
• 1.1.3 空氣18-19
• 1.1.4 土壤及沉積物19
• 1.2 雙酚A檢測(cè)19
• 1.2.1 物理法19
• 1.2.2 免疫分析法19
• 1.2.3 化學(xué)分析法19
• 1.3 雙酚A暴露對(duì)中樞神經(jīng)系統(tǒng)的影響19-21
• 1.3.1 雙酚A對(duì)腦形態(tài)結(jié)構(gòu)的影響19-20
• 1.3.2 雙酚A對(duì)神經(jīng)遞質(zhì)的影響20-21
• 1.4 雙酚A對(duì)行為的影響21
• 1.4.1 生殖行為21
• 1.4.2 非生殖行為21
• 1.5 BPA作用機(jī)制21-26
• 1.5.1 通過與受體結(jié)合發(fā)揮作用21-22
• 1.5.2 干擾與受體無關(guān)的細(xì)胞信號(hào)通路22-24
• 1.5.3 課題研究的背景和意義24
• 1.5.4 課題研究的主要內(nèi)容24
• 1.5.5 技術(shù)路線圖24-26
• 第二章 發(fā)育期雙酚A暴露對(duì)SD鼠海馬區(qū)樹突棘形態(tài)的影響及機(jī)理的在體研究26-36
• 2.1 材料與方法26-29
• 2.1.1 主要儀器26
• 2.1.2 主要試劑和藥品26
• 2.1.3 主要抗體26
• 2.1.4 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物26
• 2.1.5 Golgi-cox染色26-27
• 2.1.6 Western blot蛋白定量27-29
• 2.1.7 數(shù)據(jù)分析29
• 2.2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果29-34
• 2.2.1 發(fā)育期雙酚A暴露對(duì)海馬DG區(qū)樹突棘形態(tài)的影響29-31
• 2.2.2 發(fā)育期雙酚A暴露對(duì)海馬CA1區(qū)樹突棘形態(tài)的影響31-32
• 2.2.3 發(fā)育期雙酚A暴露對(duì)海馬CA1及DG區(qū)Wnt7a的影響32
• 2.2.4 發(fā)育期雙酚A暴露對(duì)海馬CA1及DG區(qū)Wnt5a的影響32-33
• 2.2.5 發(fā)育期雙酚A暴露對(duì)海馬CA1及DG區(qū)β-catenin穩(wěn)定性的影響33-34
• 2.3 討論34-36
• 第三章 發(fā)育期雙酚A暴露對(duì)海馬神經(jīng)元樹突棘形態(tài)的影響及機(jī)理的離體研究36-42
• 3.1 材料與方法36-38
• 3.1.1 主要儀器36
• 3.1.2 主要試劑和藥品36
• 3.1.3 海馬神經(jīng)元細(xì)胞培養(yǎng)36
• 3.1.4 慢病毒轉(zhuǎn)染神經(jīng)元36-37
• 3.1.5 蛋白收集37
• 3.1.6 激光共聚焦顯微鏡成像方法37
• 3.1.7 Western blot蛋白定量37
• 3.1.8 數(shù)據(jù)分析37-38
• 3.2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果38-41
• 3.2.1 雙酚A暴露對(duì)離體海馬神經(jīng)元樹突棘密度的影響38
• 3.2.2 雙酚A對(duì)離體神經(jīng)元中Wnt通路相關(guān)蛋白的影響38-39
• 3.2.3 外源性Wnt7a細(xì)胞因子對(duì)雙酚A造成的樹突棘損傷的修復(fù)作用39-41
• 3.3 討論41-42
• 第四章 雙酚A慢性暴露對(duì)SD鼠行為的影響及機(jī)理研究42-58
• 4.1 材料與方法42-47
• 4.1.1 主要儀器42
• 4.1.2 主要試劑和藥品42
• 4.1.3 動(dòng)物造模42
• 4.1.4 曠場(chǎng)試驗(yàn)42-43
• 4.1.5 水迷宮實(shí)驗(yàn)43
• 4.1.6 DRD4/DAT1/HDAC1/P300等基因表達(dá)水平的檢測(cè)43-46
• 4.1.7 Western blot蛋白定量46-47
• 4.1.8 數(shù)據(jù)分析47
• 4.2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果47-55
• 4.2.1 雙酚A暴露對(duì)SD鼠曠場(chǎng)行為的影響47-48
• 4.2.2 雙酚A暴露對(duì)SD鼠空間記憶的影響48-50
• 4.2.3 雙酚A暴露對(duì)海馬CA1區(qū)神經(jīng)元樹突棘密度的影響50-51
• 4.2.4 海馬組織蛋白濃度的測(cè)定51-52
• 4.2.5 雙酚A暴露對(duì)多巴胺轉(zhuǎn)運(yùn)體(DAT1)及多巴胺受體(DRD4)蛋白表達(dá)水平的影響52-54
• 4.2.6 高劑量雙酚A暴露導(dǎo)致組蛋白H3乙�；降挠绊�54
• 4.2.7 雙酚A暴露對(duì)調(diào)控組蛋白乙酰化水平的兩種酶HDAC1及P300的影響54-55
• 4.3 討論55-58
• 參考文獻(xiàn)58-66
• 碩士期間的學(xué)術(shù)活動(dòng)及研究成果66

【相似文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 張妍;唐民科;張均田;;樹突棘與學(xué)習(xí)記憶[J];國(guó)際神經(jīng)病學(xué)神經(jīng)外科學(xué)雜志;2006年04期

2 張曉光;薛張綱;;記憶提取對(duì)小鼠樹突棘的形態(tài)學(xué)影響[J];中國(guó)臨床醫(yī)學(xué);2012年02期

3 何方;;樹突棘的結(jié)構(gòu)、可塑性與功能[J];四川解剖學(xué)雜志;1985年02期

4 許本柯;劉本菊;陳運(yùn)才;;樹突棘的分子組成和調(diào)節(jié)蛋白[J];解剖學(xué)研究;2013年06期

5 張賽圣;程麗霞;呂誠(chéng);;肌動(dòng)蛋白結(jié)合蛋白在神經(jīng)元樹突棘重塑中的作用[J];中國(guó)老年學(xué)雜志;2014年06期

6 吳萍;于東明;;前突觸終末和樹突棘之間突觸連接的能動(dòng)性研究[J];醫(yī)藥論壇雜志;2010年17期

7 汪遷;李楊;都思丹;;三維顯微圖像中神經(jīng)元樹突棘自動(dòng)檢測(cè)與分析[J];中國(guó)科學(xué)技術(shù)大學(xué)學(xué)報(bào);2014年02期

8 周琳娜;魏建峰;王芳;袁琳娜;王小麗;劉漢武;劉勝洪;;樹突棘素在大鼠小腦中的表達(dá)和年齡變化[J];中國(guó)組織化學(xué)與細(xì)胞化學(xué)雜志;2007年01期

9 崔占軍;趙凱冰;文曙光;張俊士;于東明;鄧錦波;;孕期酒精暴露對(duì)小鼠視皮質(zhì)神經(jīng)元樹突棘和突觸的影響[J];藥學(xué)學(xué)報(bào);2010年07期

10 賈賀;張博愛;劉宇;張小敏;姬亞杰;李星;劉榮麗;;慢性腦缺血大鼠海馬CA1區(qū)錐體細(xì)胞樹突形態(tài)及樹突棘密度的變化[J];中國(guó)病理生理雜志;2012年01期

中國(guó)重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 廖杰;劉深泉;;樹突棘中鈣信號(hào)的數(shù)值分析[A];中國(guó)力學(xué)學(xué)會(huì)學(xué)術(shù)大會(huì)'2009論文摘要集[C];2009年

2 郭陽;易詠紅;孫衛(wèi)文;蘇濤;廖衛(wèi)平;;FMR1基因敲除小鼠感覺皮質(zhì)管狀區(qū)神經(jīng)元樹突與樹突棘可塑性的研究[A];第九次全國(guó)神經(jīng)病學(xué)學(xué)術(shù)大會(huì)論文匯編[C];2006年

3 張博愛;;ephrin/Eph對(duì)樹突棘的調(diào)節(jié)研究進(jìn)展[A];經(jīng)濟(jì)策論（下）[C];2011年

4 崔慧先;李莎;康林;張超;;雙氫睪酮對(duì)SAMP8小鼠海馬樹突棘的快速影響及作用[A];中國(guó)解剖學(xué)會(huì)2012年年會(huì)論文文摘匯編[C];2012年

5 王國(guó)華;程玉芳;梁寶方;袁欣;徐江平;;抑郁癥小鼠海馬區(qū)BDNF表達(dá)和樹突棘密度的時(shí)間變化[A];第十五屆中國(guó)神經(jīng)精神藥理學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文摘要[C];2012年

6 孫衛(wèi)文;郭陽;易詠紅;;鈣結(jié)合蛋白Calbindin在FMR1基因敲除小鼠腦組織中的表達(dá)[A];中國(guó)神經(jīng)科學(xué)學(xué)會(huì)第六屆學(xué)術(shù)會(huì)議暨學(xué)會(huì)成立十周年慶祝大會(huì)論文摘要匯編[C];2005年

7 張?zhí)K明;常麗英;梅愛農(nóng);梁燕玲;李羅清;殷小平;;8-溴環(huán)磷酸腺苷對(duì)腦缺血再灌注大鼠神經(jīng)再生的影響[A];第九次全國(guó)神經(jīng)病學(xué)學(xué)術(shù)大會(huì)論文匯編[C];2006年

8 易詠紅;;mGluR激動(dòng)或抑制對(duì)FMR1基因敲除小鼠培養(yǎng)海馬神經(jīng)元樹突棘形態(tài)和蛋白表達(dá)的影響[A];中國(guó)神經(jīng)科學(xué)學(xué)會(huì)第六屆學(xué)術(shù)會(huì)議暨學(xué)會(huì)成立十周年慶祝大會(huì)論文摘要匯編[C];2005年

9 林杭;曹仁存;王慶松;吳渝憲;王偉文;;NMDA受體誘發(fā)神經(jīng)元樹突棘形態(tài)改變和AMPA受體移動(dòng)到樹突棘的時(shí)間動(dòng)態(tài)變化[A];第九次全國(guó)神經(jīng)病學(xué)學(xué)術(shù)大會(huì)論文匯編[C];2006年

10 李文琪;李剛;鄭歌;朱彥兵;張弛;王韻;;蛋白激酶D1對(duì)突觸形態(tài)發(fā)育的調(diào)控作用[A];中國(guó)神經(jīng)科學(xué)學(xué)會(huì)第九屆全國(guó)學(xué)術(shù)會(huì)議暨第五次會(huì)員代表大會(huì)論文摘要集[C];2011年

中國(guó)重要報(bào)紙全文數(shù)據(jù)庫 前7條

1 記者 王丹 通訊員 提蓮英;衰老過程中認(rèn)知力為何下降有新解[N];健康報(bào);2012年

2 本報(bào)記者 華凌;多睡覺更聰明有了實(shí)證[N];科技日?qǐng)?bào);2014年

3 無雨 編譯;“過目不忘”小處練功[N];大眾科技報(bào);2002年

4 劉海英;神經(jīng)細(xì)胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)功能機(jī)理揭曉[N];科技日?qǐng)?bào);2009年

5 本報(bào)記者 齊芳 詹媛;人類的大腦可“塑造”[N];光明日?qǐng)?bào);2012年

6 姜巖;過目不忘有“絕招”[N];安徽日?qǐng)?bào);2003年

7 記者姜巖;過目不忘有“絕招”[N];人民日?qǐng)?bào);2002年

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 崔占軍;孕期酒精暴露對(duì)小鼠視皮質(zhì)神經(jīng)元樹突棘和突觸的影響[D];河南大學(xué);2010年

2 王穎;海人酸致癇大鼠神經(jīng)元樹突棘的可塑性變化[D];大連醫(yī)科大學(xué);2011年

3 張科學(xué);利用雙光子顯微鏡在體觀察脊髓半切后小鼠感覺皮層后肢代表區(qū)樹突棘的變化[D];中國(guó)人民解放軍醫(yī)學(xué)院;2015年

4 白易鑫;去甲腎上腺素α_(2A)受體在內(nèi)側(cè)前額葉皮層神經(jīng)元樹突棘發(fā)育中的作用[D];南昌大學(xué);2012年

5 賈賀;慢性腦缺血大鼠海馬CA1區(qū)錐體細(xì)胞樹突形態(tài)學(xué)變化及樹突棘密度的研究[D];鄭州大學(xué);2012年

6 劉婧;辣椒素保護(hù)應(yīng)激誘導(dǎo)的樹突棘丟失和記憶損傷[D];華中科技大學(xué);2011年

7 閻一鑫;腦中風(fēng)對(duì)不同年齡和性別小鼠神經(jīng)元樹突的影響[D];蘭州大學(xué);2013年

8 王芳媛;丹參對(duì)運(yùn)動(dòng)大鼠學(xué)習(xí)記憶能力的促進(jìn)作用[D];西北師范大學(xué);2005年

9 趙姝;二羥黃酮對(duì)中度創(chuàng)傷性腦損傷后小鼠皮層神經(jīng)元樹突的保護(hù)[D];南方醫(yī)科大學(xué);2014年

10 史玉娟;APP/PS1小鼠腦發(fā)育過程中樹突棘和突觸的變化[D];河南大學(xué);2015年

，

本文編號(hào)：1062652