本文關(guān)鍵詞：共軛亞油酸甘油酯檢測方法的建立及降脂功能研究

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【摘要】：目的:本研究旨在通過高脂模型大鼠干預(yù)方式探討共軛亞油酸甘油酯的降脂機(jī)制,為其降脂功效提供理論依據(jù)。并采用高效液相色譜儀-蒸發(fā)光散射檢測器(HPLC-ELSD)建立共軛亞油酸甘油酯的檢測分析方法。方法:降脂功能研究選用清潔級Sprague-Dawley(SD)大鼠72只,隨機(jī)分為6組:基礎(chǔ)對照組,高脂對照組,魚油對照組,共軛亞油酸甘油酯低(2g/kg·bw)中(4g/kg·bw)、高(6g/kg·bw)劑量組,除基礎(chǔ)對照組攝食基礎(chǔ)飼料外,其余各對照組均攝食高脂飼料,建立高脂模型,每天以灌胃方式給予大鼠受試物,每周定時稱體重,6周后大鼠麻醉處死,比較各組間體重變化;留取大鼠肝臟組織,經(jīng)HE染色后光鏡下觀察肝組織有無病理變化;檢測血清中血脂水平,血中脂肪酸組成,血糖值,血清抗氧化程度等指標(biāo)。采用高效液相色譜儀-蒸發(fā)光散射檢測器(HPLC-ELSD),用Zorbax硅膠色譜柱,正己烷-異丙醇為流動相,控制其不同配比,建立共軛亞油酸甘油酯檢測分析方法,使共軛亞油酸甘油一酯、甘油二酯和甘油三酯達(dá)到完全分離。結(jié)果:從干預(yù)第3周開始,與高脂對照組比較,共軛亞油酸甘油酯低、中、高劑量組大鼠體重開始下降,但無顯著性差異,第5、6周與高脂對照組和基礎(chǔ)對照組比較,共軛亞油酸甘油酯中、高劑量組體重顯著性下降(p0.05);肝臟HE染色后顯示,共軛亞油酸甘油酯高劑量組脂肪肝程度較高脂對照組明顯減輕,僅有少量炎性細(xì)胞浸潤;共軛亞油酸甘油酯各劑量組大鼠的脂體比和Lee’s指數(shù)與高脂對照組比較呈下降趨勢;共軛亞油酸甘油酯低、中、高劑量組TC、TG、LDL-C水平與高脂對照組比較顯著性降低,HDL-C水平顯著性升高(p0.05);與高脂對照組比較,共軛亞油酸甘油酯中、高劑量組大鼠的血清中總飽和脂肪酸、多不飽和脂肪酸水平顯著性升高,而單不飽和脂肪酸水平顯著性下降(p0.05);共軛亞油酸甘油酯各劑量組大鼠的血糖值與高脂對照組比較顯著性下降(p0.05);與高脂對照組比較,共軛亞油酸甘油酯低、中、高劑量組SOD、GSH-PX活力顯著性升高(p0.05),高劑量組MDA含量顯著性下降(p0.05)。HPLC-ELSD檢測方法下,共軛亞油酸甘油三酯、甘油二酯、甘油一酯分別在4.62min、7.78min、13.80min時間段成功分離,且分離度良好;檢測結(jié)果顯示,共軛亞油酸甘油酯樣品中三甘酯、二甘酯和單甘酯含量分別為79.8%,19.8%,0.89%;各甘油酯的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)均小于2%,方法精密度良好,甘油三酯、甘油二酯和甘油一酯的檢測限分別為0.6mg/kg、2.0mg/kg、2.5mg/kg,定量限分別為6.0mg/kg、12.0mg/kg、12.0mg/kg。結(jié)論:共軛亞油酸甘油酯能夠起到緩解脂肪肝、減肥的作用,并能控制高脂血癥、糖尿病患者的病情,減少體內(nèi)脂質(zhì)過氧化物產(chǎn)生,緩解脂質(zhì)代謝紊亂。成功建立HPLC-ELSD檢測方法,該檢測條件下共軛亞油酸甘油三酯、甘油二酯、甘油一酯分離度良好,本方法精密度、重現(xiàn)性良好,適用于共軛亞油酸甘油酯的檢測。
【關(guān)鍵詞】：共軛亞油酸甘油酯 檢測方法 降脂 脂肪酸組成 抗氧化
【學(xué)位授予單位】：青島大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R155.5
【目錄】：

• 摘要2-4
• Abstract4-8
• 引言8-10
• 第一章 共軛亞油酸甘油酯檢測方法的建立10-17
• 1 材料與方法10-11
• 1.1 主要試劑10
• 1.2 儀器及參數(shù)10
• 1.3 流動相及梯度10-11
• 1.4 樣品測定11
• 1.4.1 樣品溶液制備11
• 1.4.2 標(biāo)準(zhǔn)溶液制備11
• 2 結(jié)果11-15
• 2.1 溶劑空白對照譜圖11-12
• 2.2 標(biāo)準(zhǔn)對照品譜圖12
• 2.3 樣品測定結(jié)果12-13
• 2.4 樣品譜圖13
• 2.5 方法學(xué)驗證13-15
• 2.5.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制13-14
• 2.5.2 精密度實驗14
• 2.5.3 檢出限和定量限14-15
• 3 討論15-17
• 第二章 共軛亞油酸甘油酯對大鼠降脂功能的研究17-29
• 1 材料與方法17-19
• 1.1 實驗動物17
• 1.2 主要試劑17
• 1.3 主要儀器17
• 1.4 動物分組17-18
• 1.5 樣本采集18
• 1.5.1 體長測量18
• 1.5.2 血清采集18
• 1.5.3 肝組織采集18
• 1.5.4 脂肪采集18
• 1.6 指標(biāo)測定18-19
• 1.6.1 大鼠肝臟病理檢測18-19
• 1.6.2 血清生化指標(biāo)測定19
• 1.6.3 血清脂肪酸組成檢測19
• 1.6.4 抗氧化指標(biāo)檢測19
• 1.7 數(shù)據(jù)處理19
• 2 結(jié)果19-26
• 2.1 共軛亞油酸甘油酯對大鼠體重的影響19-21
• 2.2 大鼠肝組織光鏡下病理形態(tài)學(xué)觀察21-22
• 2.3 共軛亞油酸甘油酯對大鼠Lee’s指數(shù)和脂體比的影響22
• 2.4 共軛亞油酸甘油酯對大鼠血脂的影響22-23
• 2.5 共軛亞油酸甘油酯對大鼠血清總脂肪酸組成的影響23
• 2.6 共軛亞油酸甘油酯對單一脂肪酸組成的影響23-25
• 2.7 幾種典型脂肪酸的變化趨勢25
• 2.8 共軛亞油酸甘油酯對大鼠血糖的影響25-26
• 2.9 共軛亞油酸甘油酯對大鼠血清抗氧化水平的影響26
• 3 討論26-29
• 結(jié)論29-30
• 參考文獻(xiàn)30-34
• 綜述34-45
• 綜述參考文獻(xiàn)41-45
• 攻讀學(xué)位期間的研究成果45-46
• 致謝46-47

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本文編號：1033057