人表皮生長因子受體(epidermal growth factor receptor,EGFR)是一種受體酪氨酸激酶,與許多類型的人類癌癥的發(fā)展有關(guān)。目前已知,EGFR常常會發(fā)生基因擴增、激酶結(jié)構(gòu)域激活突變或EGFR(EGFR vIII)胞外結(jié)構(gòu)域的片段缺失等遺傳改變,促進其異常激活。第一代EGFR小分子酪氨酸激酶抑制劑(tyrosine kinase inhibitors,TKI)是ATP競爭性可逆抑制劑,通過與ATP結(jié)合位點結(jié)合來阻斷EGFR誘導(dǎo)的下游信號傳導(dǎo)的激活。EGFR的致癌突變占非小細胞肺癌(NSCLC)人群的10-30%,全球每年診斷出大約10-20萬NSCLC病例,其中兩個頻繁且相互排斥的原發(fā)突變是EGFR L858R和EGFR[d746-750](氨基酸746和750之間的外顯子19缺失),占所有EGFR突變NSCLC病例的約85%。第一代EGFR激酶抑制劑Geftinib(ZD1839)和Erlotinib(OSI-774)對這類突變具有良好的反應(yīng)率,然而用藥9-11個月左右患者常常會產(chǎn)生耐藥,其中大約60%由外顯子20的T790M點突變驅(qū)動,這種突變恢復(fù)了組成型E...

【文章頁數(shù)】：72 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
英文縮略詞表
續(xù)英文縮略詞表
1 前言
    1.1 EGFR在癌癥中的作用
        1.1.1 EGFR發(fā)現(xiàn)歷史
        1.1.2 EGFR結(jié)構(gòu)
        1.1.3 EGFR的核定位及其功能
    1.2 癌癥中EGFR的擴增和突變
        1.2.1 大片段序列缺失
        1.2.2 點突變
        1.2.3 基因擴增
    1.3 針對EGFR的癌癥治療
    1.4 抗EGFR TKIS的機制
        1.4.1 EGFR基因的二次突變
        1.4.2 替代途徑的激活
        1.4.3 表型轉(zhuǎn)化
        1.4.4 抗細胞凋亡
    1.5 綜合治療
        1.5.1 EGFR TKI加化療
        1.5.2 EGFR TKI加抗血管生成藥物
        1.5.3 EGFR TKI加免疫療法
    1.6 本論文研究的思路和方案
2 WS-157 抗腫瘤作用研究
    2.1 實驗材料
        2.1.1 化合物
        2.1.2 細胞
        2.1.3 實驗設(shè)備
        2.1.4 實驗試劑
        2.1.5 試劑配制
    2.2 實驗方法
        2.2.1 細胞培養(yǎng)相關(guān)實驗
        2.2.2 細胞增殖抑制試驗
        2.2.3 細胞總蛋白的提取
        2.2.4 BCA蛋白定量法
        2.2.5 Western blot實驗
        2.2.6 流式細胞術(shù)檢測細胞周期
        2.2.7 劃痕修復(fù)實驗
        2.2.8 克隆形成實驗
        2.2.9 裸鼠移植瘤實驗
    2.3 實驗結(jié)果
        2.3.1 WS-157 體外激酶活性評價
        2.3.2 WS-157 抑制EGFR及其下游信號通路
        2.3.3 WS-157 靶點抑制作用具有可逆性
        2.3.4 WS-157 對不同來源腫瘤細胞株具有增殖抑制作用
        2.3.5 WS-157 對腫瘤細胞周期的影響
        2.3.6 WS-157 抑制腫瘤細胞克隆形成和劃痕修復(fù)能力
        2.3.7 化合物WS-157對A431 裸鼠移植瘤的生長抑制作用
    2.4 討論
3 YS-67 抗腫瘤作用研究
    3.1 實驗材料和試驗方法
    3.2 實驗結(jié)果
        3.2.1 YS-67 體外激酶活性評價
        3.2.2 YS-67 能夠抑制EGFR及其下游信號通路
        3.2.3 YS-67 靶點抑制活性的可逆性分析
        3.2.4 YS-67 對不同來源腫瘤細胞株增殖抑制作用
        3.2.5 YS-67 顯著抑制腫瘤細胞克隆形成和劃痕修復(fù)能力
        3.2.6 YS-67 能夠抑制裸鼠移植瘤生長
    3.3 討論
4 總結(jié)與展望
參考文獻
個人簡歷
致謝



本文編號：3802172