氯法齊明(clofazimine,CFZ)在抗結(jié)核治療中發(fā)揮越來(lái)越重要的作用,其結(jié)構(gòu)改造物吡法齊明(TBI-166)近年被成功合成,前期評(píng)價(jià)結(jié)果顯示TBI-166較CFZ活性更強(qiáng)而不良反應(yīng)更弱,有著良好的應(yīng)用前景。目前,TBI-166已在國(guó)內(nèi)進(jìn)入Ⅰ期臨床研究,需要更詳細(xì)的體內(nèi)外研究數(shù)據(jù)作為Ⅱ期臨床研究的依據(jù)和參考。此外,關(guān)于TBI-166的作用機(jī)制和耐藥機(jī)制的研究也尚未開(kāi)展。本研究利用高通量全基因組DNA重測(cè)序技術(shù)及DIA蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)對(duì)CFZ和TBI-166的耐藥機(jī)制和作用機(jī)制進(jìn)行研究,并在小鼠結(jié)核病模型中對(duì)TBI-166聯(lián)合用藥及化療方案中的應(yīng)用進(jìn)行了探索。第一部分,我們對(duì)CFZ和TBI-166的耐藥機(jī)制進(jìn)行了初步研究。通過(guò)對(duì)200株耐多藥結(jié)核分枝桿菌臨床分離株進(jìn)行篩選,發(fā)現(xiàn)TBI-166對(duì)超過(guò)95%的耐多藥結(jié)核分枝桿菌臨床分離株均有較好的抑菌作用,且其活性較CFZ的體外活性更高而耐藥率低于CFZ,但TBI-166可能容易出現(xiàn)高度耐藥的現(xiàn)象,并且TBI-166 與 CFZ 和 BDQ 之間可能存在交叉耐藥。通過(guò)對(duì)篩選獲得的 13 株 CFZ 耐藥菌株和9株TBI-166耐藥菌株進(jìn)行...

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【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
縮略詞對(duì)照表
中文摘要
Abstract
引言
第一部分 亞胺吩嗪類藥物的耐藥性及耐藥機(jī)制的研究
    實(shí)驗(yàn)材料
        1 菌株
        2 儀器
        3 實(shí)驗(yàn)用藥物
        4 實(shí)驗(yàn)用試劑
        5 實(shí)驗(yàn)用試劑盒
    實(shí)驗(yàn)方法
        1 藥物儲(chǔ)備液的制備
        2 培養(yǎng)基的配制
        3 MABA法測(cè)定結(jié)核分枝桿菌MIC
        4 CFZ或TBI-166耐藥菌株的篩選
        5 全基因組DNA的提取
        6 全基因組DNA測(cè)序
        7 全基因組測(cè)序分析結(jié)果篩選
        8 系統(tǒng)進(jìn)化樹(shù)的構(gòu)建
    實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        1 TBI-166對(duì)結(jié)核分枝桿菌H37Rv標(biāo)準(zhǔn)株的MIC測(cè)定
        2 臨床分離菌株對(duì)CFZ及TBI-166的敏感性
        3 TBI-166及CFZ、BDQ的交叉耐藥性
        4 耐藥菌株與對(duì)照組敏感菌株的流行病學(xué)特征
        5 差異基因的篩選
        6 差異基因的生物信息學(xué)分析
        7 Rv0678基因突變與CFZ、TBI-166和BDQ耐藥相關(guān)性
        8 Rv1453基因突變與CFZ耐藥相關(guān)性
        9 其他基因突變與CFZ耐藥相關(guān)性
    討論
第二部分 亞胺吩嗪類藥物的作用機(jī)制的研究
    實(shí)驗(yàn)材料
        1 實(shí)驗(yàn)用菌株
        2 實(shí)驗(yàn)儀器
        3 實(shí)驗(yàn)用藥物
        4 實(shí)驗(yàn)用其他試劑
        5 實(shí)驗(yàn)用試劑盒
    實(shí)驗(yàn)方法
        1 7H9培養(yǎng)基的配制
        2 結(jié)核分枝桿菌的培養(yǎng)和傳代
        3 結(jié)核菌活性氧含量檢測(cè)
        4 結(jié)核菌過(guò)氧化氫酶活性測(cè)定
        5 用于蛋白測(cè)序菌株的藥物處理
        6 結(jié)核菌總蛋白的提取
        7 結(jié)核菌總蛋白的定量分析
        8 蛋白測(cè)序數(shù)據(jù)的篩選和分析
    實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        1 結(jié)核分枝桿菌的活性氧檢測(cè)
        2 結(jié)核分枝桿菌的過(guò)氧化氫酶活性測(cè)定
        3 樣本總蛋白的提取和質(zhì)檢
        4 DDA和DIA定量檢測(cè)
        5 差異蛋白篩選
        6 生物信息學(xué)分析
    討論
第三部分 含吡法齊明的藥物組合在小鼠模型中的作用評(píng)價(jià)
    實(shí)驗(yàn)材料
        1 實(shí)驗(yàn)用菌株
        2 實(shí)驗(yàn)用動(dòng)物
        3 實(shí)驗(yàn)儀器
        4 實(shí)驗(yàn)用藥物
        5 實(shí)驗(yàn)用其他試劑
    實(shí)驗(yàn)方法
        1 培養(yǎng)基的配制
        2 TBI-166的體外相互作用評(píng)估
        3 小鼠氣溶膠感染
        4 小鼠感染模型的建立
        5 小鼠灌胃給藥
        6 化療方案的設(shè)置
        7 方案療效的評(píng)估
        8 病理組織診斷
        9 統(tǒng)計(jì)分析
    實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        1 TBI-166與其他抗結(jié)核藥物的體外相互作用評(píng)估
        2 小鼠組織色素沉著及肺部大體病變情況情況
        3 TBI-166在BALB/c小鼠模型上的體內(nèi)相互作用評(píng)價(jià)
        4 TBI-166在C3HeB/FeJNju小鼠模型上的體內(nèi)相互作用評(píng)價(jià)
        5 滅菌活性的評(píng)價(jià)
        6 小鼠脾臟和肺組織的病理改變
    討論
小結(jié)
參考文獻(xiàn)
綜述 亞胺吩嗪類藥物抗結(jié)核作用研究進(jìn)展
    參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間發(fā)表論文情況
致謝
個(gè)人簡(jiǎn)歷



本文編號(hào)：3830792