卵巢癌是女性生殖系統(tǒng)中最致命的惡性腫瘤,嚴(yán)重威脅著婦女的生命健康安全。且患病初期癥狀隱匿并伴有腹膜的轉(zhuǎn)移,給卵巢癌的診斷和治療帶來了極大的困難。臨床常用的治療手段有手術(shù)治療、放療、化療等。然而,由于手術(shù)治療易殘存腫瘤細(xì)胞、腫瘤對放療的敏感性有限、化療易產(chǎn)生耐藥性等缺點(diǎn),往往導(dǎo)致治療的失敗。為了解決上述問題,聯(lián)合治療在抗腫瘤治療方面成為研究的熱點(diǎn)�；诖�,本課題構(gòu)建了一種多功能靶向抗腫瘤納米給藥系統(tǒng)（Lipo/HMME/ACF@MnO₂-AS1411）,將該系統(tǒng)聯(lián)合超聲治療（Ultrasound,US）具有以下優(yōu)勢:（1）利用PEG一步還原法完成了脂質(zhì)體表面的修飾;（2）具有pH/GSH/US三重刺激響應(yīng)控釋的特性;（3）聲動力治療（HMME）和HIF-1α抑制劑（ACF）的有機(jī)結(jié)合可以有效提高抗腫瘤效果;（4）AS1411的主動靶向性使得藥物可以有效蓄集于腫瘤部位,且可以提高納米系統(tǒng)的分散性和生物相容性;（5）MnO₂被腫瘤微環(huán)境降解為Mn²⁺可用于增強(qiáng)磁共振成像。相關(guān)研究如下:1、Lipo/HMME/ACF@MnO

【文章頁數(shù)】：93 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
英文縮略詞表
第1章 引言
第2章 Lipo/HMME/ACF@MnO₂-AS1411的制劑學(xué)研究
    1 儀器與試劑
        1.1 儀器
        1.2 試劑
    2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.1 空白脂質(zhì)體的制備
        2.2 空白脂質(zhì)體的制備處方篩選
            2.2.1 磷脂和膽固醇的比例
            2.2.2 孵育溫度
            2.2.3 探超時(shí)間
        2.3 Lipo/HMME/ACF的制備
        2.4 Lipo/HMME/ACF的制備處方篩選
            2.4.1 孵育溫度
            2.4.2 孵育時(shí)間
            2.4.3 藥脂比
        2.5 Lipo/HMME/ACF@MnO₂的制備
        2.6 Lipo/HMME/ACF@MnO₂-AS1411的制備
        2.7 HMME和ACF含量測定方法的建立
            2.7.1 檢測波長的確定
            2.7.2 色譜條件
            2.7.3 專屬性考察
            2.7.4 標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立
            2.7.5 準(zhǔn)確度考察
            2.7.6 精密度考察
        2.8 包封率的測定
        2.9 脂質(zhì)體的性質(zhì)考察
            2.9.1 穩(wěn)定性
            2.9.2 粒徑分布及Zeta電位的考察
            2.9.3 透射電鏡(TEM)、元素分布(Mapping)及元素分析(EDX)
            2.9.4 紫外全波長掃描圖(UV)
            2.9.5 凝膠電泳分析
        2.10 體外釋藥行為的考察
        2.11 體外MRI考察
        2.12 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
    3 結(jié)果與討論
        3.1 空白脂質(zhì)體的制備處方篩選
            3.1.1 磷脂和膽固醇的比例
            3.1.2 孵育溫度
            3.1.3 探超時(shí)間
            3.1.4 空白脂質(zhì)體的最優(yōu)制備處方
        3.2 Lipo/HMME/ACF的制備處方篩選
            3.2.1 孵育溫度
            3.2.2 孵育時(shí)間
            3.2.3 藥脂比
            3.2.4 Lipo/HMME/ACF的最優(yōu)制備處方
        3.3 HMME和ACF含量HPLC測定方法
            3.3.1 檢測波長的確定
            3.3.2 專屬性考察
            3.3.3 標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立
            3.3.4 準(zhǔn)確度考察
            3.3.5 精密度考察
        3.4 包封率的測定
        3.5 脂質(zhì)體的性質(zhì)考察
            3.5.1 穩(wěn)定性
            3.5.2 粒徑分布及zeta電位的考察
            3.5.3 透射電子顯微鏡(TEM)、元素分布(Mapping)及元素分析(EDX)
            3.5.4 紫外可見全波長掃描(UV-Vis)
            3.5.5 凝膠電泳分析
            3.5.6 體外釋藥行為
            3.5.7 體外MRI考察
    4 本章小結(jié)
第3章 Lipo/HMME/ACF@MnO₂-AS1411的體外抗腫瘤活性研究
    1 儀器和試劑
        1.1 儀器
        1.2 試劑
    2 實(shí)驗(yàn)所需溶液的配制
        2.1 PBS的配制
        2.2 含血清培養(yǎng)基的配制
        2.3 細(xì)胞凍存液的配制
        2.4 1%乙酸溶液的配制
        2.5 4%SRB溶液的配制
        2.6 50%TCA溶液的配制
        2.7 10mM Tris堿液的配制
    3 實(shí)驗(yàn)方法
        3.1 細(xì)胞培養(yǎng)
            3.1.1 細(xì)胞培養(yǎng)前的準(zhǔn)備
            3.1.2 細(xì)胞傳代
            3.1.3 細(xì)胞計(jì)數(shù)
        3.2 細(xì)胞攝取
        3.3 細(xì)胞抑制率考察
            3.3.1 SRB法檢測抑制率
            3.3.2 Lipo@MnO₂、HMME和ACF在常氧和乏氧條件下的細(xì)胞毒性
            3.3.3 Lipo/HMME/ACF@MnO₂-AS1411的細(xì)胞抑制率
        3.4 單細(xì)胞凝膠電泳
        3.5 細(xì)胞凋亡
        3.6 qPCR測定VEGFmRNA的表達(dá)
        3.7 Westernblotting實(shí)驗(yàn)
    4 結(jié)果與討論
        4.1 細(xì)胞攝取
        4.2 細(xì)胞抑制率考察
        4.3 單細(xì)胞凝膠電泳
        4.4 細(xì)胞凋亡
        4.5 qPCR測定VEGF mRNA的表達(dá)
        4.6 Western blotting實(shí)驗(yàn)
    5 本章小結(jié)
第4章 Lipo/HMME/ACF@MnO₂-AS1411的體內(nèi)抗腫瘤活性研究
    1 儀器與試劑
        1.1 儀器
        1.2 試劑
        1.3 實(shí)驗(yàn)動物
    2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.1 荷瘤裸鼠模型的建立
        2.2 Lipo/HMME/ACF@MnO₂-AS1411在裸鼠體內(nèi)的組織分布研究
            2.2.1 IR780含量測定方法的建立
            2.2.2 Lipo/IR780@MnO₂-AS1411的制備
            2.2.3 Lipo/IR780@MnO₂-AS1411在裸鼠體內(nèi)的組織分布
        2.3 Lipo/HMME/ACF@MnO₂-AS1411體內(nèi)抗腫瘤活性研究
            2.3.1 腫瘤生長抑制的藥效學(xué)考察
            2.3.2 HE染色病理切片考察
            2.3.3 TUNEL凋亡考察
        2.4 體內(nèi)磁共振成像圖
    3 結(jié)果與討論
        3.1 IR780標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立
        3.2 Lipo/HMME/ACF@MnO₂-AS1411在裸鼠體內(nèi)的組織分布研究
        3.3 體內(nèi)抗腫瘤活性考察
            3.3.1 荷瘤裸鼠瘤體積和體重變化
            3.3.2 HE染色病理切片
            3.3.3 TUNEL凋亡
        3.4 體內(nèi)磁共振成像圖
    4 本章小結(jié)
第5章 全文總結(jié)
參考文獻(xiàn)
個(gè)人簡介
致謝



本文編號：4021211