目的:本文通過(guò)構(gòu)建具有p H敏感性、腫瘤細(xì)胞靶向及胞內(nèi)線粒體定位的二級(jí)靶向的多功能脂質(zhì)體,以期實(shí)現(xiàn)藥物對(duì)腫瘤組織的主動(dòng)靶向、快速釋放以及激活線粒體凋亡通路等作用,從而增強(qiáng)抗腫瘤效果。同時(shí)對(duì)所構(gòu)建的脂質(zhì)體的體外及體內(nèi)抗腫瘤效果進(jìn)行考察。方法:本文首先通過(guò)三苯基膦（Triphenylphosphine,TPP）修飾白藜蘆醇（Resveratrol,RSV）合成了三苯基膦-白藜蘆醇（TPP-RSV）,并采用TLC、1H NMR、13C NMR等方法對(duì)產(chǎn)物進(jìn)行結(jié)構(gòu)確認(rèn)和表征。合成了DSPE-PEG350、DSPE-PEG2000及DSPE-PEG2000-Tf等功能性膜材,并對(duì)目標(biāo)產(chǎn)物進(jìn)行結(jié)構(gòu)確認(rèn)和表征。然后,采用薄膜分散法、后插入法、硫酸銨梯度法制備不同功能化的脂質(zhì)體,并通過(guò)粒徑、電位、透射電鏡（TEM）、體外p H敏感性以及體外釋放等方面考察所制備脂質(zhì)體的性質(zhì)。選擇人乳腺癌細(xì)胞（MCF-7）和人乳腺癌耐阿霉素細(xì)胞（MCF-7/ADR）為模型細(xì)胞,通過(guò)細(xì)胞毒性、細(xì)胞凋亡以及線粒體相關(guān)實(shí)驗(yàn)（線粒體膜電位、細(xì)胞凋亡蛋白酶3和9）等對(duì)脂質(zhì)體體外抗腫瘤活性進(jìn)行考察。最后通過(guò)小動(dòng)物活體成像技術(shù)及體內(nèi)的... 

【文章頁(yè)數(shù)】：77 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
ABSTRACT
前言
    1 脂質(zhì)體的研究進(jìn)展
        1.1 長(zhǎng)循環(huán)脂質(zhì)體
        1.2 pH敏感脂質(zhì)體
        1.3 溫度敏感脂質(zhì)體
        1.4 免疫脂質(zhì)體
    2 線粒體與細(xì)胞凋亡
    3 模型藥物簡(jiǎn)介
        3.1 白藜蘆醇簡(jiǎn)介
        3.2 阿霉素簡(jiǎn)介
    4 轉(zhuǎn)鐵蛋白受體介導(dǎo)的主動(dòng)靶向傳遞
    5 課題設(shè)計(jì)思路及研究?jī)?nèi)容
        5.1 課題設(shè)計(jì)思路
        5.2 課題研究?jī)?nèi)容
第一章 TPP-RSV與脂質(zhì)膜材的合成與表征
    第一節(jié) TPP-RSV的合成與表征
        1 材料與儀器
            1.1 材料與試劑
            1.2 實(shí)驗(yàn)儀器
        2 實(shí)驗(yàn)方法
            2.1 TPP-RSV的合成
            2.2 TPP-RSV的結(jié)構(gòu)確認(rèn)
        3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
            3.1 中間產(chǎn)物一的合成和后處理
            3.2 TPP-RSV的結(jié)構(gòu)確認(rèn)
        4 討論與小結(jié)
    第二節(jié) 脂質(zhì)體膜材的合成與表征
        1 材料與儀器
            1.1 材料與試劑
            1.2 實(shí)驗(yàn)儀器
        2 實(shí)驗(yàn)方法
            2.1 DSPE-PEG的合成
            2.2 DSPE-PEG_2000-Mal的合成
            2.3 Tf-SH的合成
            2.4 DSPE-PEG_2000-Tf的合成
            2.5 薄層色譜（TLC）分析
            2.6 ~1H NMR分析
            2.7 BCA法測(cè)定DSPE-PEG_2000-Tf的濃度
        3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
            3.1 DSPE-PEG的TLC分析
            3.2 DSPE-PEG_2000-Mal的TLC表征
            3.3 ~1H NMR分析
            3.4 DSPE-PEG_2000-Tf濃度測(cè)定
        4 討論與小結(jié)
第二章 多功能靶向脂質(zhì)體的制備及表征
    1 材料與儀器
        1.1 材料與試劑
        1.2 實(shí)驗(yàn)儀器
    2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.1 體外分析方法的建立
        2.2 脂質(zhì)體的制備
        2.3 脂質(zhì)體的表征
    3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        3.1 DOX體外分析方法
        3.2 RSV體外分析方法
        3.3 TPP-RSV體外分析方法
        3.4 粒徑、Zeta電位及包封率
        3.5 TEM形態(tài)觀察
        3.6 PEG的量對(duì)脂質(zhì)體pH敏感性的影響
        3.7 脂質(zhì)體體外釋放結(jié)果
    4 討論與小結(jié)
第三章 多功能靶向脂質(zhì)體的體外抗腫瘤活性評(píng)價(jià)
    1 材料與儀器
        1.1 材料與試劑
        1.2 實(shí)驗(yàn)儀器
        1.3 細(xì)胞
    2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.1 細(xì)胞培養(yǎng)
        2.2 細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)
        2.3 細(xì)胞攝取機(jī)制實(shí)驗(yàn)
        2.4 細(xì)胞凋亡實(shí)驗(yàn)
        2.5 線粒體膜電位測(cè)定
        2.6 細(xì)胞凋亡蛋白酶3和 9 的測(cè)定
    3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        3.1 細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)
        3.2 細(xì)胞攝取機(jī)制實(shí)驗(yàn)
        3.3 細(xì)胞凋亡實(shí)驗(yàn)
        3.4 線粒體膜電位
        3.5 細(xì)胞凋亡蛋白酶實(shí)驗(yàn)
    4 討論與小結(jié)
第四章 多功能靶向脂質(zhì)體的體內(nèi)抗腫瘤活性評(píng)價(jià)
    1 材料與儀器
        1.1 材料與試劑
        1.2 實(shí)驗(yàn)儀器
        1.3 細(xì)胞與實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
    2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.1 MCF-7 荷瘤裸鼠模型的建立
        2.2 荷瘤裸鼠活體熒光成像實(shí)驗(yàn)
        2.3 荷瘤裸鼠體內(nèi)抗腫瘤活性研究
    3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        3.1 荷瘤裸鼠活體熒光成像實(shí)驗(yàn)
        3.2 荷瘤裸鼠體內(nèi)抗腫瘤活性研究
    4 討論與小結(jié)
全文總結(jié)
課題特色
后續(xù)工作及展望
參考文獻(xiàn)
攻讀碩士學(xué)位期間公開(kāi)發(fā)表的論文
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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[2]抗腫瘤線粒體靶向藥研究進(jìn)展[J]. 宋輝,陳寧,徐昶儒.  黑龍江醫(yī)藥. 2013(02)
[3]新型線粒體靶向抗腫瘤藥物初探[J]. 雷克林,潘凌立.  銅仁學(xué)院學(xué)報(bào). 2012(06)
[4]新型脂質(zhì)體的研究進(jìn)展[J]. 楊彤.  醫(yī)藥導(dǎo)報(bào). 2009(03)
[5]超濾-HPLC法測(cè)定鹽酸拓?fù)涮婵抵|(zhì)體包封率[J]. 李寶齊,鄧英杰,楊靜文.  中國(guó)新藥雜志. 2007(01)
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博士論文
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本文編號(hào)：3716513