2009年,我國(guó)河北省秦皇島沿岸海域首次暴發(fā)褐潮,且之后連續(xù)多年均有不同規(guī)模的褐潮暴發(fā)。褐潮的發(fā)生嚴(yán)重影響了當(dāng)?shù)氐暮Ｑ笊鷳B(tài)系統(tǒng)并對(duì)海洋資源和貝類(lèi)養(yǎng)殖業(yè)構(gòu)成威脅。雖然褐潮對(duì)海洋生物的影響人們已經(jīng)有了系統(tǒng)的認(rèn)知,但褐潮藻（抑食金球藻）對(duì)海洋生物的致害機(jī)制到目前為止人們還尚無(wú)定論。褐潮藻是否產(chǎn)生毒素、毒素的理化性質(zhì)和作用機(jī)制如何都還需要進(jìn)一步探索。本論文以PC12神經(jīng)細(xì)胞為研究對(duì)象,使用抑食金球藻細(xì)胞提取物進(jìn)行褐潮藻毒性效應(yīng)的研究。首先從細(xì)胞增殖、胞外乳酸脫氫酶滲漏、細(xì)胞形態(tài)學(xué)變化及細(xì)胞凋亡/壞死等方面探討抑食金球藻的細(xì)胞毒性效應(yīng)。根據(jù)抑食金球藻細(xì)胞毒性效應(yīng)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,提出抑食金球藻細(xì)胞毒性可能是由溶血活性而導(dǎo)致的假設(shè)�；诖�,運(yùn)用光學(xué)顯微鏡和AFM原子力顯微鏡觀(guān)察抑食金球藻細(xì)胞提取物對(duì)兔血紅細(xì)胞的溶血現(xiàn)象;采用薄層色譜法對(duì)抑食金球藻溶血毒素進(jìn)行初步的分離鑒定;研究多種理化因子（溫度、pH、氧化劑和還原劑及二價(jià)金屬離子）對(duì)抑食金球藻溶血活性的影響;以滲透保護(hù)實(shí)驗(yàn)及磷脂酶活性檢測(cè)分析抑食金球藻溶血毒素的溶血方式,為抑食金球藻毒性效應(yīng)的深入研究奠定基礎(chǔ),也為分析褐潮藻的危害機(jī)制提供了新的思路。本... 

【文章頁(yè)數(shù)】：111 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
1 前言
    1.1 褐潮及其原因藻
    1.2 國(guó)內(nèi)外褐潮暴發(fā)現(xiàn)狀及經(jīng)濟(jì)損失
    1.3 褐潮對(duì)海洋生物的危害及其機(jī)制
    1.4 基于細(xì)胞毒性的赤潮毒素檢測(cè)方法
    1.5 赤潮毒素的細(xì)胞毒性作用
    1.6 溶血毒素
    1.7 本論文研究的目的及意義
2 抑食金球藻細(xì)胞提取物對(duì)PC12神經(jīng)細(xì)胞毒性效應(yīng)
    2.1 引言
    2.2 材料與方法
    2.3 結(jié)果與分析
        2.3.1 抑食金球藻的生長(zhǎng)曲線(xiàn)
        2.3.2 抑食金球藻細(xì)胞提取物的有機(jī)萃取
        2.3.3 抑食金球藻提取物對(duì)細(xì)胞增殖的影響及IC_(50)計(jì)算
        2.3.4 抑食金球藻提取物對(duì)細(xì)胞形態(tài)學(xué)的影響
        2.3.5 抑食金球藻提取物對(duì)PC12細(xì)胞胞外LDH含量的影響
        2.3.6 抑食金球藻提取物對(duì)PC12細(xì)胞凋亡率和壞死率的影響
    2.4 討論
3 抑食金球藻溶血活性的測(cè)定及溶血毒素的初步分離
    3.1 引言
    3.2 材料與方法
    3.3 結(jié)果與分析
        3.3.1 抑食金球藻溶血活性觀(guān)察
        3.3.2 溶血毒素溶血過(guò)程的原子力顯微觀(guān)察
        3.3.3 溶血標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)
        3.3.4 抑食金球藻溶血毒素初步分離與分析
    3.4 討論
4 抑食金球藻溶血活性觀(guān)察及理化特性的研究
    4.1 引言
    4.2 材料與方法
    4.3 結(jié)果與分析
        4.3.1 不同反應(yīng)溫度對(duì)抑食金球藻溶血毒素溶血活性的影響
        4.3.2 不同pH值對(duì)抑食金球藻溶血毒素溶血活性的影響
        4.3.3 二價(jià)金屬離子對(duì)抑食金球藻溶血毒素溶血活性的影響
        4.3.4 Hg~(2+)對(duì)抑食金球藻溶血毒素溶血活性的影響
        4.3.5 氧化劑和還原劑對(duì)抑食金球藻溶血毒素溶血活性的影響
    4.4 討論
5 抑食金球藻溶血素對(duì)血紅細(xì)胞的作用研究
    5.1 引言
    5.2 材料與方法
    5.3 結(jié)果與分析
        5.3.1 不同動(dòng)物血紅細(xì)胞對(duì)抑食金球藻溶血毒素的敏感性
        5.3.2 不同糖類(lèi)及脂質(zhì)對(duì)抑食金球藻溶血毒素溶血活性的影響
        5.3.3 滲透保護(hù)實(shí)驗(yàn)
        5.3.4 磷脂酶活性
    5.4 討論
6 結(jié)論與展望
參考文獻(xiàn)
在校期間發(fā)表的論文
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]褐潮藻Aureococcus anophagefferens的危害研究進(jìn)展[J]. 公晗,顏天,周名江.  海洋科學(xué). 2014(06)
[2]抑食金球藻對(duì)鹵蟲(chóng)和鼠的急性毒性及對(duì)兔皮膚和眼的刺激作用[J]. 吳霓,徐曉嬌,江天久,江濤,呂頌輝.  水產(chǎn)學(xué)報(bào). 2014(03)
[3]2011年煙臺(tái)四十里灣微微型金藻褐潮分析[J]. 劉愛(ài)英,宋秀凱,秦華偉,劉麗娟,劉曉靜,任利華,白艷艷,靳洋.  海洋湖沼通報(bào). 2013(03)
[4]對(duì)桑溝灣海域一次藻華事件原因種的初步分析[J]. 孔凡洲,于仁成,張清春,王云峰,顏天,周名江.  海洋環(huán)境科學(xué). 2012(06)
[5]Pigment characterization for the 2011 bloom in Qinhuangdao implicated "brown tide" events in China[J]. 孔凡洲,于仁成,張清春,顏天,周名江.  Chinese Journal of Oceanology and Limnology. 2012(03)
[6]海洋微藻溶血毒素研究進(jìn)展[J]. 江濤,滕德強(qiáng),江天久,呂頌輝,楊維東.  熱帶亞熱帶植物學(xué)報(bào). 2012(03)
[7]卵圓卡盾藻溶血毒素產(chǎn)毒的影響因素研究[J]. 江濤,吳霓,鐘艷,江天久.  安全與環(huán)境學(xué)報(bào). 2012(02)
[8]海洋卡盾藻(香港株)溶血活性特征研究[J]. 江濤,王銳,吳霓,江天久.  環(huán)境科學(xué). 2011(10)
[9]Toxic effects of Karenia mikimotoi extracts on mammalian cells[J]. 陳洋,顏天,于仁成,周名江.  Chinese Journal of Oceanology and Limnology. 2011(04)
[10]不同膜脂對(duì)米氏凱倫藻溶血毒素致溶血作用的影響[J]. 史戰(zhàn)鵬,劉潔生,李宏業(yè),崔偉民,楊維東.  衛(wèi)生研究. 2011(03)

博士論文
[1]哈維氏弧菌VHH溶血素作用機(jī)理的研究[D]. 孫鉑光.中國(guó)海洋大學(xué) 2009
[2]水母刺絲囊毒素的提取、溶血活性和毒性的研究[D]. 馮金華.中國(guó)科學(xué)院研究生院（海洋研究所） 2009
[3]DSP等赤潮藻毒素對(duì)哺乳類(lèi)細(xì)胞的毒性效應(yīng)及機(jī)制研究[D]. 陳洋.中國(guó)科學(xué)院研究生院（海洋研究所） 2008
[4]球形棕囊藻溶血毒素及其生物合成機(jī)制的研究[D]. 彭喜春.華南理工大學(xué) 2005

碩士論文
[1]米氏凱倫藻溶血毒素的生成及溶血特性研究[D]. 崔偉民.暨南大學(xué) 2009
[2]集胞藻Synechocystis sp. PCC 6803溶血素的理化特性及溶血機(jī)制的研究[D]. 趙媛媛.中國(guó)海洋大學(xué) 2007



本文編號(hào)：3732332