目的探討雷帕霉素對高糖環(huán)境下足細(xì)胞自噬和損傷作用的機(jī)制。方法體外培養(yǎng)永生化小鼠腎小球足細(xì)胞（mouse podocyte cell 5,MPC5）并進(jìn)行分組:甘露醇等滲組（mannitol isotonic group,MG組）、高糖組（high glucose group,HG組）、雷帕霉素組（rapamycin group,RG組）以及自噬相關(guān)蛋白5-siRNA組（SiG組）。PCR和Western印跡檢測足細(xì)胞標(biāo)志Synaptopodin、自噬相關(guān)的ULK1以及m TOR通路相關(guān)蛋白p70S6K的表達(dá)。結(jié)果與MG組相比,HG組的Synaptopodin表達(dá)降低,自噬活性降低,p-ULK1以及p70S6K表達(dá)明顯升高。與HG組相比,RG組的Synaptopodin表達(dá)升高,自噬活性較高,p-ULK1以及p70S6K表達(dá)較低。SiG組表現(xiàn)出與HG組相似的變化趨勢。結(jié)論雷帕霉素可能通過m TOR-ULK1信號(hào)通路調(diào)節(jié)足細(xì)胞內(nèi)自噬反應(yīng)、減輕高糖環(huán)境引起的足細(xì)胞損傷。 

【文章頁數(shù)】：4 頁

【文章目錄】：
材料與方法
    一、細(xì)胞與材料
    二、細(xì)胞分組與處理
    三、細(xì)胞轉(zhuǎn)染
    四、qPCR檢測
    五、Western印跡檢測
    六、細(xì)胞免疫熒光
    七、統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
結(jié)果
    一、高糖條件下足細(xì)胞自噬活性的變化
    二、雷帕霉素處理高糖培養(yǎng)的足細(xì)胞后自噬活性的變化
    三、干擾自噬反應(yīng)后足細(xì)胞損傷的變化
討論



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