發(fā)布時(shí)間：2017-10-19 11:39

  本文關(guān)鍵詞：環(huán)境內(nèi)分泌干擾物雙酚A對(duì)大鼠海馬LTP的影響

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【摘要】：雙酚A(biphenol A, BPA),是一種具有雙重作用的激素類(lèi)物質(zhì),它的雙重作用是指能夠產(chǎn)生擬雌激素和抗雌激素的效應(yīng)。BPA作為一種非常典型環(huán)境內(nèi)分泌干擾物,能夠在記憶形成過(guò)程中對(duì)突觸的可塑性和信息的儲(chǔ)存起到至關(guān)重要的作用。雌激素能夠參與大腦內(nèi)部突觸可塑性的維護(hù)并且可以直接的促進(jìn)神經(jīng)細(xì)胞突觸的形成以及軸突和樹(shù)突的產(chǎn)生、生長(zhǎng)。因?yàn)榇萍に乜膳c膜上的受體作用后通過(guò)誘導(dǎo)的各種信號(hào)分子的快速激活并產(chǎn)生相對(duì)應(yīng)的神經(jīng)保護(hù)和神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)作用。雌二醇可以影響細(xì)胞內(nèi)多種信號(hào)途徑的轉(zhuǎn)導(dǎo),并以此基礎(chǔ)上來(lái)調(diào)節(jié)學(xué)習(xí)記憶的相關(guān)功能。BPA能夠影響突觸的結(jié)構(gòu),也可以影響突觸功能的可塑性,但具體的作用機(jī)制并不清楚。本實(shí)驗(yàn)首先研究了不同濃度的BPA對(duì)長(zhǎng)時(shí)程增強(qiáng)(Long-term potentiation, LTP)的影響,接下來(lái)應(yīng)用雌激素受體阻斷劑(ICI182,780)或MEK1/2阻斷劑(U0126)預(yù)處理,用以探究雌激素受體和ERK (Extracellular signal-regulated kinases)信號(hào)通路是否參與了BPA對(duì)LTP作用的這一過(guò)程,并進(jìn)行深入的分析BPA作用于LTP的分子機(jī)制。方法：本實(shí)驗(yàn)利用電生理技術(shù)來(lái)記錄離體橫切大鼠腦片的海馬齒狀回區(qū)域的場(chǎng)興奮性突觸后電位(field Excitatory Postsnaptic potential, fEPSP)和LTP。選取清潔級(jí)的5～6周齡的雄性Wistar大鼠,將其快速斷頭,利用切片機(jī)制備成厚度為350μm的腦片,放置于持續(xù)通入95%氧氣和5%二氧化碳混合氣的人工腦脊液(Artificial Cerebrospinal fluid, ACSF)的孵育室中,室溫下提前孵育1小時(shí)后待使用時(shí)再進(jìn)行轉(zhuǎn)移。記錄時(shí)將腦片轉(zhuǎn)移到記錄槽中,利用微操縱儀將同心圓電極和玻璃記錄電極放置在海馬齒狀回區(qū)域,分別將腦片急性暴露于1、10、100、1000 nM BPA并持續(xù)以ACSF灌流,在藥物孵育30 min后在基礎(chǔ)刺激為0.033 Hz的條件下開(kāi)始記錄腦片fEPSP,30min后給予腦片參數(shù)為2串100 Hz的高頻刺激,繼續(xù)給予與高頻前相同條件的基礎(chǔ)刺激并利用pClamp10.3軟件測(cè)量fEPSP的峰值,并計(jì)算在HFS后0～60 min中的EPSP的幅值與在基礎(chǔ)刺激下30min的EPSP幅度平均值比值,作為L(zhǎng)TP的幅值。實(shí)驗(yàn)結(jié)果中的數(shù)據(jù)均以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)誤(means±S.E.M.)來(lái)表示,并進(jìn)行單因素方差分析(One-way ANOVA)和雙尾t檢驗(yàn)(two-tailed t test)。結(jié)果：1.不同濃度的BPA急性處理海馬腦片(預(yù)孵育30 min后開(kāi)始記錄并持續(xù)給藥),發(fā)現(xiàn)BPA(1～1000 nM)對(duì)高頻刺激后的峰值均有抑制作用；但100 nMBPA顯著增強(qiáng)LTP的維持(191.30±10.46%,比對(duì)照組升高34.80%,p0.01),而1000 nM BPA對(duì)LTP維持表現(xiàn)出抑制效應(yīng)(121,45±4.01%,比對(duì)照組降低15.50%,p0.05)。2.100 nM BPA對(duì)LTP的增強(qiáng)作用可以被雌激素受體阻斷劑ICI1 82,780抑制(126.75+7.12%,比BPA組降低33,89%,p0.001); MEK1/2阻斷劑U0126預(yù)處理不能誘導(dǎo)LTP,但先用BPA預(yù)孵育30 min再加入U(xiǎn)0126共同作用,BPA誘導(dǎo)的LTP增強(qiáng)作用被部分抑制(152.19+3.8%,比BPA組降低20.62%,p0.01)。3.當(dāng)100 nM BPA與10 nM 17β-E2共同處理時(shí),BPA可以完全抑制E2對(duì)基礎(chǔ)EPSP的增強(qiáng)作用(122.25±4.59%，p0.001),同時(shí)BPA對(duì)高頻刺激后LTP的增強(qiáng)作用也被抑制(134.53±4.79%,比BPA組降低29.83%,p0.001)。結(jié)論：以上研究結(jié)果說(shuō)明了,急性BPA暴露對(duì)青年雄鼠的海馬齒狀回區(qū)域的LTP具有劑量依賴(lài)的雙重作用,BPA對(duì)LTP的這種快速增強(qiáng)作用可能是由于位于細(xì)胞膜上的雌激素受體介導(dǎo)ERK信號(hào)通路進(jìn)行；但當(dāng)BPA與雌激素共同存在時(shí),卻顯示出拮抗雌激素的效應(yīng)。
【關(guān)鍵詞】：雙酚A 長(zhǎng)時(shí)程增強(qiáng) 雌激素 細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶
【學(xué)位授予單位】：浙江師范大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類(lèi)號(hào)】：R114
【目錄】：

• 摘要4-6
• 英文摘要6-10
• 符號(hào)說(shuō)明10-12
• 第一章 緒論12-20
• 1 BPA概述12-13
• 2 長(zhǎng)時(shí)程增強(qiáng)(LTP)的形成機(jī)制13-16
• 3 BPA對(duì)腦和行為發(fā)育的影響16-18
• 4 雌激素對(duì)LTP的調(diào)節(jié)作用及其信號(hào)機(jī)制18-19
• 5 本研究的目的和意義19-20
• 第二章 BPA對(duì)長(zhǎng)時(shí)程增強(qiáng)(LTP)的影響20-27
• 1 引言20
• 2 材料和方法20-25
• 3 結(jié)果25-26
• 4 討論26-27
• 第三章 BPA通過(guò)雌激素受體介導(dǎo)影響LTP27-33
• 1 引言27
• 2 材料與方法27-29
• 3 結(jié)果29-31
• 4 討論31-33
• 第四章 ERK信號(hào)通路參與BPA對(duì)LTP的影響33-40
• 1 引言33-34
• 2 材料與方法34-36
• 3 結(jié)果36-37
• 4 討論37-40
• 第五章 結(jié)論40-41
• 參考文獻(xiàn)41-57
• 致謝57-58
• 攻讀學(xué)位論文期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文目錄58-59
• 浙江師范大學(xué)學(xué)位論文誠(chéng)信承諾書(shū)59-60

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

1 王亞民;徐曉虹;張婧;羅清清;葉銀萍;;圍產(chǎn)期母鼠染毒雙酚A對(duì)雄性子代腦內(nèi)谷氨酸N-甲基-D-天冬氨酸受體發(fā)育的影響[J];生物物理學(xué)報(bào);2009年02期

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本文編號(hào)：1060892