目的建立基于電噴霧質(zhì)譜(ESI-Q-TOF MS)技術(shù)檢測人血白蛋白中雜蛋白的方法,考察國內(nèi)上市的27家企業(yè)的28批白蛋白產(chǎn)品中的未知蛋白組分。方法按2015年版《中國藥典》四部通則3121方法,采用凝膠過濾色譜柱(Hiprep16/60Sepharyl S-200HR),對人血白蛋白中的各組分進行分離,并收集其中的二聚體、多聚體組分;經(jīng)除鹽、濃縮和胰蛋白酶酶解后,采用BEH C18(2. 1 mm×100 mm,130?)色譜柱,以水(含0. 1%甲酸)-乙腈流動相梯度洗脫,采用色譜-質(zhì)譜(MS)技術(shù)對多肽進行二級質(zhì)譜序列測定,并利用搜庫軟件(PLGS3. 0)分析鑒定人血白蛋白中的雜蛋白。結(jié)果利用所建立的方法對27家企業(yè)的制品進行測定,共檢測出23種雜蛋白,其中載脂蛋白A-Ⅱ(apolipoprotein A-Ⅱ)、人結(jié)合珠蛋白(haptoglobin)、人血色素結(jié)合蛋白(hempoexin)、α-1B-糖蛋白(alpha-1B-glycoprotein)與α-2-HS-糖蛋白(alpha-2HS-glycoprotein)等5種蛋白為所有企業(yè)產(chǎn)品共有的雜蛋白;α白蛋白(VE結(jié)合蛋...

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【文章目錄】：
1 儀器與試劑
2 方法與結(jié)果
    2.1 凝膠色譜層析分離
    2.2 雜蛋白的收集與濃縮
    2.3 胰蛋白酶酶解
    2.4 UPLC-ESI-Q-TOF分析
        2.4.1 條件
        2.4.2 ESI-Q-TOF質(zhì)譜條件
    2.5 數(shù)據(jù)分析
    2.6 方法的重復性
    2.7 雜蛋白質(zhì)譜鑒定結(jié)果
3 討論及結(jié)論



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