發(fā)布時間：2023-11-27 20:21

　　惡性腫瘤已日益常見,成為嚴重威脅人類生命和生活質量的主要疾病之一。抑瘤蛋白p53及其負性調節(jié)蛋白MDM2與MDMX之間的相互作用與眾多腫瘤的發(fā)生、發(fā)展密切相關。因此,p53-MDM2/MDMX蛋白蛋白相互作用已經成為設計抗腫瘤藥物的重要靶標。目前MDM2和MDMX的拮抗劑主要分為肽類和小分子兩大類,這兩種類型的拮抗劑均有自身的優(yōu)勢和明顯的不足之處。小分子拮抗劑主要存在與靶蛋白的親和力不強,以及難以同時抑制MDM2和MDMX兩大缺陷。而肽類拮抗劑主要存在體內不穩(wěn)定以及透膜能力不強兩大缺陷。第一節(jié)中,首先本文利用文獻調研總結得到已知抑制劑的Alog P和MW指標將NCI數據庫中23萬化合物縮減至13萬左右,隨后利用兩個五點藥效團模型再次將數據庫范圍壓縮至6萬左右,最后利用分子對接技術篩選購買得到38個虛擬活性化合物,其中有10個化合物經過基于熒光偏振的結合實驗證明具有一定的結合活性,在隨后的子結構搜索中,我們又成功篩得一系列新型骨架的MDM2和MDMX的雙重拮抗劑,其中NSC148171對MDM2和MDMX的結合常數Ki值分別達到了0.62和4.6μM。本文開發(fā)了藥效團模型結合分子對接手段...

【文章頁數】：191 頁

【學位級別】：博士

【文章目錄】：
第一部分 p53-MDM2/MDMX相互作用抑制劑的設計、合成與表征
    摘要
    英文摘要
    縮略詞表
    第一章 研究背景
        一、p53-MDM2/MDMX與腫瘤的關系
        二、p53-MDM2/MDMX復合物的結構研究
        三、p53-MDM2/MDMX抑制劑的發(fā)展
        四、前期工作基礎和技術平臺
    第二章 課題設計與研究內容
        一、p53-MDM2/MDMX小分子抑制劑的篩選.
        二、p53-MDM2/MDMX肽類抑制劑PMI系統性突變分析
        三、基于DTC的新型硫脂訂書肽的設計
        四、引入D氨基酸的PMI的設計
    第三章 實驗結果與討論
        一、新骨架p53-MDM2/MDMX小分子抑制劑的發(fā)現
        二、超強p53-MDM2/MDMX肽類抑制劑的設計
        三、新型硫脂訂書肽的合成、活性與結構分析
        四、D氨基酸引入PMI提高抗腫瘤活性
    第四章 實驗材料與方法
        一、儀器設備
        二、材料與試劑
        三、多肽的固相合成
        四、硫脂訂書肽的合成
        五、熒光偏振結合實驗
        六、等離子共振結合實驗
        七、脂質體的制備與多肽的包裹
        八、MTT細胞抗增殖實驗
        九、免疫印跡實驗
        十、分子對接和藥效團模型
        十一、等溫滴度量熱法
        十二、多肽與MDM2或MDMX的復合物結晶
        十三、數據收集和結構解析
    第五章 總結與展望
    第六章 文獻綜述
    參考文獻
第二部分 新型糖基化多肽的合成、表征及抗體制備
    摘要
    英文摘要
    縮略詞表
    第一章 研究背景
        一、蛋白翻譯后糖基化修飾的重要性
        二、精氨酸鼠李糖基化修飾的意義
        三、蛋白庚糖基化修飾的意義
        四、特異性抗體制備的意義
        五、前期工作基礎和技術平臺
    第二章 課題設計與研究內容
        一、特異性靶向精氨酸鼠李糖基化的多克隆抗體的設計
        二、特異性靶向絲氨酸庚糖基化的多克隆抗體的設計
    第三章 實驗結果與討論
        一、精氨酸鼠李糖肽的設計與合成
        二、特異性靶向精氨酸鼠李糖基化的多克隆抗體的制備
        三、多克隆抗體的蛋白水平的表征
        四、絲氨酸庚糖肽的設計與合成
        五、特異性靶向絲氨酸庚糖基化的多克隆抗體的制備
    第四章 實驗材料與方法
        一、儀器設備
        二、材料與試劑
        三、精氨酸鼠李糖肽的合成
        四、絲氨酸庚糖肽的合成
        五、動物免疫和特異性純化
        六、酶聯免疫吸附實驗
        七、免疫印跡實驗
    第五章 總結與展望
    參考文獻
在讀期間發(fā)表論文與科研工作情況說明
致謝
附錄



本文編號：3868509