本文關(guān)鍵詞：雌激素對(duì)髓鞘再生的影響及機(jī)制研究

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【摘要】：目的:評(píng)價(jià)雌激素對(duì)髓鞘再生的影響并探討其可能的機(jī)制,為脫髓鞘疾病損傷的治療提供新的思路。方法:66只雌性6周齡C57 BL/6小鼠適應(yīng)性喂養(yǎng)一周后,隨機(jī)分為6組(n=11):正常組、脫髓鞘模型組、自然恢復(fù)組(脫髓鞘后自然恢復(fù)2周)、雌激素治療組(脫髓鞘后雌二醇E2(5mg/kg體重,治療2周)、卵巢去勢(shì)組(脫髓鞘后卵巢去勢(shì),2周后觀察)和假手術(shù)組(脫髓鞘后假手術(shù),2周后觀察)。小鼠脫髓鞘模型以0.2%Cuprizone(CPZ)混合飼料連續(xù)飼喂6周方式誘導(dǎo)。通過(guò)免疫組織化學(xué)染色方法檢測(cè)小鼠腦組織內(nèi)髓鞘堿性蛋白MBP(Myelin basic protein)的表達(dá),評(píng)價(jià)髓鞘脫失及再生的程度;以行為學(xué)實(shí)驗(yàn)方法檢測(cè)激素治療對(duì)小鼠運(yùn)動(dòng)能力的影響;以western blot技術(shù)及免疫組化實(shí)驗(yàn)方法檢測(cè)小鼠腦組織內(nèi)MBP、少突膠質(zhì)細(xì)胞前期細(xì)胞標(biāo)記物NG2(nerve glial antigen 2)、少突膠質(zhì)細(xì)胞轉(zhuǎn)錄因子2 Olig2(oligodendrocyte transcription factor 2)、星形膠質(zhì)細(xì)胞標(biāo)記物GFAP(glial fibrillary acidic protein)的表達(dá)情況,旨在探討雌激素對(duì)髓鞘再生的影響及其可能的機(jī)制。結(jié)果:1動(dòng)物模型制作免疫組織化學(xué)檢測(cè)顯示,正常組小鼠胼胝體區(qū)MBP染色深,結(jié)構(gòu)均勻致密(平均光密度值為0.18±0.05),而脫髓鞘模型組(平均光密度值為0.08±0.04)MBP染色較淺,結(jié)構(gòu)松散、稀疏,塊狀不均勻,表達(dá)較正常組顯著降低(P0.05),證實(shí)脫髓鞘模型建立成功。脫髓鞘小鼠卵巢去勢(shì)后經(jīng)連續(xù)陰道涂片(連續(xù)5天)HE染色,鏡下可見(jiàn)大量白細(xì)胞,無(wú)角化的上皮細(xì)胞,即小鼠處于發(fā)情間期,證實(shí)卵巢去勢(shì)模型建立成功。2體重變化正常組小鼠體重逐漸緩慢增長(zhǎng),CPZ誘導(dǎo)小鼠脫髓鞘過(guò)程中前2周小鼠體重急劇下降,之后緩慢增長(zhǎng),但體重始終低于同齡正常組;停止CPZ飼喂后給予E2治療組小鼠體重比自然恢復(fù)組小鼠及卵巢去勢(shì)組小鼠體重明顯增加(P0.05)。3運(yùn)動(dòng)能力檢測(cè)在旋轉(zhuǎn)棒實(shí)驗(yàn)中,脫髓鞘模型組小鼠在旋轉(zhuǎn)棒上的維持時(shí)間明顯短于正常組小鼠(P0.05);自然恢復(fù)組較脫髓鞘模型組在棒上的時(shí)間延長(zhǎng)(P0.05);給予雌激素治療后小鼠在棒上的維持時(shí)間較自然恢復(fù)組小鼠延長(zhǎng)(P0.05);卵巢去勢(shì)組小鼠在棒上的維持時(shí)間與自然恢復(fù)組相比未見(jiàn)顯著差異(P0.05),假手術(shù)組小鼠在棒上的維持時(shí)間與自然恢復(fù)組相比未見(jiàn)顯著差異(P0.05)。4免疫組化結(jié)果正常組、脫髓鞘模型組、自然恢復(fù)組及卵巢去勢(shì)組在小鼠胼胝體區(qū)均僅可見(jiàn)NG2陽(yáng)性細(xì)胞(在胞漿表達(dá)),即少突膠質(zhì)細(xì)胞前體細(xì)胞。脫髓鞘模型組NG2陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)較正常組增多(P0.05);自然恢復(fù)組與脫髓鞘模型組NG2陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)組間未見(jiàn)明顯差異(P0.05);雌激素治療組NG2陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)量較自然恢復(fù)組明顯增多(P0.05),提示給予雌激素治療后少突膠質(zhì)細(xì)胞前體細(xì)胞增殖;卵巢去勢(shì)組與自然恢復(fù)組之間未見(jiàn)明顯差異(P0.05),假手術(shù)組與自然恢復(fù)組之間未見(jiàn)明顯差異(P0.05)。正常組小鼠腦胼胝體區(qū)可見(jiàn)少量Olig2、GFAP陽(yáng)性細(xì)胞(在胞漿表達(dá)),脫髓鞘模型組Olig2、GFAP陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)較正常組顯著增多(P0.05),自然恢復(fù)組及卵巢去勢(shì)組Olig2、GFAP陽(yáng)性細(xì)胞較脫髓鞘組減少(P0.05),但仍比正常組多,給予雌激素治療2周后Olig2、GFAP陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)較脫髓鞘顯著減少(P0.05),已接近正常組陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)量;假手術(shù)組與自然恢復(fù)組之間未見(jiàn)明顯差異(P0.05)。5 western blot檢測(cè)結(jié)果正常組、脫髓鞘模型組、自然恢復(fù)組及卵巢去勢(shì)組均有NG2少量表達(dá);脫髓鞘模型組較正常組NG2表達(dá)增多(P0.05);自然恢復(fù)組NG2與脫髓鞘模型組比較未見(jiàn)明顯差異(P0.05);雌激素治療組NG2表達(dá)較自然恢復(fù)組明顯增多(P0.05);卵巢去勢(shì)組NG2表達(dá)低于自然恢復(fù)組(P0.05)。正常組小鼠腦組織Olig2、GFAP有少量表達(dá),脫髓鞘模型組Olig2、GFAP表達(dá)較正常組顯著增多(P0.05),給予雌激素治療后,Olig2、GFAP表達(dá)明顯下降(P0.05)。自然恢復(fù)組及卵巢去勢(shì)組Olig2、GFAP表達(dá)也較脫髓鞘組減少(P0.05);卵巢去勢(shì)組與自然恢復(fù)組比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論:雌激素對(duì)髓鞘再生具有促進(jìn)作用。其可能的機(jī)制是通過(guò)促進(jìn)少突膠質(zhì)細(xì)胞前體細(xì)胞的增殖,誘發(fā)少突膠質(zhì)細(xì)胞成熟分化以增強(qiáng)髓鞘再生,并且通過(guò)抑制星形膠質(zhì)細(xì)胞增殖來(lái)減少膠質(zhì)瘢痕形成,減少瘢痕屏障,使髓鞘再生能夠順利進(jìn)行。
【關(guān)鍵詞】：Cuprizone 雌激素 脫髓鞘模型 卵巢去勢(shì) MBP GFAP NG2 Olig2
【學(xué)位授予單位】：河北醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類(lèi)號(hào)】：R965
【目錄】：

• 摘要4-7
• ABSTRACT7-10
• 英文縮寫(xiě)10-11
• 前言11-12
• 材料與方法12-20
• 結(jié)果20-24
• 附圖24-37
• 附表37-40
• 討論40-43
• 結(jié)論43
• 參考文獻(xiàn)43-47
• 綜述 雌激素對(duì)中樞神經(jīng)系統(tǒng)損傷保護(hù)的研究現(xiàn)狀47-61
• 參考文獻(xiàn)53-61
• 致謝61-62
• 個(gè)人簡(jiǎn)歷62-63

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

1 王嘯;徐又佳;;鐵、雌激素與骨代謝“鐵三角”關(guān)系[J];中華骨質(zhì)疏松和骨礦鹽疾病雜志;2013年04期

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本文編號(hào)：711860