本文關(guān)鍵詞：毛細(xì)管高效液相色譜—質(zhì)譜定量分析中毛細(xì)管電加熱裝置和精氨酸標(biāo)記新方法的研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：隨著蛋白質(zhì)組學(xué)研究的不斷深入和技術(shù)的不斷發(fā)展,蛋白質(zhì)組學(xué)研究的重點(diǎn)從蛋白質(zhì)鑒定、翻譯后修飾和相互作用的定性研究,向不同生理和病理狀態(tài)蛋白質(zhì)表達(dá)的差異變化及對(duì)關(guān)鍵的目標(biāo)蛋白質(zhì)含量測(cè)定轉(zhuǎn)變,因此,定量蛋白質(zhì)組學(xué)已經(jīng)成為目前蛋白組學(xué)研究的熱點(diǎn)及難點(diǎn)。因此,本論文首先是針對(duì)定量蛋白質(zhì)組學(xué)研究中面臨的問題,即對(duì)復(fù)雜生物樣本進(jìn)行高效分離,以實(shí)現(xiàn)對(duì)低豐度蛋白質(zhì)進(jìn)行深度定性鑒定和定量分析中采用更長的毛細(xì)管色譜柱或采用裝填更小粒徑填料的毛細(xì)管色譜柱時(shí)容易引起毛細(xì)管色譜柱柱壓顯著升高,從而引發(fā)液相色譜儀中不同連接部位漏液?jiǎn)栴},制備了一種簡(jiǎn)單的電加熱裝置,并對(duì)其性能進(jìn)行了評(píng)價(jià)。其次針對(duì)目前復(fù)雜生物樣本中蛋白質(zhì)或目標(biāo)定量蛋白質(zhì)組定量過程中定量方法存在的缺陷,即準(zhǔn)確度和靈敏度不高的問題,發(fā)展了基于精氨酸化學(xué)標(biāo)記新方法。本論文由三章組成。第一章首先概述了定量蛋白質(zhì)組學(xué)的研究現(xiàn)狀、高效液相色譜分離的重要性、現(xiàn)狀及存在問題。其次概述了標(biāo)記定量在蛋白質(zhì)組學(xué)中的應(yīng)用現(xiàn)狀、藥物代謝酶及其絕對(duì)含量測(cè)定的意義等內(nèi)容。第二章介紹了一種簡(jiǎn)單的毛細(xì)管色譜柱電加熱裝置制作方法,并將該毛細(xì)管色譜柱電加熱裝置安裝于液質(zhì)聯(lián)用系統(tǒng),用牛血清蛋白酶切肽段混合物和酵母蛋白酶切肽段混合物從柱壓和柱效二方面來對(duì)該裝置的性能進(jìn)行了評(píng)價(jià)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：我們制作的毛細(xì)管柱電加熱裝置用于裝填粒徑為3 μm反相色譜填料的毛細(xì)管柱后,在最佳電流(100 mA)下對(duì)牛血清蛋白酶切肽段混合物進(jìn)行分離時(shí)的柱壓比不加電流分離時(shí)的柱壓降低了61%,覆蓋率增加了20%；在該最佳電流下對(duì)酵母蛋白酶切肽段混合物進(jìn)行分離時(shí),柱壓降低了50%,而柱效略有升高。這說明我們制作的毛細(xì)管色譜柱電加熱裝能顯著降低柱壓,這為在較低的柱壓條件下選擇更小顆粒色譜填料的毛細(xì)管色譜柱提供了一種有效途徑。第三章介紹了基于點(diǎn)擊化學(xué)的精氨酸化學(xué)標(biāo)記新方法的研究。基于琥珀酰亞胺基團(tuán)與肽段N-末段的反應(yīng)以及施陶丁格反應(yīng)的原理,將精氨酸作為標(biāo)簽加到肽段的N-末段,建立了精氨酸化學(xué)標(biāo)記新方法。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：精氨酸化學(xué)標(biāo)記能夠?qū)崿F(xiàn)對(duì)肽段的高效的標(biāo)記,滿足了標(biāo)記定量的要求；考察了隨意選擇的兩種同位素的標(biāo)記肽段的色譜保留行為,保留時(shí)間完全一致,使得不同來源的同一肽段可同時(shí)在質(zhì)譜碰撞池碎裂和質(zhì)譜分析,保證了定量結(jié)果的準(zhǔn)確度。該方法的建立為復(fù)雜生物樣本中蛋白質(zhì)或目標(biāo)蛋白質(zhì)組的定量分析提供了一種新的方法學(xué)選擇。
【關(guān)鍵詞】：定量蛋白質(zhì)組學(xué) 毛細(xì)管高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用 精氨酸標(biāo)記 毛細(xì)管色譜柱電加熱裝置
【學(xué)位授予單位】：安徽醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R917;O657.63
【目錄】：

• 中文摘要6-8
• Abstract8-10
• 第一章 前言10-19
• 1 定量蛋白質(zhì)組學(xué)10-11
• 2 毛細(xì)管高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用在蛋白質(zhì)組定量方法中的色譜技術(shù)11-14
• 3 毛細(xì)管高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用在蛋白組定量方法中的化學(xué)標(biāo)記方法14-17
• 4 藥物代謝酶及其絕對(duì)含量測(cè)定的意義17-18
• 5 本論文研究內(nèi)容18-19
• 第二章 一種簡(jiǎn)單的毛細(xì)管色譜柱電加熱裝置的制作方法及其性能評(píng)價(jià)19-36
• 1 實(shí)驗(yàn)部分19-23
• 2 結(jié)果與討論23-35
• 3 結(jié)論35-36
• 第三章 基于點(diǎn)擊化學(xué)的精氨酸標(biāo)記新方法研究36-57
• 1 實(shí)驗(yàn)部分36-40
• 2 結(jié)果討論40-56
• 3 結(jié)論56-57
• 參考文獻(xiàn)57-64
• 附錄64-65
• 致謝65-66
• 綜述66-76
• 參考文獻(xiàn)73-76

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前3條

1 周愿;單亦初;張麗華;張玉奎;;基于穩(wěn)定同位素標(biāo)記的蛋白質(zhì)組學(xué)定量方法研究進(jìn)展[J];色譜;2013年06期

2 成洪達(dá);李彤;張維冰;;溫度對(duì)高效液相色譜分離性能的影響[J];現(xiàn)代科學(xué)儀器;2006年05期

3 王宇光,高月,柴彪新,陳鵬,譚洪玲,趙永紅,肖成榮,孫圓媛,朱力軍;人參、藜蘆合用對(duì)大鼠肝P450酶活性及mRNA表達(dá)的調(diào)控作用[J];中國中藥雜志;2004年04期

  本文關(guān)鍵詞：毛細(xì)管高效液相色譜—質(zhì)譜定量分析中毛細(xì)管電加熱裝置和精氨酸標(biāo)記新方法的研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：366370