目的:甘氨酸受體（Glycine receptors,GlyRs）是由α（α1-α4）亞基和β亞基組成的五聚體蛋白。在成年動物的脊髓背角中,包含α1亞基的甘氨酸受體介導(dǎo)的抑制性突觸傳遞,在痛覺調(diào)控中發(fā)揮著重要作用。α1亞基存在一種異構(gòu)體,即α1^ins。資料顯示:在炎性疼痛發(fā)生后,腺苷能夠顯著增強(qiáng)甘氨酸受體的功能,緩解動物的疼痛反應(yīng),然而到目前為止,腺苷調(diào)節(jié)甘氨酸受體的機(jī)制尚不明確。本研究旨在探索腺苷對甘氨酸受體α1^ins亞基的調(diào)控作用。方法:本研究足底注射完全弗氏佐劑（Complete Freund’s adjuvant,CFA）建立炎性疼痛模型,通過行為學(xué)實驗測定動物的疼痛閾值,研究腺苷對炎性疼痛誘發(fā)的痛覺超敏和痛覺過敏的影響;通過免疫組織化學(xué)和免疫細(xì)胞化學(xué)方法,確定α1^ins亞基在脊髓神經(jīng)元中的分布;通過膜片鉗電生理學(xué)記錄方法,研究腺苷對甘氨酸受體電流的影響;通過免疫印跡分析,研究腺苷對α1^ins亞基第380位絲氨酸殘基（Ser380）和細(xì)胞外信號調(diào)節(jié)激酶1/2（Extracellular sig...

【文章頁數(shù)】：48 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
Abstract
縮略詞
第一章 前言
    1.1 甘氨酸受體
        1.1.1 甘氨酸受體的結(jié)構(gòu)與特性
        1.1.2 甘氨酸受體的功能調(diào)控與疼痛
        1.1.3 蛋白激酶
    1.2 腺苷受體
        1.2.1 腺苷受體的結(jié)構(gòu)與特性
        1.2.2 A1型腺苷受體與疼痛
    1.3 Gi蛋白的結(jié)構(gòu)與特性
    1.4 假設(shè)
第二章 實驗材料和方法
    2.1 實驗材料
        2.1.1 實驗動物
        2.1.2 實驗儀器與器材
        2.1.3 實驗藥物與試劑
        2.1.4 抗體
        2.1.5 實驗溶液及配制
    2.2 實驗方法和步驟
        2.2.1 行為學(xué)測定
        2.2.2 炎性疼痛模型建立
        2.2.3 鞘內(nèi)給藥
        2.2.4 動物麻醉
        2.2.5 蛋白樣品制備
        2.2.6 蛋白免疫印跡(Western blot)
        2.2.7 細(xì)胞培養(yǎng)和轉(zhuǎn)染
        2.2.8 脊髓片制備
        2.2.9 電生理膜片鉗記錄
        2.2.10 免疫組織化學(xué)染色
        2.2.11 免疫細(xì)胞化學(xué)染色
    2.3 數(shù)據(jù)統(tǒng)計
第三章 實驗結(jié)果
    3.1 腺苷對CFA誘發(fā)的炎性疼痛的影響
        3.1.1 腺苷對CFA誘發(fā)的痛覺超敏的影響
        3.1.2 腺苷對CFA誘發(fā)的痛覺過敏的影響
    3.2 腺苷對甘氨酸受體電流的影響
        3.2.1 腺苷增強(qiáng)甘氨酸受體的電流幅值
        3.2.2 腺苷促進(jìn)甘氨酸能突觸傳遞
    3.3 腺苷對甘氨酸受體α1剪接異構(gòu)體的調(diào)節(jié)作用
        3.3.1 A1Rs對α1亞基的調(diào)節(jié)作用
        3.3.2 A1Rs對 α1^ins亞基的調(diào)節(jié)作用
        3.3.3 A1Rs對α1與配體親和力的影響
    3.4 甘氨酸受體α1^ins亞基在脊髓背角中的分布
        3.4.1 α1^ins亞基表達(dá)于脊髓背角神經(jīng)元
        3.4.2 α1^ins亞基的突觸分布
    3.5 腺苷調(diào)節(jié)甘氨酸受體α1^ins亞基的信號通路
        3.5.1 cAMP-依賴性蛋白激酶(PKA)通路在腺苷調(diào)節(jié)α1^ins中的作用
        3.5.2 Gβγ通路在腺苷調(diào)節(jié)α1^ins中的作用
    3.6 腺苷對α1^ins亞基磷酸化的作用
        3.6.1 A1Rs對脊髓背角ERK1/2 磷酸化水平的影響
        3.6.2 腺苷對α1^ins亞基Ser380 磷酸化水平的影響
        3.6.3 A1Rs對 α1^ins亞基Ser380 磷酸化水平的影響
第四章 討論
第五章 結(jié)論與展望
    5.1 結(jié)論
    5.2 展望
參考文獻(xiàn)
在學(xué)期間的研究成果
致謝



本文編號：4034997