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醋豆降壓肽的制備及其降壓活性研究

發(fā)布時(shí)間:2025-01-01 06:58
  血管緊張素轉(zhuǎn)化酶抑制劑(ACEI)為臨床常用抗高血壓藥物之一,其可通過減少血管緊張素II(Ang II)的生成和抑制緩激肽(BK)的降解而發(fā)揮降壓作用,然而卻可能存在咳嗽、味覺功能紊亂、皮疹及白細(xì)胞減少等副作用。食源性ACE抑制肽具有作用溫和、安全性高且對(duì)正常人群血壓無(wú)影響等特點(diǎn)而備受關(guān)注。雄黑豆為豆科植物大豆(Glycine max(L.)merr)的黑色種子,常用于治療頭暈?zāi)繎摇㈥幪摕┛、水腫尿少等。醋豆是以整粒黑豆為原料,經(jīng)食醋制漬而成,為民間常用降壓驗(yàn)方。黑豆中蛋白質(zhì)含量高達(dá)36~40%,其多肽具有ACE抑制活性,且具有易消化吸收性和高溶解性等特點(diǎn),因此我們推測(cè)多肽組分可能是醋豆降壓的重要藥效物質(zhì)基礎(chǔ)之一。然而醋制對(duì)黑豆蛋白含量與組成及多肽ACE抑制活性的影響尚未有詳細(xì)報(bào)道。本論文以雄黑豆為研究對(duì)象,考察醋制對(duì)其蛋白含量與組成及多肽ACE抑制活性的影響,篩選適宜蛋白組分。通過酶解法獲得ACE抑制肽,然后采用超濾(UF)、離子交換色譜(IEC)及反相高效液相色譜(RP-HPLC)法進(jìn)行分離純化,并采用液質(zhì)聯(lián)用技術(shù)(HPLC-ESI-MS/MS)對(duì)高活性組分進(jìn)行氨基酸序列鑒定。所獲多...

【文章頁(yè)數(shù)】:78 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【部分圖文】:

圖2黑豆蛋白質(zhì)SDS-PAGE電泳圖譜??39??

圖2黑豆蛋白質(zhì)SDS-PAGE電泳圖譜??39??

3.2醋制對(duì)黑豆蛋白質(zhì)分子量分布的影響??采用SDS-PAGE對(duì)醋制前后黑豆4類蛋白組分的分子量分布情況進(jìn)行分析,??電泳圖譜如圖2所示。與醋制前相比,清蛋白約70?KD、50?KD和37?KD的條帶??消失;球蛋白約37?KD和30?KD條帶已消失;醇溶蛋白在10-97.4?K....


圖3醋制對(duì)黑豆多肽ACE抑制活性的影響(S±\n=3)??4討論與小結(jié)??

圖3醋制對(duì)黑豆多肽ACE抑制活性的影響(S±\n=3)??4討論與小結(jié)??

3.3醋制對(duì)黑豆ACE抑制肽活性的影響??采用胃蛋白酶對(duì)醋制7?d和14?d后黑豆所得各蛋白組分進(jìn)行水解,超濾后收??集濾過液,其小分子多肽(S?3KD)組分ACE抑制活性的變化如圖3所示。對(duì)??于清蛋白,原材料來源的多肽其ACE抑制率為20.42%,醋制7?d后活性沒有明??顯....


圖4醋豆谷蛋白水解度變化??45??

圖4醋豆谷蛋白水解度變化??45??

底物濃度2%,酶與底物濃度比1:?10。考察水解2、4、6、8、10?h后所得??小分子肽3KD)組分的ACE抑制活性及相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)的水解度,以確定堿性??蛋白酶對(duì)醋豆谷蛋白的水解時(shí)間。水解度測(cè)定結(jié)果如圖4所示,水解2?h后水解??度高達(dá)54.00%,隨著水解時(shí)間的延長(zhǎng)水解度呈增大....


圖5醋豆谷蛋白多肽ACE抑制活性變化??4討論與小結(jié)??

圖5醋豆谷蛋白多肽ACE抑制活性變化??4討論與小結(jié)??

??所得相應(yīng)小分子肽(S?3KD)組分的ACE抑制活性如圖5所示。水解2-10?h??內(nèi),多肽組分活性先增加后下降,活性最高的為水解4?h,抑制率為46.02?±?0.99%,??與水解48?h所得小分子肽的ACE抑制活性(47.47?±?1.08%)無(wú)顯著性差異(p?>??0_....



本文編號(hào):4022209

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