目的觀察整合素β1對(duì)ILK/FAK/F-actin通路的調(diào)節(jié)作用,分析其對(duì)幽門(mén)螺桿菌(Hp)誘導(dǎo)GES-1細(xì)胞自噬的影響。方法利用siRNA沉默GES-1細(xì)胞整合素β1的表達(dá)后與幽門(mén)螺桿菌共培養(yǎng)6 h,Western blot檢測(cè)ILK的表達(dá)。以ILK特異性抑制劑Cpd22抑制細(xì)胞ILK的表達(dá)后與幽門(mén)螺桿菌共培養(yǎng)6 h,Western blot檢測(cè)LC3B、p62、FAK、Paxillin的表達(dá);制備細(xì)胞爬片,以iFluor-594標(biāo)記的鬼筆環(huán)肽對(duì)F-actin進(jìn)行染色,觀察細(xì)胞形態(tài)。結(jié)果沉默整合素β1后,空白組、Hp組、沉默組、陰性對(duì)照組、沉默+Hp組、陰性對(duì)照+Hp組ILK相對(duì)表達(dá)量分別為1.012±0.073、0.637±0.216、0.727±0.173、1.173±0.177、0.712±0.160、0.983±0.119,與空白組相比,Hp組ILK的相對(duì)表達(dá)量降低(t=3.288,P<0.05),沉默組較陰性對(duì)照組,沉默+Hp組較陰性對(duì)照+Hp組ILK相對(duì)表達(dá)量均顯著降低(t值分別為-4.420和-3.238,均P<0.01)。抑制ILK表達(dá)后,空白組、Cpd2...

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【文章目錄】：
材料與方法
    1 材料
        1.1 菌株與細(xì)胞系
        1.2 主要試劑
        1.3 主要儀器
    2 方法
        2.1 細(xì)胞siRNA轉(zhuǎn)染
        2.2 Cpd22抑制試驗(yàn)
        2.3 Western blot分析
        2.4 iFluor-594標(biāo)記鬼筆環(huán)肽F-actin染色
        2.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
結(jié) 果
    1 Integrin β1-siRNA的沉默效能
    2 沉默Integrin β1后感染Hp對(duì)GES-1細(xì)胞ILK表達(dá)的影響
    3 抑制ILK后感染Hp對(duì)GES-1細(xì)胞LC3B和p62表達(dá)的影響
    4 抑制ILK后感染Hp后對(duì)GES-1細(xì)胞FAK、Paxillin表達(dá)的影響
    5 抑制ILK后感染Hp對(duì)GES-1細(xì)胞內(nèi)F-actin形成的影響
討 論



本文編號(hào)：3737838