研究背景超極化激活環(huán)核苷酸門控陽離子通道(HCN通道)屬于電壓門控型離子通道超家族,具有獨特的電生理功能。在哺乳動物體內(nèi),HCN通道共有4個亞型,HCN1-HCN4,不同亞型HCN通道廣泛分布于心血管和神經(jīng)系統(tǒng)并參與不同的生理過程。闡明胞內(nèi)信號通路調(diào)控HCN通道的作用機制和新型抑制劑的發(fā)現(xiàn)對于解析通道功能和靶向HCN通道的藥物開發(fā)具有重要的意義。磷脂酰肌醇4.5-二磷酸(PIP2)是最重要的膜磷脂之一,主要分布在胞膜上,其水平可被多種受體和胞內(nèi)信號通道調(diào)節(jié)。近年研究表明,PIP2調(diào)節(jié)多類離子通道功能,本課題的研究內(nèi)容之一為探索PIP2及其下游信號通路PI3K/PIP3是否調(diào)控HCN通道功能;此外,HCN通道在控制心臟和神經(jīng)系統(tǒng)中的起搏活動中起關鍵作用,因此,HCN通道已成為開發(fā)治療心絞痛,疼痛和癲癇藥物的新靶點,本課題另一方面的研究內(nèi)容是針對系列候選化合物進行篩選,旨在尋找作用更強,亞型選擇性更優(yōu)的新型HCN通道抑制劑。研究目的1)探究PIP2對HCN通道的調(diào)控作用。2)探究PIP2下游信號通路PI3K/PIP3對HCN通道功能的影響。3)系列新型HCN通道抑制劑的發(fā)現(xiàn)。研究方法1)將...

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【學位級別】：碩士

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圖２?ＨＣＮ通道的電生理特性［１９］??Ｆｉｇｕｒｅ?２?Ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｙｓｉｏｌｏｇｉｃａｌ?ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ?ｏｆ?ＨＣＮ?ｃｈａｎｎｅｌｓ??

與多數(shù)Ｋｖ通道截然不同，主要表現(xiàn)在以下三方面：（１）超極化激活：與多數(shù)電??壓門控通道在膜電位去極化時被激活不同，ＨＣＮ通道在細胞處于靜息膜電位（約??－５５?ｍＶ）以下時被激活，且當細胞膜進一步超極化則電流被進一步激活（圖２?Ａ）；??（２）非選擇性陽離子通道：盡管ＨＣＮ通道在....

圖６?Ｋｉｒ通道Ｃ－端氨基酸序列對比分析［６５］??Ｆｉｇｕｒｅ?６?Ａｌｉｇｎｍｅｎｔ?ｏｆ?ｔｈｅ?ｐｒｏｘｉｍａｌ?Ｃ－ｔｅｒｍｉｎａｌ?ｒｅｇｉｏｎ?ｏｆ?Ｋｉｒ?ｃｈａｎｎｅｌｓ??

前言??ＩＰ２帶負電荷的磷酸鹽基團，因此可能使得其與離子通道末端殘基之間直接相互作用進而有利于離子通道的激活。ｒ３．１和Ｋｉｒ３．２通道所制備的Ｃ－末端融合蛋白可以直接與ＰＩＰ猜測。而且在Ｋｋ２．１中，Ｃ－末端已經(jīng)鑒定了大量的ＰＩＰ２１８７，Ｋ１８８，Ｒ１８９）?［６２］。從所有....

圖７?ＰＩＰ２介導ＨＣＮ通道門控不受ｃＡＭＰ影響［６７］??Ｆｉｇｕｒｅ?７?ＰＩＰ２－Ｍｅｄｉａｔｅｄ?Ｓｈｉｆｔ?ｉｎ??

碩士學位論文??通道更容易打開［６６＿６８］，而且該調(diào)控效應是顯著的并且獨立于ｃＡＭＰ的調(diào)控，即??ｃＡＭＰ的存在與否并不影響ＰＩＰ２對ＨＣＮ通道的調(diào)控作用（圖７）。因此，猜測ＰＩＰ２??與ＨＣＮ通道的結合位點主要在ＨＣＮ通道的跨膜結構域及其連接部位之間，而不??是對于ｃＡＭＰ依....

圖８?ＰＩＰ２調(diào)控ＨＣＮ通道參與節(jié)律活動［６７＇６８］??

而相對應的，利用穿孔膜片鉗記錄中腦多巴胺祌經(jīng)元的自發(fā)放電頻率發(fā)現(xiàn)，??ＰＩＰ２抑制劑Ｗｏｒｔｍａｒｍｉｎ阻斷ＰＩＰ２的合成后，神經(jīng)元的自發(fā)放電頻率被抑制，而且，??ＨＣＮ通道的電壓激活曲線顯著往超極化方向移動（圖８）。??１１??

本文編號：3930910