發(fā)布時(shí)間：2023-11-27 20:21

　　惡性腫瘤已日益常見(jiàn),成為嚴(yán)重威脅人類生命和生活質(zhì)量的主要疾病之一。抑瘤蛋白p53及其負(fù)性調(diào)節(jié)蛋白MDM2與MDMX之間的相互作用與眾多腫瘤的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)。因此,p53-MDM2/MDMX蛋白蛋白相互作用已經(jīng)成為設(shè)計(jì)抗腫瘤藥物的重要靶標(biāo)。目前MDM2和MDMX的拮抗劑主要分為肽類和小分子兩大類,這兩種類型的拮抗劑均有自身的優(yōu)勢(shì)和明顯的不足之處。小分子拮抗劑主要存在與靶蛋白的親和力不強(qiáng),以及難以同時(shí)抑制MDM2和MDMX兩大缺陷。而肽類拮抗劑主要存在體內(nèi)不穩(wěn)定以及透膜能力不強(qiáng)兩大缺陷。第一節(jié)中,首先本文利用文獻(xiàn)調(diào)研總結(jié)得到已知抑制劑的Alog P和MW指標(biāo)將NCI數(shù)據(jù)庫(kù)中23萬(wàn)化合物縮減至13萬(wàn)左右,隨后利用兩個(gè)五點(diǎn)藥效團(tuán)模型再次將數(shù)據(jù)庫(kù)范圍壓縮至6萬(wàn)左右,最后利用分子對(duì)接技術(shù)篩選購(gòu)買得到38個(gè)虛擬活性化合物,其中有10個(gè)化合物經(jīng)過(guò)基于熒光偏振的結(jié)合實(shí)驗(yàn)證明具有一定的結(jié)合活性,在隨后的子結(jié)構(gòu)搜索中,我們又成功篩得一系列新型骨架的MDM2和MDMX的雙重拮抗劑,其中NSC148171對(duì)MDM2和MDMX的結(jié)合常數(shù)Ki值分別達(dá)到了0.62和4.6μM。本文開(kāi)發(fā)了藥效團(tuán)模型結(jié)合分子對(duì)接手段...

【文章頁(yè)數(shù)】：191 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
第一部分 p53-MDM2/MDMX相互作用抑制劑的設(shè)計(jì)、合成與表征
    摘要
    英文摘要
    縮略詞表
    第一章 研究背景
        一、p53-MDM2/MDMX與腫瘤的關(guān)系
        二、p53-MDM2/MDMX復(fù)合物的結(jié)構(gòu)研究
        三、p53-MDM2/MDMX抑制劑的發(fā)展
        四、前期工作基礎(chǔ)和技術(shù)平臺(tái)
    第二章 課題設(shè)計(jì)與研究?jī)?nèi)容
        一、p53-MDM2/MDMX小分子抑制劑的篩選.
        二、p53-MDM2/MDMX肽類抑制劑PMI系統(tǒng)性突變分析
        三、基于DTC的新型硫脂訂書肽的設(shè)計(jì)
        四、引入D氨基酸的PMI的設(shè)計(jì)
    第三章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與討論
        一、新骨架p53-MDM2/MDMX小分子抑制劑的發(fā)現(xiàn)
        二、超強(qiáng)p53-MDM2/MDMX肽類抑制劑的設(shè)計(jì)
        三、新型硫脂訂書肽的合成、活性與結(jié)構(gòu)分析
        四、D氨基酸引入PMI提高抗腫瘤活性
    第四章 實(shí)驗(yàn)材料與方法
        一、儀器設(shè)備
        二、材料與試劑
        三、多肽的固相合成
        四、硫脂訂書肽的合成
        五、熒光偏振結(jié)合實(shí)驗(yàn)
        六、等離子共振結(jié)合實(shí)驗(yàn)
        七、脂質(zhì)體的制備與多肽的包裹
        八、MTT細(xì)胞抗增殖實(shí)驗(yàn)
        九、免疫印跡實(shí)驗(yàn)
        十、分子對(duì)接和藥效團(tuán)模型
        十一、等溫滴度量熱法
        十二、多肽與MDM2或MDMX的復(fù)合物結(jié)晶
        十三、數(shù)據(jù)收集和結(jié)構(gòu)解析
    第五章 總結(jié)與展望
    第六章 文獻(xiàn)綜述
    參考文獻(xiàn)
第二部分 新型糖基化多肽的合成、表征及抗體制備
    摘要
    英文摘要
    縮略詞表
    第一章 研究背景
        一、蛋白翻譯后糖基化修飾的重要性
        二、精氨酸鼠李糖基化修飾的意義
        三、蛋白庚糖基化修飾的意義
        四、特異性抗體制備的意義
        五、前期工作基礎(chǔ)和技術(shù)平臺(tái)
    第二章 課題設(shè)計(jì)與研究?jī)?nèi)容
        一、特異性靶向精氨酸鼠李糖基化的多克隆抗體的設(shè)計(jì)
        二、特異性靶向絲氨酸庚糖基化的多克隆抗體的設(shè)計(jì)
    第三章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與討論
        一、精氨酸鼠李糖肽的設(shè)計(jì)與合成
        二、特異性靶向精氨酸鼠李糖基化的多克隆抗體的制備
        三、多克隆抗體的蛋白水平的表征
        四、絲氨酸庚糖肽的設(shè)計(jì)與合成
        五、特異性靶向絲氨酸庚糖基化的多克隆抗體的制備
    第四章 實(shí)驗(yàn)材料與方法
        一、儀器設(shè)備
        二、材料與試劑
        三、精氨酸鼠李糖肽的合成
        四、絲氨酸庚糖肽的合成
        五、動(dòng)物免疫和特異性純化
        六、酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)
        七、免疫印跡實(shí)驗(yàn)
    第五章 總結(jié)與展望
    參考文獻(xiàn)
在讀期間發(fā)表論文與科研工作情況說(shuō)明
致謝
附錄



本文編號(hào)：3868509