本文關(guān)鍵詞：七氟醚對(duì)小鼠基底前腦GABA能神經(jīng)元的作用及機(jī)制研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:全身麻醉藥(簡(jiǎn)稱全麻藥)作用機(jī)制尚未完全闡明�，F(xiàn)階段認(rèn)為:在哺乳動(dòng)物中樞神經(jīng)系統(tǒng)中,全麻藥興奮腦內(nèi)抑制性γ-氨基丁酸(γ-aminobutyric acid,GABA)能神經(jīng)元,增強(qiáng)GABAA受體介導(dǎo)的抑制作用,抑制中樞覺醒相關(guān)型神經(jīng)元發(fā)揮全身麻醉效應(yīng)。研究發(fā)現(xiàn)基底前腦皮層投射型GABA能神經(jīng)元具有促覺醒的作用,據(jù)此推測(cè)這類覺醒相關(guān)型GABA能神經(jīng)元可能是全麻藥作用的靶點(diǎn)之一。本課題擬在離體電生理水平上研究臨床常用吸入型麻醉藥七氟醚對(duì)基底前腦皮層投射型GABA能神經(jīng)元,及與全身麻醉關(guān)系密切的GABA能與谷氨酸能信號(hào)的作用。為進(jìn)一步揭示全麻藥的作用機(jī)制提供科學(xué)依據(jù)和基礎(chǔ)研究。方法:利用GAD67-GFP小鼠制備急性基底前腦離體腦片。采用細(xì)胞電生理膜片鉗技術(shù)研究(1)在全細(xì)胞記錄電流鉗模式下,七氟醚對(duì)基底前腦中兩種不同亞型的皮層投射型GABA能神經(jīng)元(BF small Ih和BF large Ih GABA能神經(jīng)元)活性的作用。(2)在全細(xì)胞記錄電壓鉗模式下,七氟醚對(duì)BF small Ih和BF large Ih GABA能神經(jīng)元興奮性遞質(zhì)傳入和抑制性遞質(zhì)傳入的影響。結(jié)果:(1)150μM七氟醚(灌流5 min)未引起B(yǎng)F small Ih和BF large Ih GABA能神經(jīng)元?jiǎng)幼麟娢蛔园l(fā)放頻率明顯變化;500μM七氟醚(灌流5 min)明顯降低BF small Ih和BF large Ih GABA能神經(jīng)元?jiǎng)幼麟娢蛔园l(fā)放頻率;1.5 m M七氟醚(灌流5 min)則完全抑制BF small Ih和BF large Ih GABA能神經(jīng)元?jiǎng)幼麟娢蛔园l(fā)放。(2)在河豚毒素(tetrodotoxin,TTX)存在時(shí),500μM七氟醚(灌流5 min)不能引起B(yǎng)F small Ih和BF large Ih GABA能神經(jīng)元膜電位改變。(3)500μM七氟醚(灌流3 min)可引起B(yǎng)F small Ih GABA能神經(jīng)元自發(fā)性抑制性突觸后電流(spontaneous inhibitory postsynapatic currents,s IPSCs)和迷你抑制性突觸后電流(miniature inhibitory postsynapatic currents,m IPSCs)頻率增快以及幅度增大。但BF large Ih GABA能神經(jīng)元僅見s IPSCs和m IPSCs幅度增大。(4)500μM七氟醚(灌流3 min)引起B(yǎng)F small Ih GABA能神經(jīng)元自發(fā)性興奮性突觸后電流(spontaneous excitatory postsynapatic currents,s EPSCs)頻率減慢及幅度縮小;但卻BF large Ih GABA能神經(jīng)元s EPSCs頻率增快;對(duì)二者的迷你興奮性突觸后電流(miniature excitatory postsynapatic currents,m EPSCs)均無影響。結(jié)論:七氟醚對(duì)BF small Ih GABA能神經(jīng)元具有抑制作用,這種作用可能是是通過影響突觸前GABA囊泡釋放特性和突觸后膜GABAA受體開放特性引起抑制性遞質(zhì)傳入增強(qiáng)、以及通過影響局部谷氨酸能神經(jīng)元活性引起動(dòng)作電位依賴的興奮性遞質(zhì)傳入減弱而實(shí)現(xiàn)的;七氟醚同樣對(duì)BF large Ih GABA能神經(jīng)元具有抑制作用,而這種作用則可能是通過影響突觸后膜GABAA受體開放特性引起抑制性遞質(zhì)傳入增強(qiáng)實(shí)現(xiàn)的。推測(cè)吸入型全麻藥七氟醚抑制BF small Ih和large Ih兩類與覺醒相關(guān)的皮層投射型GABA能神經(jīng)元是其發(fā)揮全麻效應(yīng)的機(jī)制之一。
【關(guān)鍵詞】：七氟醚 基底前腦 GABA能神經(jīng)元 膜片鉗技術(shù)
【學(xué)位授予單位】：皖南醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R965
【目錄】：

• 中英文縮略詞對(duì)照表5-9
• 摘要9-11
• ABSTRACT11-13
• 前言13-15
• 材料與方法15-23
• 1. 材料15-17
• 1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物15
• 1.2 主要試劑15-16
• 1.3 主要儀器16-17
• 2. 方法17-21
• 2.1 人工腦脊液和電極Qg液的配制17-18
• 2.2 微電極拉制18
• 2.3 制備含有基底前腦區(qū)域的急性離體腦片18-19
• 2.4 全細(xì)胞記錄模式19
• 2.5 電信號(hào)采集過程19-20
• 2.6 給藥方法20
• 2.7 電生理數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析20-21
• 3. 技術(shù)流程圖21-23
• 3.1 實(shí)驗(yàn)流程簡(jiǎn)圖21-22
• 3.2 電流鉗模式下記錄動(dòng)作電位和膜電位22
• 3.3 電壓鉗模式下記錄突觸后電流22-23
• 結(jié)果23-42
• 1. 皮層投射型BF GABA能神經(jīng)元的鑒定與分型23-24
• 2. 七氟醚對(duì)BF GABA能神經(jīng)元活性的作用24-29
• 3. 七氟醚對(duì)BF GABA能神經(jīng)元突觸后電流的作用29-42
• 討論42-47
• 結(jié)論47-48
• 參考文獻(xiàn)48-53
• 綜述 153-65
• 參考文獻(xiàn)60-65
• 綜述 265-72
• 參考文獻(xiàn)69-72
• 作者簡(jiǎn)介及讀研期間主要科研成果72-73
• 致謝73-74

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本文編號(hào)：441993