背景:近年來,隨著量子點(diǎn)在生物醫(yī)學(xué)等領(lǐng)域的應(yīng)用不斷增多,研究學(xué)者越來越關(guān)注量子點(diǎn)對環(huán)境和人類可能帶來的不良影響。已有研究表明,量子點(diǎn)會穿過血腦屏障進(jìn)入中樞神經(jīng)系統(tǒng),但其對神經(jīng)元細(xì)胞的毒性效應(yīng)及其機(jī)制尚不明確。本課題以PEG修飾的CuInS₂/ZnS量子點(diǎn)為研究對象,旨在研究其對類神經(jīng)元PC12細(xì)胞的毒性效應(yīng)并闡明其作用機(jī)制。方法:本實(shí)驗(yàn)首先通過透射電子顯微鏡、動態(tài)光散射粒徑儀、紫外可見光吸收光譜以及熒光光譜對CuInS₂/ZnS-PEG量子點(diǎn)進(jìn)行了表征。然后采用熒光顯微鏡和流式細(xì)胞術(shù)的方法觀察PC12細(xì)胞攝取量子點(diǎn)的情況;采用MTT方法檢測量子點(diǎn)對PC12細(xì)胞活率的影響;采用光學(xué)顯微鏡和免疫熒光分析觀察量子點(diǎn)對NGF誘導(dǎo)突觸生長的影響;采用全轉(zhuǎn)錄組測序技術(shù)結(jié)合GO數(shù)據(jù)庫和KEGG通路信息學(xué)分析,觀察量子點(diǎn)對基因表達(dá)譜和NGF相關(guān)受體和通路的影響,并采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR進(jìn)行驗(yàn)證;最后,在蛋白水平上,采用蛋白抗體芯片分析對量子點(diǎn)對NGF下游的MAPK/ERK信號通路的影響,并采用蛋白質(zhì)免疫印跡進(jìn)行驗(yàn)證。結(jié)果:CuInS₂/... 

【文章頁數(shù)】：65 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第1章 引言
    1.1 量子點(diǎn)
    1.2 量子點(diǎn)的生物醫(yī)學(xué)應(yīng)用
        1.2.1 量子點(diǎn)在生物醫(yī)學(xué)成像方面的研究及應(yīng)用
        1.2.2 量子點(diǎn)在生物醫(yī)學(xué)診斷中的研究及應(yīng)用
        1.2.3 量子點(diǎn)在生物醫(yī)學(xué)治療方面的研究及應(yīng)用
    1.3 量子點(diǎn)的毒性研究進(jìn)展
        1.3.1 量子點(diǎn)的毒性效應(yīng)
        1.3.2 影響量子點(diǎn)毒性效應(yīng)的因素
        1.3.3 量子點(diǎn)毒性機(jī)制研究進(jìn)展
    1.4 量子點(diǎn)在神經(jīng)毒性方面的研究進(jìn)展
    1.5 本實(shí)驗(yàn)的研究內(nèi)容與意義
第2章 實(shí)驗(yàn)材料、儀器與方法
    2.1 實(shí)驗(yàn)材料
        2.1.1 量子點(diǎn)
        2.1.2 細(xì)胞株
        2.1.3 實(shí)驗(yàn)試劑
    2.2 實(shí)驗(yàn)儀器
    2.3 量子點(diǎn)的表征
    2.4 細(xì)胞復(fù)蘇與培養(yǎng)
    2.5 細(xì)胞傳代與凍存
    2.6 細(xì)胞攝取量子點(diǎn)
        2.6.1 熒光顯微鏡法
        2.6.2 流式細(xì)胞術(shù)法
    2.7 細(xì)胞活性檢測
    2.8 免疫熒光分析
    2.9 全轉(zhuǎn)錄組測序分析
    2.10 定量實(shí)時(shí)逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(q RT-PCR)
    2.11 蛋白質(zhì)印跡分析
    2.12 MAPK蛋白芯片分析
    2.13 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
第3章 結(jié)果
    3.1 CuInS_2/Zn S-PEG量子點(diǎn)的表征
    3.2 細(xì)胞攝取CuInS_2/Zn S-PEG量子點(diǎn)情況
    3.3 CuInS_2/Zn S-PEG量子點(diǎn)對細(xì)胞活率的影響
    3.4 CuInS_2/Zn S-PEG量子點(diǎn)引起PC12 細(xì)胞基因表達(dá)譜的變化
    3.5 CuInS_2/Zn S-PEG量子點(diǎn)下調(diào)NGF受體P75~(NTR)的表達(dá)
    3.6 CuInS_2/Zn S-PEG量子點(diǎn)抑制NGF誘導(dǎo)的PC12 細(xì)胞突觸的長度..
    3.7 CuInS_2/Zn S-PEG量子點(diǎn)抑制NGF誘導(dǎo)的PC12 細(xì)胞突觸的數(shù)量..
    3.8 在NGF刺激下,CuInS_2/Zn S-PEG量子點(diǎn)引起PC12 細(xì)胞基因表達(dá)譜的變化
    3.9 CuInS_2/Zn S-PEG量子點(diǎn)通過下調(diào)MAPK通路抑制NGF誘導(dǎo)的神經(jīng)突觸生長
第4章 討論
第5章 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
《指導(dǎo)教師對學(xué)位論文的學(xué)術(shù)評語》
《學(xué)位論文答辯委員會決議書》
致謝
攻讀碩士學(xué)位期間的研究成果


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]神經(jīng)生長因子對周圍神經(jīng)損傷治療作用的研究進(jìn)展[J]. 甘丹娜,王燦茂,宋少練,楊西曉.  中南藥學(xué). 2019(12)
[2]量子點(diǎn)細(xì)胞毒性[J]. 韓曉樂,李擎宇,郝浩,劉晨音,胡軍成.  湖北科技學(xué)院學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版). 2019(04)
[3]Cytotoxicity and DNA Damage Effect of TGA-capped CdTe Quantum Dots[J]. LI Yan-bo 1,ZHANG Hai-xia 1,2,GUO Cai-xia 1,HU Gui-qin 3,DU Hai-ying 3,JIN Ming-hua 3,HUANG Pei-li 1*,SUN Zhi-wei 1,3* and YANG Wen-sheng 4 1.School of Public Health and Family Medicine,Capital Medical University,Beijing 100069,P.R.China;2.Public Health Institute,Beijing Chaoyang District Centre for Disease Control and Prevention,Beijing 100021,P.R.China;3.School of Public Health,Jilin University,Changchun 130021,P.R.China;4.Key Laboratory of Surface and Interface Chemistry of Jilin Province,College of Chemistry,Jilin University,Changchun 130012,P.R.China.  Chemical Research in Chinese Universities. 2012(02)

碩士論文
[1]PDGFR-β抑制劑AG-1295通過Erk通路促進(jìn)MC3T3-E1細(xì)胞成骨分化[D]. 張永英.濟(jì)南大學(xué) 2012



本文編號：3682052