本文關(guān)鍵詞：甲醛在有無(wú)苯作用下對(duì)小鼠血液毒性的研究

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【摘要】：目的：甲醛是一種廣泛存在于工廠和環(huán)境中的高活性空氣污染物,可引發(fā)器官毒性和各種疾病。大量的流行病學(xué)和一些動(dòng)物實(shí)驗(yàn)均顯示甲醛可導(dǎo)致白血病,尤其是骨-髓性的白血病,但甲醛致白血病的詳細(xì)致病機(jī)理尚不明確。白血病是一種發(fā)生在造血系統(tǒng)的惡性畸變性疾病,而造血系統(tǒng)的細(xì)胞增殖、分化受細(xì)胞因子等因素調(diào)控。苯作為一種已知的可誘發(fā)血液毒性的空氣污染物,無(wú)論在環(huán)境中還是工廠中,常與甲醛同時(shí)出現(xiàn)。因而,本實(shí)驗(yàn)通過(guò)研究甲醛在有無(wú)苯作用下,對(duì)調(diào)控造血系統(tǒng)的細(xì)胞因子及相關(guān)血細(xì)胞的數(shù)量變化的影響,以探究甲醛在有無(wú)苯作用下對(duì)小鼠血液的毒性作用。方法：選30只SPF級(jí)健康狀況相似的BALB/c雄性小鼠,以6只為一組的隨機(jī)分為5組。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的具體分組及染毒方法：(1)空白對(duì)照組(Ctrl);(2)玉米油對(duì)照組(Oil)：以濃度為5 ml/kg bw/day的玉米油進(jìn)行灌胃；(3)苯單獨(dú)染毒組(BZ)：以濃度為150 mg/kg bw/day的苯(玉米油為溶劑)進(jìn)行灌胃；(4)甲醛單獨(dú)染毒組(FA)：以濃度為3.0 mg/m3的甲醛氣體,進(jìn)行吸入式染毒；(5)苯和甲醛聯(lián)合染毒組(BZ+FA):在暴露日的上午,先對(duì)該組小鼠進(jìn)行苯(玉米油為溶劑)灌胃,之后再進(jìn)行氣態(tài)甲醛的吸入式暴露,苯的灌胃濃度、方式以及時(shí)間與BZ組相同,氣態(tài)甲醛的暴露時(shí)間、濃度及方式和FA組一致。每天8個(gè)小時(shí),每周五天,連續(xù)兩周。染毒周期結(jié)束后,頸椎脫臼處死小鼠并進(jìn)行一系列指標(biāo)的測(cè)定和觀察。結(jié)果：1.各組小鼠的體重總體上都呈現(xiàn)上升趨勢(shì),但是甲醛組與聯(lián)合染毒組的增長(zhǎng)幅度要相對(duì)緩慢,說(shuō)明甲醛暴露影響了小鼠的生長(zhǎng)發(fā)育情況。2.在甲醛單獨(dú)染毒作用下,粒細(xì)胞、白細(xì)胞、淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞的數(shù)量都無(wú)明顯變化。而苯單獨(dú)作用及甲醛與苯聯(lián)合作用時(shí),這些細(xì)胞的的數(shù)量均顯著下降(P0.01)(相對(duì)Ctrl和Oil這兩個(gè)對(duì)照組),但是各組紅細(xì)胞的數(shù)量則大致無(wú)變化,只有苯單獨(dú)作用時(shí)相對(duì)玉米油組顯著下降(P0.05)。3.甲醛單獨(dú)作用可使細(xì)胞因子M-CSF的轉(zhuǎn)錄水平下降(P0.01),與苯聯(lián)合后,苯加強(qiáng)甲醛對(duì)細(xì)胞因子M-CSF轉(zhuǎn)錄水平的影響(可能為苯揮發(fā))。4.甲醛單獨(dú)作用可使細(xì)胞因子G-CSF的轉(zhuǎn)錄水平下降(P0.01),與苯聯(lián)合后,苯可消弱甲醛對(duì)細(xì)胞因子G-CSF轉(zhuǎn)錄水平的影響。5.甲醛單獨(dú)作用可使細(xì)胞因子EPO的轉(zhuǎn)錄水平下降(P0.01),與苯聯(lián)合后,苯可消弱甲醛對(duì)細(xì)胞因子EPO轉(zhuǎn)錄水平的影響。結(jié)論：一定濃度下,甲醛單獨(dú)作用可在一定程度上對(duì)小鼠產(chǎn)生血液毒性效應(yīng),苯存在時(shí),則可消弱甲醛的毒性作用。
【關(guān)鍵詞】：甲醛 苯 血液毒性 細(xì)胞因子
【學(xué)位授予單位】：華中師范大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R114
【目錄】：

• 摘要6-8
• Abstract8-12
• 1. 緒論12-24
• 1.1 甲醛及其造血毒性12-18
• 1.1.1 甲醛的概況12-14
• 1.1.2 甲醛的血液毒性研究14-18
• 1.2 苯及其造血毒性18-21
• 1.2.1 苯的概況18-20
• 1.2.2 苯的血液毒性研究20-21
• 1.3 造血系統(tǒng)的調(diào)控21-22
• 1.4 選題目的及意義22-24
• 2 材料與方法24-32
• 2.1 實(shí)驗(yàn)材料24-26
• 2.1.1 實(shí)驗(yàn)對(duì)象24
• 2.1.2 實(shí)驗(yàn)儀器24
• 2.1.3 主要實(shí)驗(yàn)試劑及試劑盒24-25
• 2.1.4 主要實(shí)驗(yàn)試劑的配制方法25-26
• 2.2 實(shí)驗(yàn)方法26-32
• 2.2.1 氣態(tài)甲醛的發(fā)生及暴露方案26
• 2.2.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組及暴露方法26-28
• 2.2.3 小鼠體重的測(cè)定28
• 2.2.4 全血細(xì)胞的測(cè)定28
• 2.2.5 總RNA的提取28
• 2.2.6 將RNA反轉(zhuǎn)錄成cDNA28-29
• 2.2.7 RT-PCR(半定量)法測(cè)定細(xì)胞因子M-CSF、G-CSF和EPO轉(zhuǎn)錄水平·29-30
• 2.2.8 實(shí)時(shí)熒光定量PCR(Real-time PCR)測(cè)定細(xì)胞因子M-CSF、G-CSF和EPO轉(zhuǎn)錄水平30-31
• 2.2.9 實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)31-32
• 3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果及分析32-42
• 3.1 小鼠體重變化32-33
• 3.2 小鼠全血細(xì)胞的測(cè)定33-34
• 3.3 總RNA提取的結(jié)果34-35
• 3.3.1 骨髓中總RNA提取的質(zhì)量34-35
• 3.3.2 腎臟中總RNA提取的質(zhì)量35
• 3.4 RT-PCR(半定量)法測(cè)定細(xì)胞因子M-CSF、G-CSF和EPO轉(zhuǎn)錄水平的結(jié)果35-36
• 3.4.1 RT-PCR(半定量)法測(cè)定細(xì)胞因子M-CSF轉(zhuǎn)錄水平的含量35
• 3.4.2 RT-PCR(半定量)法測(cè)定細(xì)胞因子G-CSF轉(zhuǎn)錄水平的含量35-36
• 3.4.3 RT-PCR(半定量)法測(cè)定細(xì)胞因子EPO轉(zhuǎn)錄水平的含量36
• 3.5 實(shí)時(shí)熒光定量PCR(REAL-TIME PCR)測(cè)定細(xì)胞因子M-CSF、G-CSF和EPO轉(zhuǎn)錄水平的結(jié)果36-42
• 3.5.1 實(shí)時(shí)熒光定量PCR(Real-time PCR)的條件分析36-38
• 3.5.2 實(shí)時(shí)熒光定量PCR(Real-time PCR)測(cè)定細(xì)胞因子M-CSF轉(zhuǎn)錄水平含量38-39
• 3.5.3 實(shí)時(shí)熒光定量PCR(Real-time PCR)測(cè)定細(xì)胞因子G-CSF轉(zhuǎn)錄水平含量39-40
• 3.5.4 實(shí)時(shí)熒光定量PCR(Real-time PCR)測(cè)定細(xì)胞因子EPO轉(zhuǎn)錄水平含量40-42
• 4 討論42-45
• 4.1 甲醛與苯的在生物機(jī)體內(nèi)的代謝過(guò)程42-43
• 4.2 甲醛在有無(wú)苯作用下小鼠的體重變化的影響43
• 4.3 甲醛在有無(wú)苯作用下對(duì)血液細(xì)胞數(shù)量的影響43-44
• 4.4 甲醛在有無(wú)作用下對(duì)細(xì)胞因子M-CSF、G-CSF及EPO轉(zhuǎn)錄水平的影響44-45
• 5 結(jié)論與展望45-46
• 參考文獻(xiàn)46-54
• 附錄54-55
• 攻讀學(xué)位期間論文發(fā)表情況55-56
• 致謝56

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本文編號(hào)：1005323