目的核酸類(siRNA等)藥物在疾病的治療上具有高度特異性、安全和靶點(diǎn)多樣性等獨(dú)特優(yōu)勢。但其游離形式在體內(nèi)容易被核酸酶(RNase)降解、半衰期短、轉(zhuǎn)染效率低,這大大限制了其臨床應(yīng)用。本實(shí)驗(yàn)擬設(shè)計(jì)構(gòu)建一種微酸環(huán)境敏感的脂質(zhì)體載體,用于實(shí)現(xiàn)siRNA(小干擾RNA)的腫瘤組織水平、細(xì)胞水平甚至細(xì)胞器水平的高效定位遞送。方法采用薄膜分散法,以二油酰基磷脂酰乙醇胺(DOPE)和膽甾醇半琥珀酸酯(CHEMS)為膜材制備空白脂質(zhì)體;用兩親性材料SA-R8壓縮siRNA,再與空白脂質(zhì)體孵育制備載siRNA脂質(zhì)體;將端基功能化的磷脂(DSPE-PEG2000-MAL)與低pH插入肽(pHLIP)反應(yīng)連接,再與載siRNA脂質(zhì)體孵育融合,構(gòu)建低pH插入肽修飾的載siRNA脂質(zhì)體;借助動態(tài)光散射原理,流式細(xì)胞術(shù)和激光共聚焦技術(shù),表征脂質(zhì)體的粒徑及分布,監(jiān)測細(xì)胞攝取、胞內(nèi)轉(zhuǎn)運(yùn)與分布特征。結(jié)果制備的載siRNA脂質(zhì)體平均粒徑在150～190 nm內(nèi);在pH 6. 5環(huán)境下siRNA的細(xì)胞攝取量顯著高于pH 7. 4環(huán)境;并且siRNA能很好地定位在細(xì)胞質(zhì)。結(jié)論該載體顯示出了較強(qiáng)的p H敏感性,在微酸環(huán)境下可...

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