探討單鏈抗體JZC00和糖酵解抑制劑2-脫氧葡萄糖(2-deoxyglucose,2-DG)的聯(lián)合用藥對(duì)小鼠非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞LLC、小鼠乳腺癌細(xì)胞4T1的抗腫瘤作用。利用大腸埃希菌表達(dá)并純化單鏈抗體,用SDS-PAGE和Western blot法鑒定JZC00;MTT法分析JZC00/2-DG聯(lián)用組對(duì)腫瘤細(xì)胞體外增殖的抑制作用;葡萄糖和乳酸測(cè)定試劑盒測(cè)定培養(yǎng)基中葡萄糖和乳酸濃度,并計(jì)算腫瘤細(xì)胞葡萄糖攝取抑制率及乳酸釋放抑制率;給藥周期為15 d,給藥同周期內(nèi)測(cè)量腫瘤質(zhì)量及體積。結(jié)果顯示:經(jīng)原核表達(dá)的JZC00相對(duì)分子質(zhì)量正確,在體外能夠抑制腫瘤細(xì)胞的增殖;JZC00及2-DG單獨(dú)給藥均能夠抑制腫瘤細(xì)胞糖酵解,且JZC00/2-DG聯(lián)合使用能夠協(xié)同抑制糖酵解,當(dāng)在體外模擬缺氧環(huán)境時(shí)JZC00抑制作用下降,加入2-DG后能夠逆轉(zhuǎn)其對(duì)糖酵解的抑制作用;兩組體內(nèi)模型顯示與JZC00單藥組相比,聯(lián)合用藥組抑瘤作用顯著提高,2-DG能夠提高抗血管生成抗體抑瘤效果,提示其聯(lián)合在治療實(shí)體瘤方面具有潛在價(jià)值。

【文章頁(yè)數(shù)】：7 頁(yè)

【文章目錄】：
1 材 料
    1.1 試 劑
    1.2 細(xì)胞株
    1.3 動(dòng) 物
2 方 法
    2.1 細(xì)胞培養(yǎng)
    2.2 細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)
    2.3 葡萄糖攝取及乳酸釋放速率測(cè)定實(shí)驗(yàn)
    2.4 蛋白免疫印跡
    2.5 動(dòng)物模型
    2.6 數(shù)據(jù)分析
3 結(jié) 果
    3.1 單鏈抗體的表達(dá)純化及鑒定
    3.2 JZC00及2-DG對(duì)腫瘤細(xì)胞增殖的影響
    3.3 JZC00及2-DG對(duì)腫瘤細(xì)胞糖酵解的影響
    3.4單鏈抗體及2-DG的體內(nèi)活性研究
4 討 論



本文編號(hào)：3738398