背景:近年來,隨著量子點在生物醫(yī)學等領(lǐng)域的應用不斷增多,研究學者越來越關(guān)注量子點對環(huán)境和人類可能帶來的不良影響。已有研究表明,量子點會穿過血腦屏障進入中樞神經(jīng)系統(tǒng),但其對神經(jīng)元細胞的毒性效應及其機制尚不明確。本課題以PEG修飾的CuInS₂/ZnS量子點為研究對象,旨在研究其對類神經(jīng)元PC12細胞的毒性效應并闡明其作用機制。方法:本實驗首先通過透射電子顯微鏡、動態(tài)光散射粒徑儀、紫外可見光吸收光譜以及熒光光譜對CuInS₂/ZnS-PEG量子點進行了表征。然后采用熒光顯微鏡和流式細胞術(shù)的方法觀察PC12細胞攝取量子點的情況;采用MTT方法檢測量子點對PC12細胞活率的影響;采用光學顯微鏡和免疫熒光分析觀察量子點對NGF誘導突觸生長的影響;采用全轉(zhuǎn)錄組測序技術(shù)結(jié)合GO數(shù)據(jù)庫和KEGG通路信息學分析,觀察量子點對基因表達譜和NGF相關(guān)受體和通路的影響,并采用實時熒光定量PCR進行驗證;最后,在蛋白水平上,采用蛋白抗體芯片分析對量子點對NGF下游的MAPK/ERK信號通路的影響,并采用蛋白質(zhì)免疫印跡進行驗證。結(jié)果:CuInS₂/... 

【文章頁數(shù)】：65 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第1章 引言
    1.1 量子點
    1.2 量子點的生物醫(yī)學應用
        1.2.1 量子點在生物醫(yī)學成像方面的研究及應用
        1.2.2 量子點在生物醫(yī)學診斷中的研究及應用
        1.2.3 量子點在生物醫(yī)學治療方面的研究及應用
    1.3 量子點的毒性研究進展
        1.3.1 量子點的毒性效應
        1.3.2 影響量子點毒性效應的因素
        1.3.3 量子點毒性機制研究進展
    1.4 量子點在神經(jīng)毒性方面的研究進展
    1.5 本實驗的研究內(nèi)容與意義
第2章 實驗材料、儀器與方法
    2.1 實驗材料
        2.1.1 量子點
        2.1.2 細胞株
        2.1.3 實驗試劑
    2.2 實驗儀器
    2.3 量子點的表征
    2.4 細胞復蘇與培養(yǎng)
    2.5 細胞傳代與凍存
    2.6 細胞攝取量子點
        2.6.1 熒光顯微鏡法
        2.6.2 流式細胞術(shù)法
    2.7 細胞活性檢測
    2.8 免疫熒光分析
    2.9 全轉(zhuǎn)錄組測序分析
    2.10 定量實時逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(q RT-PCR)
    2.11 蛋白質(zhì)印跡分析
    2.12 MAPK蛋白芯片分析
    2.13 統(tǒng)計學分析
第3章 結(jié)果
    3.1 CuInS_2/Zn S-PEG量子點的表征
    3.2 細胞攝取CuInS_2/Zn S-PEG量子點情況
    3.3 CuInS_2/Zn S-PEG量子點對細胞活率的影響
    3.4 CuInS_2/Zn S-PEG量子點引起PC12 細胞基因表達譜的變化
    3.5 CuInS_2/Zn S-PEG量子點下調(diào)NGF受體P75~(NTR)的表達
    3.6 CuInS_2/Zn S-PEG量子點抑制NGF誘導的PC12 細胞突觸的長度..
    3.7 CuInS_2/Zn S-PEG量子點抑制NGF誘導的PC12 細胞突觸的數(shù)量..
    3.8 在NGF刺激下,CuInS_2/Zn S-PEG量子點引起PC12 細胞基因表達譜的變化
    3.9 CuInS_2/Zn S-PEG量子點通過下調(diào)MAPK通路抑制NGF誘導的神經(jīng)突觸生長
第4章 討論
第5章 結(jié)論
參考文獻
《指導教師對學位論文的學術(shù)評語》
《學位論文答辯委員會決議書》
致謝
攻讀碩士學位期間的研究成果


【參考文獻】：
期刊論文
[1]神經(jīng)生長因子對周圍神經(jīng)損傷治療作用的研究進展[J]. 甘丹娜,王燦茂,宋少練,楊西曉.  中南藥學. 2019(12)
[2]量子點細胞毒性[J]. 韓曉樂,李擎宇,郝浩,劉晨音,胡軍成.  湖北科技學院學報(醫(yī)學版). 2019(04)
[3]Cytotoxicity and DNA Damage Effect of TGA-capped CdTe Quantum Dots[J]. LI Yan-bo 1,ZHANG Hai-xia 1,2,GUO Cai-xia 1,HU Gui-qin 3,DU Hai-ying 3,JIN Ming-hua 3,HUANG Pei-li 1*,SUN Zhi-wei 1,3* and YANG Wen-sheng 4 1.School of Public Health and Family Medicine,Capital Medical University,Beijing 100069,P.R.China;2.Public Health Institute,Beijing Chaoyang District Centre for Disease Control and Prevention,Beijing 100021,P.R.China;3.School of Public Health,Jilin University,Changchun 130021,P.R.China;4.Key Laboratory of Surface and Interface Chemistry of Jilin Province,College of Chemistry,Jilin University,Changchun 130012,P.R.China.  Chemical Research in Chinese Universities. 2012(02)

碩士論文
[1]PDGFR-β抑制劑AG-1295通過Erk通路促進MC3T3-E1細胞成骨分化[D]. 張永英.濟南大學 2012



本文編號：3682052