氯法齊明(clofazimine,CFZ)在抗結(jié)核治療中發(fā)揮越來越重要的作用,其結(jié)構(gòu)改造物吡法齊明(TBI-166)近年被成功合成,前期評價結(jié)果顯示TBI-166較CFZ活性更強而不良反應(yīng)更弱,有著良好的應(yīng)用前景。目前,TBI-166已在國內(nèi)進入Ⅰ期臨床研究,需要更詳細的體內(nèi)外研究數(shù)據(jù)作為Ⅱ期臨床研究的依據(jù)和參考。此外,關(guān)于TBI-166的作用機制和耐藥機制的研究也尚未開展。本研究利用高通量全基因組DNA重測序技術(shù)及DIA蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)對CFZ和TBI-166的耐藥機制和作用機制進行研究,并在小鼠結(jié)核病模型中對TBI-166聯(lián)合用藥及化療方案中的應(yīng)用進行了探索。第一部分,我們對CFZ和TBI-166的耐藥機制進行了初步研究。通過對200株耐多藥結(jié)核分枝桿菌臨床分離株進行篩選,發(fā)現(xiàn)TBI-166對超過95%的耐多藥結(jié)核分枝桿菌臨床分離株均有較好的抑菌作用,且其活性較CFZ的體外活性更高而耐藥率低于CFZ,但TBI-166可能容易出現(xiàn)高度耐藥的現(xiàn)象,并且TBI-166 與 CFZ 和 BDQ 之間可能存在交叉耐藥。通過對篩選獲得的 13 株 CFZ 耐藥菌株和9株TBI-166耐藥菌株進行...

【文章頁數(shù)】：158 頁

【學(xué)位級別】：博士

【文章目錄】：
縮略詞對照表
中文摘要
Abstract
引言
第一部分 亞胺吩嗪類藥物的耐藥性及耐藥機制的研究
    實驗材料
        1 菌株
        2 儀器
        3 實驗用藥物
        4 實驗用試劑
        5 實驗用試劑盒
    實驗方法
        1 藥物儲備液的制備
        2 培養(yǎng)基的配制
        3 MABA法測定結(jié)核分枝桿菌MIC
        4 CFZ或TBI-166耐藥菌株的篩選
        5 全基因組DNA的提取
        6 全基因組DNA測序
        7 全基因組測序分析結(jié)果篩選
        8 系統(tǒng)進化樹的構(gòu)建
    實驗結(jié)果
        1 TBI-166對結(jié)核分枝桿菌H37Rv標(biāo)準(zhǔn)株的MIC測定
        2 臨床分離菌株對CFZ及TBI-166的敏感性
        3 TBI-166及CFZ、BDQ的交叉耐藥性
        4 耐藥菌株與對照組敏感菌株的流行病學(xué)特征
        5 差異基因的篩選
        6 差異基因的生物信息學(xué)分析
        7 Rv0678基因突變與CFZ、TBI-166和BDQ耐藥相關(guān)性
        8 Rv1453基因突變與CFZ耐藥相關(guān)性
        9 其他基因突變與CFZ耐藥相關(guān)性
    討論
第二部分 亞胺吩嗪類藥物的作用機制的研究
    實驗材料
        1 實驗用菌株
        2 實驗儀器
        3 實驗用藥物
        4 實驗用其他試劑
        5 實驗用試劑盒
    實驗方法
        1 7H9培養(yǎng)基的配制
        2 結(jié)核分枝桿菌的培養(yǎng)和傳代
        3 結(jié)核菌活性氧含量檢測
        4 結(jié)核菌過氧化氫酶活性測定
        5 用于蛋白測序菌株的藥物處理
        6 結(jié)核菌總蛋白的提取
        7 結(jié)核菌總蛋白的定量分析
        8 蛋白測序數(shù)據(jù)的篩選和分析
    實驗結(jié)果
        1 結(jié)核分枝桿菌的活性氧檢測
        2 結(jié)核分枝桿菌的過氧化氫酶活性測定
        3 樣本總蛋白的提取和質(zhì)檢
        4 DDA和DIA定量檢測
        5 差異蛋白篩選
        6 生物信息學(xué)分析
    討論
第三部分 含吡法齊明的藥物組合在小鼠模型中的作用評價
    實驗材料
        1 實驗用菌株
        2 實驗用動物
        3 實驗儀器
        4 實驗用藥物
        5 實驗用其他試劑
    實驗方法
        1 培養(yǎng)基的配制
        2 TBI-166的體外相互作用評估
        3 小鼠氣溶膠感染
        4 小鼠感染模型的建立
        5 小鼠灌胃給藥
        6 化療方案的設(shè)置
        7 方案療效的評估
        8 病理組織診斷
        9 統(tǒng)計分析
    實驗結(jié)果
        1 TBI-166與其他抗結(jié)核藥物的體外相互作用評估
        2 小鼠組織色素沉著及肺部大體病變情況情況
        3 TBI-166在BALB/c小鼠模型上的體內(nèi)相互作用評價
        4 TBI-166在C3HeB/FeJNju小鼠模型上的體內(nèi)相互作用評價
        5 滅菌活性的評價
        6 小鼠脾臟和肺組織的病理改變
    討論
小結(jié)
參考文獻
綜述 亞胺吩嗪類藥物抗結(jié)核作用研究進展
    參考文獻
攻讀學(xué)位期間發(fā)表論文情況
致謝
個人簡歷



本文編號：3830792